本發(fā)明屬于微生物應(yīng)用和食品釀造領(lǐng)域，涉及一株乳酸菌及其應(yīng)用，具體為一株發(fā)酵特性好，產(chǎn)風(fēng)味物質(zhì)多，適用于康普茶飲料釀造的副干酪乳酪桿菌(lacticaseibacillus?paracasei)xt-5。

背景技術(shù)：

1、副干酪乳酪桿菌是一種革蘭氏陽性同型發(fā)酵乳酸菌，常見于人類腸道、口腔中，通常用于發(fā)酵領(lǐng)域，具有豐富的益生特性。副干酪乳桿菌能夠調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)，改善脂質(zhì)代謝，并且具有抗氧化和抑菌作用。由于具有上述的益生特性，副干酪乳桿菌可以有效地維持宿主機(jī)體健康，進(jìn)而在食品和醫(yī)療領(lǐng)域發(fā)揮作用。而且有研究表明，副干酪乳桿菌能促進(jìn)包括酸、醇和酯類在內(nèi)的芳香物質(zhì)的形成，通過小比例添加可用于生產(chǎn)傳統(tǒng)的發(fā)酵食品，可較大程度增強(qiáng)其風(fēng)味。

2、康普茶是一種起源于中國的古老飲料，又稱紅茶菌或胃寶，是主要由酵母菌、醋酸菌、乳酸菌組成的共生菌群發(fā)酵茶糖水得到的具有獨(dú)特的風(fēng)味的茶飲料。康普茶不僅因其酸甜可口，氣泡豐富且低酒精度的口感，更因具有多種疾病預(yù)防與保健功能而深受人們喜愛。天然康普茶菌種組成復(fù)雜，含有很多的雜菌，發(fā)酵效率低，時(shí)間長，易產(chǎn)生有害物質(zhì)。民間傳統(tǒng)培養(yǎng)的康普茶菌種發(fā)酵特性和益生特性有很大差別，天然發(fā)酵的康普茶飲品對茶水中的營養(yǎng)成分不能充分利用；而且不能很好地控制發(fā)酵質(zhì)量，發(fā)酵時(shí)間短則發(fā)酵不完全，發(fā)酵時(shí)間長則口味過酸。人工構(gòu)建合成微生物群落用于康普茶的發(fā)酵，是提升康普茶的發(fā)酵效率、實(shí)現(xiàn)康普茶發(fā)酵可控的良好手段。而乳酸菌作為康普茶發(fā)酵的主要微生物之一，篩選發(fā)酵特性良好，可用于康普茶發(fā)酵的乳酸菌具有重要意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為了解決現(xiàn)有技術(shù)中的不足，本發(fā)明的目的在于提供一株副干酪乳酪桿菌及其在發(fā)酵水果康普茶中的應(yīng)用，本發(fā)明從傳統(tǒng)康普茶發(fā)酵液中分離、篩選和鑒定得到了一株具有良好耐酸、耐乙醇能力且發(fā)酵性能力良好的副干酪乳酪桿菌xt-5，與釀酒酵母和溫馴駒形桿菌共同構(gòu)成合成微生物群落用于康普茶的發(fā)酵，所得的康普茶飲料風(fēng)味醇厚，口感酸甜適中，且具有較高的總黃酮、總多酚含量和較強(qiáng)的抗氧化活性，具有良好的品質(zhì)。

2、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的具體方案為：

3、第一方面，本發(fā)明提供一株副干酪乳酪桿菌xt-5，其分類命名為：副干酪乳酪桿菌(lacticaseibacillus?paracasei)，已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏地址為中國北京市，保藏編號(hào)為cgmcc?n0.32759，保藏日期為2024年11月25日。

4、第二方面，本發(fā)明提供一種微生物菌劑，包括上述的副干酪乳酪桿菌xt-5。

5、第三方面，本發(fā)明提供上述的副干酪乳酪桿菌xt-5或微生物菌劑在食品領(lǐng)域中的應(yīng)用。進(jìn)一步地，所述應(yīng)用是指發(fā)酵制備水果康普茶飲料。

6、第四方面，本發(fā)明提供上述的副干酪乳酪桿菌xt-5發(fā)酵生產(chǎn)水果康普茶飲料的方法，包括以下步驟：

7、步驟一、斜面固體培養(yǎng)：將菌種接種在固體斜面培養(yǎng)基上，于32～37℃培養(yǎng)2～3天，得到斜面固體培養(yǎng)的活化菌種，備用；

8、步驟二、搖瓶菌種擴(kuò)大培養(yǎng)：取步驟一得到的活化菌種，加入無菌水制成菌懸液；將菌懸液接種于擴(kuò)大培養(yǎng)基中，接種量為液體種子擴(kuò)大培養(yǎng)基體積的5～10％，培養(yǎng)溫度32～37℃，搖床速度150～250r/min，培養(yǎng)時(shí)間1～2天，得到種子液；

9、步驟三、以步驟二制備的種子液作為種子進(jìn)行水果康普茶飲料的發(fā)酵生產(chǎn)。

10、作為對上述方法的進(jìn)一步優(yōu)化，步驟二中，所述的液體種子擴(kuò)大培養(yǎng)基的配方為：每1000ml培養(yǎng)基中包含蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉5g，葡萄糖20g，k2hpo4?2g，檸檬酸三胺2g，乙酸鈉5g，吐溫80?1ml，mgso4?0.58g，mnso4?0.25g，余量為水；

11、作為對上述方法的進(jìn)一步優(yōu)化，步驟三中，所述發(fā)酵生產(chǎn)的方法包括如下步驟：步驟(1)、將水煮沸后，按10-20g/l水的比例加入茶葉，加入80-100g/l蔗糖，制備茶糖水；然后按10％-20％的體積比向茶糖水中加入水果原汁，制備發(fā)酵培養(yǎng)基；

12、步驟(2)、向步驟(1)制備的發(fā)酵培養(yǎng)基中接種副干酪乳酪桿菌xt-5和釀酒酵母，25-30℃發(fā)酵1d；

13、步驟(3)、向步驟(2)所得發(fā)酵液中接種溫馴駒形桿菌cgmcc?22548，25-30℃發(fā)酵1-3d；步驟(4)將發(fā)酵液分離出來，靜置后熟5-10d。

14、作為對上述方法的更進(jìn)一步優(yōu)化，步驟(1)中，所述茶葉為綠茶、紅茶和普洱茶中的至少一種。所述水果原汁為蘋果汁、葡萄汁、梨汁中的任意一種或以上的組合。

15、作為對上述方法的更進(jìn)一步優(yōu)化，步驟(2)中，所述副干酪乳酪桿菌xt-5的接種比例為2％-4％、所述釀酒酵母的接種比例為1％-3％；步驟(3)中，所述溫馴駒形桿菌cgmcc22548的接種比例為3％-5％。

16、有益效果：本發(fā)明通過從傳統(tǒng)康普茶發(fā)酵液中分離、篩選和鑒定得到了一株具有良好耐酸、耐乙醇能力且發(fā)酵性能力良好的副干酪乳酪桿菌xt-5。本發(fā)明進(jìn)一步通過添加副干酪乳酪桿菌xt-5，并輔助添加釀酒酵母和溫馴駒形桿菌cgmcc?22548發(fā)酵水果康普茶飲料，與傳統(tǒng)康普茶發(fā)酵飲料相比，風(fēng)味優(yōu)良，具有令人愉悅的酸香，果香與蜂蜜香，并且還有淡淡的茶香。通過發(fā)酵，水果康普茶飲料的抗氧化活性與總黃酮、總多酚含量都比未發(fā)酵的有了較大提升，對人體有較大益生性。與傳統(tǒng)發(fā)酵方法不同，本發(fā)明發(fā)酵周期短，產(chǎn)品質(zhì)量高且發(fā)酵過程易于控制，提高了菌種的利用率，具有一定的工業(yè)應(yīng)用價(jià)值。

17、菌種保藏說明：副干酪乳酪桿菌xt-5，分類命名為副干酪乳酪桿菌(lacticaseibacillus?paracasei)，已進(jìn)行保藏，保藏單位為中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏地點(diǎn)為北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)中國科學(xué)院微生物研究所，保藏編號(hào)為cgmcc?n0.32759，保藏日期為2024年11月25日。

技術(shù)特征：

1.一株副干酪乳酪桿菌xt-5，其特征在于，其分類命名為：副干酪乳酪桿菌（lacticaseibacillus?paracasei），已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏地址為中國北京市，保藏編號(hào)為cgmcc?n0.32759，保藏日期為2024年11月25日。

2.一種微生物菌劑，其特征在于，所述微生物菌劑包括權(quán)利要求1所述的副干酪乳酪桿菌xt-5。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的副干酪乳酪桿菌xt-5或權(quán)利要求2所述的微生物菌劑在食品領(lǐng)域中的應(yīng)用。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述應(yīng)用為發(fā)酵制備水果康普茶飲料。

5.采用權(quán)利要求1所述的副干酪乳酪桿菌xt-5發(fā)酵生產(chǎn)水果康普茶飲料的方法，其特征在于：包括以下步驟：

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于：步驟二中，所述的液體種子擴(kuò)大培養(yǎng)基的配方為：每1000?ml培養(yǎng)基中包含蛋白胨10?g，牛肉膏10?g，酵母粉5?g，葡萄糖20?g，k2hpo42?g，檸檬酸三胺2?g，乙酸鈉5?g，吐溫80?1?ml，mgso4?0.58?g，mnso4?0.25?g，余量為水。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于：步驟三中，所述發(fā)酵生產(chǎn)的方法包括如下步驟：

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，步驟（1）中，所述茶葉為綠茶、紅茶和普洱茶中的至少一種。

9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，步驟（1）中，所述水果原汁為蘋果汁、葡萄汁、梨汁中的任意一種或以上的組合。

10.根據(jù)專利要求7所述的方法，其特征在于，步驟（2）中，所述副干酪乳酪桿菌xt-5的接種比例為2%-4%、所述釀酒酵母的接種比例為1%-3%；步驟（3）中，所述溫馴駒形桿菌cgmcc22548的接種比例為3%-5%。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及一株副干酪乳酪桿菌及其在發(fā)酵水果康普茶中的應(yīng)用，屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明從天然康普茶發(fā)酵液中分離并篩選得到的，是一種乳酸菌，已進(jìn)行保藏，保藏編號(hào)為CGMCC?No.32759。本發(fā)明通過將副干酪乳酪桿菌XT?5與一定比例的釀酒酵母和溫馴駒形桿菌CGMCC?22548復(fù)配，形成康普茶發(fā)酵劑，以茶糖水和水果原汁為原料，發(fā)酵生產(chǎn)水果康普茶飲料。所得的康普茶飲料風(fēng)味醇厚，口感酸甜適中，且具有較高的總黃酮、總多酚含量和較強(qiáng)的抗氧化活性，具有良好的品質(zhì)。

技術(shù)研發(fā)人員：孫建瑞,王大紅,王曉彤,張璐瑤,梁衛(wèi)娜,宋海茹,古紹彬
受保護(hù)的技術(shù)使用者：河南科技大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/15