本發(fā)明屬于抗體藥物制備領(lǐng)域，涉及一種新型抗肺纖維化中和抗體及藥物。

背景技術(shù)：

1、特發(fā)性肺纖維化（idiopathic?pulmonary?fibrosis，ipf）是一類典型的纖維化致死性疾病。

2、成纖維細(xì)胞持續(xù)活化的機(jī)制可能是纖維化進(jìn)程迅速且不可逆的關(guān)鍵，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（transforming?growth?factor-β，tgf-β）信號(hào)已被證實(shí)在成纖維細(xì)胞誘導(dǎo)活化的過程中發(fā)揮重要作用。研究表明，活化的tgfβ1（轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1）可以與細(xì)胞膜上的tgfbr2（tgf-β?receptor?2，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體2）結(jié)合，再招募細(xì)胞內(nèi)的tgfbr1（tgf-β?receptor1，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體1）上膜，使tgfbr1發(fā)生磷酸化后進(jìn)行信號(hào)的傳遞，隨后這個(gè)信號(hào)通過膜上的tgfbr1發(fā)生泛素化降解得以終止，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)gremlin2與tgfbr1結(jié)合，穩(wěn)定了tgfbr1在膜上的信號(hào)傳遞，進(jìn)而導(dǎo)致tgfβ信號(hào)的持續(xù)激活。通過基礎(chǔ)研究發(fā)現(xiàn)gremlin2是tgfbr1的配體，并通過基礎(chǔ)研究和人工智能（ai）深度分析出關(guān)鍵結(jié)合表位，通過優(yōu)化的ai算法設(shè)計(jì)針對(duì)關(guān)鍵抗原表位的單克隆抗體。

3、tgfβ超家族蛋白gremlin2是一個(gè)潛在的抗纖維化治療靶點(diǎn)。不同于tgfβ信號(hào)在各種細(xì)胞中的廣泛調(diào)控作用，gremlin2是成纖維細(xì)胞特異性靶向調(diào)控其活化的重要蛋白。gremlin2中和抗體的臨床轉(zhuǎn)化可能將為肺纖維化患者的治療帶來新的突破。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種新型抗肺纖維化中和抗體及藥物。

2、為達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：第一方面，提供一種抗肺纖維化中和抗體，由重鏈和輕鏈組成，所述重鏈包括重鏈可變區(qū)，所述重鏈可變區(qū)包括如seq?id?no.1所示的重鏈cdr1、如seq?id?no.2所示的重鏈cdr2和如seq?id?no.3所示的重鏈cdr3；所述輕鏈包括輕鏈可變區(qū)，所述輕鏈可變區(qū)包括如seq?id?no.4所示的輕鏈cdr1、如seq?idno.5所示的輕鏈cdr2和如seq?id?no.6所示的輕鏈cdr3。

3、進(jìn)一步地，所述重鏈的氨基酸序列如seq?id?no.8所示，所述輕鏈的氨基酸序列如seq?id?no.9所示。

4、進(jìn)一步地，所述抗肺纖維化中和抗體靶向gremlin2和tgfbr1的結(jié)合位點(diǎn)。

5、第二方面，提供一種藥物，包括上述的抗肺纖維化中和抗體，用于治療由gremlin2引起的肺部纖維化疾病。

6、進(jìn)一步地，所述藥物還包括：可藥用的載體。

7、本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明通過計(jì)算機(jī)深度學(xué)習(xí)設(shè)計(jì)靶向gremlin2-tgfbr1結(jié)合位點(diǎn)的中和抗體，克服了傳統(tǒng)中和抗體制備的大量實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，并在早期就可以利用計(jì)算機(jī)分析篩選到有效抗體序列，避免了傳統(tǒng)方法制備大量序列不明且效果無法保障的問題，減輕了研究人員后續(xù)細(xì)胞、動(dòng)物模型驗(yàn)證的工作量，過程穩(wěn)定、安全且高效，是臨床開發(fā)治療性抗體的新方法；本發(fā)明設(shè)計(jì)的gremlin2中和抗體適用于肺纖維化治療的后續(xù)臨床研究，抗纖維化效果顯著，且流程系統(tǒng)化、成本低、易于推廣。

技術(shù)特征：

1.一種抗肺纖維化中和抗體，其特征在于，所述抗肺纖維化中和抗體由重鏈和輕鏈組成，所述重鏈包括重鏈可變區(qū)，所述重鏈可變區(qū)包括如seq?id?no.1所示的重鏈cdr1、如seqid?no.2所示的重鏈cdr2和如seq?id?no.3所示的重鏈cdr3；所述輕鏈包括輕鏈可變區(qū)，所述輕鏈可變區(qū)包括如seq?id?no.4所示的輕鏈cdr1、如seq?id?no.5所示的輕鏈cdr2和如seq?id?no.6所示的輕鏈cdr3。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗肺纖維化中和抗體，其特征在于，所述重鏈的氨基酸序列如seq?id?no.8所示，所述輕鏈的氨基酸序列如seq?id?no.9所示。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗肺纖維化中和抗體，其特征在于，所述抗肺纖維化中和抗體靶向gremlin2和tgfbr1的結(jié)合位點(diǎn)。

4.一種藥物，其特征在于，包括權(quán)利要求1所述的抗肺纖維化中和抗體，用于治療由gremlin2引起的肺部纖維化疾病。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的藥物，其特征在于，所述藥物還包括可藥用的載體。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種新型抗肺纖維化中和抗體及藥物，屬于抗體藥物制備領(lǐng)域。本發(fā)明基于Alphafold、蛋白質(zhì)從頭設(shè)計(jì)等前沿人工智能技術(shù)，設(shè)計(jì)了靶向Gremlin2與TGF?β受體1結(jié)合位點(diǎn)的中和抗體，利用基因工程技術(shù)制備抗體，通過在體外重組，將目的抗體的基因片段插入到質(zhì)粒中，隨后通過將編輯好的質(zhì)粒轉(zhuǎn)入細(xì)胞系和細(xì)胞系的體外擴(kuò)增、培養(yǎng)，獲得基因片段在體外的轉(zhuǎn)錄、翻譯，從而制備抗體。本發(fā)明采用的人工智能方法設(shè)計(jì)中和抗體高效可靠，制備中和抗體的流程工藝簡(jiǎn)單，中和抗體均一性高、安全有效，在動(dòng)物模型中具有較好的抗肺纖維化功能，具有用于臨床治療肺纖維化的潛力。

技術(shù)研發(fā)人員：遲穎,許王婷,柯越海,張雪,宦才娟,周建英
受保護(hù)的技術(shù)使用者：浙江大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/15