本發(fā)明屬于水解膠原蛋白，具體涉及一種具有表面雙親性的水解膠原產品的制備方法及其產品和應用。

背景技術：

1、皮膚是人體最大的器官，一方面隨著年齡的增長，人體皮膚自身存在水分減少、膠原蛋白流失、內部結構塌陷等問題；另一方面，空氣污染、風吹日曬等環(huán)境因素也導致皮膚出現(xiàn)干燥、斑點、皺紋等問題。隨著生活水平的提高，消費者也越來越重視皮膚的保養(yǎng)，因此，需要一款產品既能滿足補充皮膚水分、膠原的需求，又能長效維持效果。

2、水解膠原，是以動物膠原為原料制備而成的多肽混合物，分子量分布在幾百到幾萬不等。由于水解膠原是膠原的水解產物，因此含有膠原的全部氨基酸。膠原中含有大量的羥脯氨酸、甘氨酸及天冬氨酸等極性官能團結構，能夠結合皮膚中的水分，形成穩(wěn)定的氫鍵。與此同時，膠原由于其與皮膚特殊結構的共同點，補充皮膚中流失的膠原蛋白，保持皮膚的完整性、支撐性，刺激皮膚中細胞活性，維持皮膚平整度及彈性。但膠原存在分子量大、不易被皮膚吸收利用的問題，水解膠原擁有膠原保濕性好的優(yōu)點，又具有比膠原更好的滲透性等優(yōu)點。

3、cn114516912a公開了一種水解膠原蛋白及其制備方法和應用。水解膠原蛋白制備方法包括：s1：對牛皮進行預處理，得到預處理牛皮；s2：對預處理牛皮進行勻漿消化，得到勻漿消化液；其中，勻漿消化包括勻漿處理和采用胃蛋白酶進行的消化處理；s3：對勻漿消化液進行吸附過濾，得到吸附過濾液；s4：對至少部分吸附過濾液依次進行濃縮換液、離子交換層析、二次濃縮換液、過濾除菌、離心精制，得到膠原蛋白；s5：收集步驟s1-s4的廢液，以收集的廢液和/或另一部分吸附過濾液作為水解前液，對水解前液進行酸水解，得到水解膠原蛋白。該發(fā)明能夠同時制備水解膠原蛋白和膠原蛋白，水解膠原蛋白的分子量均一性好，膠原蛋白的收率和純度高，產品質量優(yōu)異。

4、jp2006152108a公開一種水解膠原蛋白組合物，其在膠原蛋白再生方面表現(xiàn)優(yōu)異，并且作為化妝品、皮膚制劑和保健食品有助于美容和健康，所述方法為將從魚鱗、魚皮或魚骨中選擇的原料用水溶解、干燥和粉碎，并將從十二烷基硫酸鈉中選擇的一種溶解而得到的溶液，鹽酸胍或尿素浸于水中或浸于水中并用超聲波照射后，將溫度加熱至110℃至150℃提取水解膠原蛋白，用粗棉布過濾，離心脫水，通過凝膠過濾工藝制備膠原蛋白組合物。

5、水解膠原的滲透吸收性與其分子量大小相關，有研究表明，小分子量的水解膠原更易被吸收利用，隨著分子量升高，其吸收速率逐漸降低。然而現(xiàn)有技術中出現(xiàn)的水解膠原產品，除了存在分子量范圍不清導致滲透吸收性差的問題外，還存在保濕性不夠持久的自身缺陷問題。

技術實現(xiàn)思路

1、針對現(xiàn)有技術的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種具有表面雙親性的水解膠原產品的制備方法及其產品和應用，以解決化妝品中水解膠原滲透和吸收慢，皮膚保濕效果差的問題。

2、為達到此發(fā)明目的，本發(fā)明采用以下技術方案：

3、第一方面，本發(fā)明提供了一種具有表面雙親性的水解膠原產品的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括：

4、(1)以水解膠原酶解液為底物，然后和植物油、糖配置成發(fā)酵培養(yǎng)基，采用熊蜂生假絲酵母菌進行發(fā)酵；

5、(2)發(fā)酵后向發(fā)酵液中添加溶菌酶活化處理，然后滅菌、離心、過濾處理；

6、(3)將過濾處理后的發(fā)酵液凍干處理，得到所述具有表面雙親性的水解膠原產品。

7、本發(fā)明提供的方法將水解膠原酶解液通過熊蜂生假絲酵母菌發(fā)酵，既提高水解膠原轉化率和小分子化水平，同時產生具有表面雙親性的槐糖酯。本發(fā)明制備得到的水解膠原產品不僅分子量低，對皮膚的滲透性高，而且由于表面具有雙親性的槐糖脂在皮膚表面也起到鎖水滋潤的作用，從而更好的提高皮膚的保濕性，且所述產品具有優(yōu)異的產品特性，擁有廣闊的市場前景。

8、優(yōu)選地，步驟(1)所述水解膠原酶解液的制備方法包括：

9、(a)將絞碎后的魚皮用堿液浸泡處理，然后清洗去堿；

10、(b)將清洗后的魚皮與水混合，在90-100℃(例如可以為91℃、93℃、95℃、97℃或99℃等)下浸泡攪拌50-100min(例如可以為60min、70min、80min、90min或100min等)；

11、(c)將浸泡處理后的魚皮進行酶解，得到水解膠原酶解液。

12、本發(fā)明提供的水解膠原酶解液的制備方法中通過堿洗魚皮和魚皮的高溫處理，可以去除魚皮中的一些雜蛋白，提高水解膠原的純度；通過運用酶解技術，提高膠原水解的轉化率，并深度水解，實現(xiàn)分子量最小化水平，保證水解膠原在人體皮膚上快速滲透和吸收，從而提高皮膚的保濕效果。

13、優(yōu)選地，步驟(a)所述堿液的濃度為0.3-1％，例如可以為0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％或0.9％等。

14、優(yōu)選地，步驟(a)所述魚皮與堿液的料液比為1:(20-30)g/ml，例如可以為1:21g/ml、1:23g/ml、1:25g/ml、1:27g/ml或1:29g/ml等。

15、優(yōu)選地，步驟(a)所述浸泡的時間為5-10h，例如可以為6h、7h、8h、9h或10h等。

16、優(yōu)選地，步驟(b)所述魚皮和水的料液比為1:(4-8)g/ml，例如可以為1:4.5g/ml、1:5g/ml、1:5.5g/ml、1:6g/ml、1:6.5g/ml、1:7g/ml或1:7.5g/ml等。

17、優(yōu)選地，步驟(c)所述酶解處理所用酶包括堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、胃蛋白酶、復配蛋白酶中任意一種或至少兩種的組合。

18、優(yōu)選地，所述酶為復配蛋白酶和堿性蛋白酶。

19、優(yōu)選地，所述酶解的步驟為：先使用復合蛋白酶酶解，然后再試用堿性蛋白酶酶解。

20、優(yōu)選地，所述復合蛋白酶的用量為魚皮質量的0.2-0.5％，例如可以為0.25％、0.28％、0.3％、0.35％、0.38％、0.4％、0.45％或0.48％等。

21、優(yōu)選地，所述堿性蛋白酶的用量為魚皮質量的1-3％，例如可以為1.1％、1.3％、1.5％、1.7％、2％、2.2％、2.5％、2.7％或2.9％等。

22、優(yōu)選地，步驟(d)所述酶解后進行過濾處理。

23、優(yōu)選地，所述過濾的濾膜孔徑為0.1-0.5μm，例如可以為0.1μm、0.2μm、0.3μm、0.4μm或0.5μm等。

24、優(yōu)選地，步驟(1)所述糖包括葡萄糖。

25、優(yōu)選地，步驟(1)所述植物油包括菜籽油。

26、優(yōu)選地，步驟(1)所述發(fā)酵培養(yǎng)基中還包括氮源和/或無機鹽。

27、優(yōu)選地，所述氮源包括麥芽粉和/或酵母粉。

28、優(yōu)選地，所述無機鹽包括硫酸鎂。

29、優(yōu)選地，以質量百分含量計，所述發(fā)酵培養(yǎng)基中、植物油0.5-1.5％、糖0.5-1.5％、氮源0.1-1％、無機鹽0.01-0.1％，余量為酶解液。

30、優(yōu)選地，步驟(1)所述熊蜂生假絲酵母菌的種子液的接種量為1-3％(v/v)，例如可以為1.1％(v/v)、1.3％(v/v)、1.5％(v/v)、1.7％(v/v)、2％(v/v)、2.2％(v/v)、2.5％(v/v)、2.7％(v/v)或2.9％(v/v)等。

31、優(yōu)選地，所述步驟(1)所述發(fā)酵的溫度為20-35℃(例如可以為23℃、25℃、28℃、30℃、32℃或34℃等)，時間為45-60h(例如可以為46h、48h、50h、52h、55h、57h或59h等)。

32、優(yōu)選地，所述發(fā)酵在攪拌下進行，所述攪拌的轉速為200-400rpm，例如可以為220rpm、250rpm、280rpm、300rpm、320rpm、350rpm或380rpm等。

33、優(yōu)選地，步驟(2)所述滅菌的溫度為75-85℃(例如可以為76℃、78℃、80℃、82℃或84℃等)，時間為20-40min(例如可以為22min、25min、28min、30min、32min、35min或38min等)。

34、優(yōu)選地，步驟(2)所述離心的轉速為5000-7000rpm，例如可以為5200rpm、5500rpm、5800rpm、6000rpm、6200rpm、6500rpm或6800rpm等。

35、優(yōu)選地，步驟(2)所述過濾處理為分級膜過濾。

36、優(yōu)選地，所述分級膜處理的步驟包括：

37、將離心液依次經9000-11000da膜和900-1100da膜過濾后取過濾液，過濾液經150-250da膜過濾得截留液，即為過濾處理后發(fā)酵液。

38、優(yōu)選地，步驟(3)所述凍干處理在冷凍干燥機中進行。

39、上述數(shù)值范圍內的具體點值均可選擇，在此便不再一一贅述。

40、第二方面，本發(fā)明提供了一種具有表面雙親性的水解膠原產品，所述具有表面雙親性的水解膠原產品采用如第一方面所述的方法制備得到。

41、第三方面，本發(fā)明提供了一種如第二方面所述的具有表面雙親性的水解膠原產品在制備化妝品中的應用。

42、相對于現(xiàn)有技術，本發(fā)明具有以下有益效果：

43、(1)本發(fā)明的制備方法中通過發(fā)酵技術的加持，將未完全水解的膠原二次小分子化，使水解膠原分子量最小化水平和集中度更高；同時產生具有表面雙親性的物質槐糖脂，而從槐糖脂的性質可知，其有利于促進水解膠原與皮膚的相容性，提高水解膠原的滲透吸收效果，有力的促進皮膚保濕效果提高。另外，槐糖脂作為一種兩親物質，在皮膚表面也起到鎖水滋潤的作用，使得本產品保濕效果加倍。

44、(2)本發(fā)明在水解膠原酶解液制備過程中運用特定的冷酶解技術，提高膠原水解的轉化率，并深度水解，實現(xiàn)分子量最小化水平，保證水解膠原在人體皮膚上快速滲透和吸收，從而提高皮膚的保濕效果。

45、(3)本發(fā)明在制備過程中使用多重精濾技術，確保水解膠原純度高、電導率低、分子量分布水平可控，集中在200-1000區(qū)間，達到寡肽水平，提高水解膠原在皮膚上的滲透性和吸收性，確保皮膚快速吸收，提高保濕效果。