本發(fā)明屬于白血病治療領(lǐng)域，具體涉及vk4在制備治療白血病藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、白血?。╨eukemia）是最常見的一種惡性造血干細(xì)胞克隆性疾病，其特征是克隆性白血病細(xì)胞在骨髓和其他造血組織中大量積累和增殖，機(jī)制包括增殖不受控制、分化障礙和細(xì)胞凋亡受阻?？寺⌒园籽〖?xì)胞不僅浸潤其他非造血組織和器官，還同時抑制了正常的造血功能，高發(fā)病率、高死亡率及高復(fù)發(fā)率成為白血病治療的主要難點(diǎn)。

2、目前臨床上大部分類型白血病的治療方法主要包括化療、放療、造血干細(xì)胞移植、靶向治療和免疫治療：化療在很大程度上緩解了白血病的進(jìn)展，但化療過程中產(chǎn)生的耐藥性、化療藥物本身的毒副性以及化療后機(jī)體免疫低下導(dǎo)致的多器官功能障礙仍然是需要解決的難題；而放療的輻射對人體正常組織也同樣具有殺傷作用，副作用往往難以承受；由于移植及術(shù)后長期護(hù)理的費(fèi)用昂貴，使得異基因造血干細(xì)胞移植在一定程度上的治療受到限制；分子靶向藥物的高昂費(fèi)用及使用后可能出現(xiàn)的多系統(tǒng)副作用導(dǎo)致該種治療方案的使用未被廣泛應(yīng)用；盡管嵌合抗原受體-t細(xì)胞免疫療法治療在血液系統(tǒng)腫瘤展現(xiàn)了其潛力，但細(xì)胞因子釋放綜合征（最常見的副作用）在一定程度上也限制了其應(yīng)用。數(shù)十年來，白血病的首次完全緩解率及總體生存率在這些治療方法下較前均有提高，但白血病居高不下的復(fù)發(fā)率仍是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的難題，因此亟需開發(fā)新的治療藥物以緩解治療白血病所面臨的難題。

3、維生素k（vitamin?k，vk）是指一類結(jié)構(gòu)相似的化合物，具有2-甲基-1,4萘醌環(huán)和可變脂肪族鏈，包括維生素k1（vk1）、維生素k2（vk2）、維生素k3（vk3）和維生素k4（vk4）。menadiol?diacetate（醋酸甲萘氫醌，即vk4）是水溶性的vk2的人工合成衍生物，最初被用作臨床止血藥物。近年來研究發(fā)現(xiàn)vk4在實(shí)體瘤中具有良好的抗腫瘤活性，2013年jiang等人首次證明了vk4在前列腺癌pc-3細(xì)胞中的抗癌活性，2017年di等人則發(fā)現(xiàn)vk4可以通過線粒體功能障礙抑制u2os骨肉瘤細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。盡管vk4已被證明在實(shí)體瘤中具有抗腫瘤作用，但尚未有vk4抗白血病的研究，本研究的目的在于探討vk4對人白血病細(xì)胞增殖與凋亡的影響，并探索vk4作用的分子機(jī)制，旨在為臨床治療白血病提供新的思路及治療選擇。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對背景技術(shù)所提內(nèi)容，本發(fā)明提供了vk4在制備治療白血病藥物中的應(yīng)用，目的在于研究vk4對人白血病細(xì)胞增殖與凋亡的影響，并探索vk4作用的分子機(jī)制，旨在為臨床治療白血病提供新的思路及治療選擇。

2、本發(fā)明提供了vk4在制備治療白血病藥物中的應(yīng)用。

3、進(jìn)一步地，vk4通過jak/stat信號通路抑制白血病細(xì)胞增殖。

4、進(jìn)一步地，所述白血病為人急性髓系白血病、人急性淋巴細(xì)胞白血病或人慢性髓系白血病中的任意一種。

5、進(jìn)一步地，所述白血病為人急性髓系白血病。

6、本發(fā)明還提供vk4在制備誘導(dǎo)白血病細(xì)胞發(fā)生周期阻滯或促進(jìn)白血病細(xì)胞凋亡的藥物中的應(yīng)用。

7、本發(fā)明還提供vk4在制備抗白血病的jak/stat抑制劑中的應(yīng)用。

8、一種用于白血病治療的藥物，所述藥物包括vk4及藥物學(xué)上可接受的輔料。

9、進(jìn)一步地，所述輔料包括稀釋劑、填充劑、賦形劑、粘合劑、濕潤劑、崩釋劑、表面活性劑、潤滑劑和香味劑中的至少一種。

10、進(jìn)一步地，所述藥物的劑型為注射劑。

11、進(jìn)一步地，所述注射劑的劑量為2.5-10?mg/kg。

12、本發(fā)明將對數(shù)生長期的hl60、jurkat和k562細(xì)胞經(jīng)不同濃度vk4作用相應(yīng)時間后，采用cck-8法檢測細(xì)胞活力并計(jì)算ic50值；通過流式細(xì)胞術(shù)檢測vk4處理白血病細(xì)胞后周期分布、凋亡及線粒體膜電位水平的變化；通過蛋白免疫印跡技術(shù)（western?blotting,?wb）檢測vk4作用后白血病細(xì)胞內(nèi)周期與凋亡相關(guān)蛋白及通路相關(guān)蛋白的表達(dá)情況。使用jak2/stat3小分子抑制劑ag490研究vk4與jak/stat信號通路的關(guān)聯(lián)，并應(yīng)用cck-8、流式細(xì)胞術(shù)和wb驗(yàn)證vk4是否通過jak/stat信號通路發(fā)揮抗白血病作用。最后通過尾靜脈注射hl60細(xì)胞在balb/c?nude小鼠中構(gòu)建白血病模型，通過瑞氏染色、免疫組化和h&e染色驗(yàn)證vk4的體內(nèi)抗白血病效應(yīng)及評估藥物毒性。

13、cck-8檢測結(jié)果顯示，vk4可以明顯抑制白血病細(xì)胞hl60、jurkat和k562的增殖作用，其ic50分別為5.35?μm、8.44?μm和11.59?μm。流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果顯示，vk4可以誘導(dǎo)hl60細(xì)胞和jurkat細(xì)胞發(fā)生s期周期阻滯，誘導(dǎo)k562細(xì)胞發(fā)生g2/m期周期阻滯；vk4通過內(nèi)源性線粒體途徑誘導(dǎo)hl60和k562細(xì)胞發(fā)生凋亡，通過內(nèi)源性和外源性兩種途徑誘導(dǎo)jurkat細(xì)胞發(fā)生凋亡。cck-8、流式細(xì)胞術(shù)和wb的共同結(jié)果顯示vk4通過jak/stat信號通路抑制hl60細(xì)胞和k562細(xì)胞增殖。

14、本發(fā)明的有益效果是：

15、本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)vk4可以通過周期阻滯和誘導(dǎo)凋亡來抑制白血病細(xì)胞增殖，vk4通過阻斷jak/stat信號通路抑制hl60細(xì)胞和k562細(xì)胞增殖。小鼠白血病模型經(jīng)瑞氏染色、免疫組化和h&e染色結(jié)果顯示，vk4在體內(nèi)同樣具有抗白血病作用，且無明顯肝、腎損傷，有望成為白血病的潛在治療藥物。

技術(shù)特征：

1.vk4在制備治療白血病藥物中的應(yīng)用。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述應(yīng)用，其特征在于，vk4通過jak/stat信號通路抑制白血病細(xì)胞增殖。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述應(yīng)用，其特征在于，所述白血病為人急性髓系白血病、人急性淋巴細(xì)胞白血病或人慢性髓系白血病中的任意一種。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述應(yīng)用，其特征在于，所述白血病為人急性髓系白血病。

5.vk4在制備誘導(dǎo)白血病細(xì)胞發(fā)生周期阻滯或促進(jìn)白血病細(xì)胞凋亡的藥物中的應(yīng)用。

6.vk4在制備抗白血病的jak/stat抑制劑中的應(yīng)用。

7.一種用于白血病治療的藥物，其特征在于，所述藥物包括vk4及藥物學(xué)上可接受的輔料。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述藥物，其特征在于，所述輔料包括稀釋劑、填充劑、賦形劑、粘合劑、濕潤劑、崩釋劑、表面活性劑、潤滑劑和香味劑中的至少一種。

9.根據(jù)權(quán)利要求7所述藥物，其特征在于，所述藥物的劑型為注射劑。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述藥物，其特征在于，所述注射劑的劑量為2.5-10?mg/kg。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了VK4在制備治療白血病藥物中的應(yīng)用，屬于白血病治療領(lǐng)域。本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)VK4可以通過周期阻滯和誘導(dǎo)凋亡來抑制白血病細(xì)胞增殖，VK4通過阻斷JAK/STAT信號通路抑制HL60細(xì)胞和K562細(xì)胞增殖。小鼠白血病模型經(jīng)瑞氏染色、免疫組化和H&E染色結(jié)果顯示，VK4在體內(nèi)同樣具有抗白血病作用，且無明顯肝、腎損傷，能夠?yàn)榕R床治療白血病提供新的藥物選擇。

技術(shù)研發(fā)人員：朱惠芳,李秀鈺,朱鵬程,胡紹雯
受保護(hù)的技術(shù)使用者：贛南醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/15