技術特征：

1.rtn4基因編碼蛋白功能喪失細胞系在抑制prrsv復制中應用。

2.rtn4基因編碼蛋白功能喪失細胞系在抗prrsv動物育種中的應用。

3.如權利要求1或2所述應用，其特征在于，所述使rtn4基因編碼蛋白的功能喪失的方法包括基因敲除、基因突變或基因插入。

4.一種特異性靶向rtn4基因的sgrna，其特征在于，包括sgrna1和sgrna2，sgrna1的核苷酸序列如seq?id?no:1，sgrna2的核苷酸序列如seq?id?no:2所示。

5.如權利要求4所述sgrna在敲除rtn4基因中的應用。

6.如權利要求4所述sgrna在制備rtn4基因編碼蛋白功能喪失細胞系中的應用。

7.一種用于敲除rtn4基因的產(chǎn)品，其特征在于，所述產(chǎn)品包括權利要求4所述sgrna或靶向敲除rtn4基因的打靶載體，所述靶向敲除rtn4基因的打靶載體包括權利要求4所述sgrna和cas9蛋白基因的編碼序列。

8.如權利要求7所述的產(chǎn)品的任一應用，其特征在于：

9.一種rtn4基因編碼蛋白功能喪失細胞系的構建方法，其特征在于，所述方法為：

10.如權利要求8所述方法，其特征在于，所述方法為crispr-cas9，包括以下步驟：

技術總結
本發(fā)明提供一種RTN4基因編碼蛋白功能喪失細胞系及其構建方法，選擇野生型Marc?145細胞系作為基礎，使用Cas9在引導序列的引導下對RTN4基因進行切割，實現(xiàn)RTN4基因的敲除，導致RTN4蛋白無法表達，得到RTN4基因敲除的Marc?145細胞，可以有效抑制Ⅱ型PRRSV感染，為后續(xù)獲得可有效抑制PRRSV感染且不影響豬生長性能的豬群提供了理論基礎。

技術研發(fā)人員：歐陽紅生,逄大欣,賈俊博,袁泓明,楊琳,郝文杰
受保護的技術使用者：赤峰家育種業(yè)科技有限公司
技術研發(fā)日：
技術公布日：2025/5/15