本發(fā)明涉及微生物制劑，尤其涉及一種降低芽孢類(lèi)液態(tài)農(nóng)用微生物菌劑中活菌數(shù)損失率的方法。

背景技術(shù)：

1、農(nóng)用微生物菌劑microbialinoculantsin?agriculture(gb?20287-2006農(nóng)用微生物菌劑產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn))是指目標(biāo)微生物(有效菌)經(jīng)過(guò)工業(yè)化生產(chǎn)擴(kuò)繁后加工制成的活菌制劑。它具有直接或間接改良土壤，恢復(fù)地力，維持根際微生物區(qū)系平衡，降解有毒、有害物質(zhì)等作用；應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)，通過(guò)其中所含微生物的生命活動(dòng)，增加植物養(yǎng)分的供應(yīng)量或促進(jìn)植物生長(zhǎng)、改善農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)及農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境。

2、農(nóng)用微生物菌劑產(chǎn)品劑型有液體、粉劑和顆粒三種，其中產(chǎn)品指標(biāo)之一是有效活菌數(shù)。液態(tài)農(nóng)用微生物菌劑產(chǎn)品因其水分含量高，導(dǎo)致微生物衰亡周期短，活菌數(shù)損失率高。所以，提供一種降低液態(tài)農(nóng)用微生物菌劑中活菌數(shù)損失率的方法具有重要意義。

3、芽孢(endospore)又稱(chēng)內(nèi)生孢子，是細(xì)菌休眠體。芽孢含水量極低，抗逆性強(qiáng)，能經(jīng)受高溫、紫外線(xiàn)、電離輻射以及多種化學(xué)物質(zhì)滅殺。產(chǎn)芽孢細(xì)菌在營(yíng)養(yǎng)條件缺乏，或是處于不適合生長(zhǎng)的環(huán)境時(shí)，能夠在菌體內(nèi)形成圓形或橢圓形的芽孢休眠體，當(dāng)條件適宜時(shí)重新成為一個(gè)細(xì)菌(營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞)。

4、目前，現(xiàn)有技術(shù)中大多在液態(tài)農(nóng)用微生物菌劑中添加抑制芽孢桿菌菌體生長(zhǎng)的化學(xué)添加劑，如山梨酸鉀，使菌體處于休眠狀態(tài)，減少儲(chǔ)存過(guò)程中菌體大量死亡。但化學(xué)添加劑對(duì)于芽孢桿菌的活性和益生效果具有一定的損害，影響液態(tài)農(nóng)用微生物菌劑的應(yīng)用效果。因此，有必要提供一種簡(jiǎn)單可行且安全的降低芽孢類(lèi)液態(tài)農(nóng)用微生物菌劑中活菌數(shù)損失率的方法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于提供一種簡(jiǎn)單可行且安全的降低芽孢類(lèi)液態(tài)農(nóng)用微生物菌劑中活菌數(shù)損失率的方法。

2、為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：

3、本發(fā)明提供了一種降低芽孢類(lèi)液態(tài)農(nóng)用微生物菌劑中活菌數(shù)損失率的方法，待芽孢桿菌生長(zhǎng)至穩(wěn)定期后，將芽孢桿菌培養(yǎng)基的溫度升高至41～46℃，繼續(xù)培養(yǎng)8～14h，作為液態(tài)農(nóng)用微生物菌劑進(jìn)行包裝。

4、優(yōu)選的，所述芽孢桿菌包括枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌和蘇云金芽孢桿菌中的任意一種或幾種。

5、優(yōu)選的，所述穩(wěn)定期為穩(wěn)定期后期。

6、優(yōu)選的，將芽孢桿菌培養(yǎng)基的溫度升高至42～45℃，繼續(xù)培養(yǎng)10～12h。

7、優(yōu)選的，所述芽孢桿菌培養(yǎng)基中含有8～12g/l蛋白胨、2～4g/l牛肉浸粉和3～7g/l氯化鈉。

8、優(yōu)選的，所述包裝時(shí)液態(tài)農(nóng)用微生物菌劑中的芽孢率大于90％，活菌數(shù)為1×109cfu/ml～5×109cfu/ml。

9、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：

10、本發(fā)明提供了一種降低芽孢類(lèi)液態(tài)農(nóng)用微生物菌劑中活菌數(shù)損失率的方法，待芽孢桿菌生長(zhǎng)至穩(wěn)定期后期，未達(dá)到衰亡期時(shí)，通過(guò)物理升溫的方式加速芽孢桿菌菌株芽孢化，使芽孢率達(dá)到90％以上，此時(shí)培養(yǎng)基中的養(yǎng)分不足，當(dāng)溫度降低后，培養(yǎng)基無(wú)法為芽孢桿菌提供充足的營(yíng)養(yǎng)條件，芽孢桿菌無(wú)法重新形成活躍的細(xì)菌(營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞)，能夠有效減少包裝后的液態(tài)農(nóng)用微生物菌劑在保存期內(nèi)的活菌數(shù)損失率，從而達(dá)到提高液態(tài)農(nóng)用微生物菌劑產(chǎn)品貨架期的目的。

技術(shù)特征：

1.一種降低芽孢類(lèi)液態(tài)農(nóng)用微生物菌劑中活菌數(shù)損失率的方法，其特征在于，待芽孢桿菌生長(zhǎng)至穩(wěn)定期后，將芽孢桿菌培養(yǎng)基的溫度升高至41～46℃，繼續(xù)培養(yǎng)8～14h，作為液態(tài)農(nóng)用微生物菌劑進(jìn)行包裝。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述芽孢桿菌包括枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌和蘇云金芽孢桿菌中的任意一種或幾種。

3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述穩(wěn)定期為穩(wěn)定期后期。

4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，將芽孢桿菌培養(yǎng)基的溫度升高至42～45℃，繼續(xù)培養(yǎng)10～12h。

5.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述芽孢桿菌培養(yǎng)基中含有8～12g/l蛋白胨、2～4g/l牛肉浸粉和3～7g/l氯化鈉。

6.如權(quán)利要求1～5任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述包裝時(shí)液態(tài)農(nóng)用微生物菌劑中的芽孢率大于90％，活菌數(shù)為1×109cfu/ml～5×109cfu/ml。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種降低芽孢類(lèi)液態(tài)農(nóng)用微生物菌劑中活菌數(shù)損失率的方法，屬于微生物制劑技術(shù)領(lǐng)域。所述方法為：待芽孢桿菌生長(zhǎng)至穩(wěn)定期后，將芽孢桿菌培養(yǎng)基的溫度升高至41～46℃，繼續(xù)培養(yǎng)8～14h，作為液態(tài)農(nóng)用微生物菌劑進(jìn)行包裝。本發(fā)明首先將芽孢桿菌培養(yǎng)至穩(wěn)定期后期，此時(shí)培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被大量消耗，再通過(guò)物理升溫的方式加速芽孢桿菌菌株芽孢化，當(dāng)溫度降低后，培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)無(wú)法支撐芽孢桿菌從休眠的芽孢狀態(tài)轉(zhuǎn)化為活躍的細(xì)菌細(xì)胞狀態(tài)，從而能夠有效減少包裝后的液態(tài)農(nóng)用微生物菌劑在保存期內(nèi)的活菌數(shù)損失率，室溫保存一個(gè)月后活菌數(shù)損失率僅為8.0～17.91％。

技術(shù)研發(fā)人員：王風(fēng)青,李麗,王勇,劉軍,李仲玄,廖鈺婷,余立強(qiáng),劉平,柯丹,畢長(zhǎng)富
受保護(hù)的技術(shù)使用者：四川輕化工大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/4/7