本發(fā)明屬于生物，具體涉及胃蛋白酶原i納米抗體及其應用。

背景技術(shù)：

1、胃蛋白酶原i(pepsinogen?i，簡稱pgi)是由胃部分泌的參與消化的兩種胃蛋白酶的前體之一，由胃底腺的胃酶細胞和粘液頸細胞合成并或由賁門腺和胃竇幽門腺的黏液頸細胞以及十二指腸上段合成產(chǎn)生并分泌至胃或腸道。人pgi是一條由388個氨基酸組成的多肽鏈，其本身不具有活性，在胃腔可被胃酸或已激活的胃蛋白酶剪切加工成為成熟的胃蛋白酶(pepsin)。胃蛋白酶能水解食物中的蛋白質(zhì)，它主要作用于蛋白質(zhì)及多肽分子中含苯丙氨酸或酪氨酸的肽鍵上。通常情況下，約有1％的胃蛋白酶原透過胃黏膜毛細血管進入血液循環(huán)，進入血液循環(huán)的胃蛋白酶原在血液中非常穩(wěn)定。當胃黏膜發(fā)生病理變化時，血清中胃蛋白酶原的含量也隨之改變。pgi是檢測胃泌酸腺細胞功能的指針，胃酸分泌增多pgi升高，分泌減少或胃粘膜腺體萎縮pgi降低。因此，監(jiān)測血清中pgi的濃度可以作為監(jiān)測胃黏膜狀態(tài)的手段：(1)幽門螺桿菌感染篩查：感染患者血液中pgi含量顯著增高，康復后含量下降；(2)胃潰瘍：血清pgi含量升高提示人體可能存在胃潰瘍，尤其處于活動期或與和其的患者血清pgi含量顯著升高；(3)胃癌：血清pgi含量降低時胃癌的高危信號，便于提早診斷胃癌。

2、目前，科學研究或臨床診斷檢測pgi主要是依賴于抗體，市面上已有多種pgi的單克隆抗體公開或銷售，制備這些抗體的技術(shù)方案是：(1)組織提取或重組表達pgi蛋白質(zhì)抗原；(2)將抗原注射至鼠、兔、猴等動物體內(nèi)，依靠動物的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗體；(3)采集動物的血液并分離、提取出血清，再進一步分離出含有特異性抗體的成分。

3、然而，上述基于鼠等動物的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生pgi的抗體并分離提取的技術(shù)，有以下缺點：(1)抗體的穩(wěn)定性較差，需要在低溫(4攝氏度)下進行儲藏、運輸、測試與驗證等工作才能維持抗體的濃度、特異性等特征，不利于長途運輸和普及檢測；(2)規(guī)?；可a(chǎn)成品高。上述單克隆抗體是全長的免疫球蛋白(igg)，需要反復免疫注射動物并從動物體液中歐給分離提純抗體，或是在哺乳動物細胞等成本較為高昂的表達系統(tǒng)中進行重組表達后進行分離、純化提取，操作復雜、成本昂貴，不利于規(guī)?；可a(chǎn)。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明旨在開發(fā)基于羊駝免疫系統(tǒng)的納米抗體，獲得能夠特異性識別并結(jié)合pgi納米抗體并進行批量生產(chǎn)制備。

2、本發(fā)明第一方面的目的，在于提供特異性結(jié)合胃蛋白酶原i的納米抗體或其抗原結(jié)合片段。

3、本發(fā)明第二方面的目的，在于提供特異性結(jié)合胃蛋白酶原i的重鏈抗體或其抗原結(jié)合片段。

4、本發(fā)明第三方面的目的，在于提供嵌合抗原受體。

5、本發(fā)明第四方面的目的，在于提供多特異性抗體或其抗原結(jié)合片段。

6、本發(fā)明第五方面的目的，在于提供分離的核酸分子。

7、本發(fā)明第六方面的目的，在于提供一種載體。

8、本發(fā)明第七方面的目的，在于提供一種細胞。

9、本發(fā)明第八方面的目的，在于提供本發(fā)明第一方面的納米抗體或其抗原結(jié)合片段、第二方面的重鏈抗體或其抗原結(jié)合片段、第三方面的嵌合抗原受體、或第四方面的多特異性抗體或其抗原結(jié)合片段的制備方法。

10、本發(fā)明第九方面的目的，在于提供偶聯(lián)物。

11、本發(fā)明第十方面的目的，在于提供藥物組合物。

12、本發(fā)明第十一方面的目的，在于提供診斷或治療性試劑盒。

13、本發(fā)明第十二方面的目的，在于提供本發(fā)明第一方面的納米抗體或其抗原結(jié)合片段、第二方面的重鏈抗體或其抗原結(jié)合片段、第三方面的嵌合抗原受體、第四方面的多特異性抗體或其抗原結(jié)合片段、第五方面的核酸分子、第六方面的載體、第七方面的細胞、第九方面的偶聯(lián)物、或第十方面的藥物組合物的應用。

14、為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是：

15、本發(fā)明的第一方面，提供特異性結(jié)合胃蛋白酶原i的納米抗體或其抗原結(jié)合片段，所述納米抗體或其抗原結(jié)合片段包括重鏈可變區(qū)，所述重鏈可變區(qū)包括：具有如seq?idno：40-70中任一個所示的重鏈可變區(qū)中包括的cdr-h1、cdr-h2和cdr-h3的氨基酸序列，或者與所述重鏈可變區(qū)中含有的cdr-h1、cdr-h2或cdr-h3的氨基酸序列相比具有一個或幾個氨基酸的置換、缺失或添加的氨基酸序列。

16、在一些實施方式中，所述重鏈可變區(qū)包括：

17、a1)具有seq?id?no:71所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:102所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:133所示氨基酸序列的cdr-h3；或

18、a2)具有seq?id?no:72所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:103所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:134所示氨基酸序列的cdr-h3；或

19、a3)具有seq?id?no:73所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:104所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:135所示氨基酸序列的cdr-h3；或

20、a4)具有seq?id?no:74所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:105所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:136所示氨基酸序列的cdr-h3；或

21、a5)具有seq?id?no:75所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:106所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:137所示氨基酸序列的cdr-h3；或

22、a6)具有seq?id?no:76所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:107所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:138所示氨基酸序列的cdr-h3；或

23、a7)具有seq?id?no:77所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:108所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:139所示氨基酸序列的cdr-h3；或

24、a8)具有seq?id?no:78所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:109所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:140所示氨基酸序列的cdr-h3；或

25、a9)具有seq?id?no:79所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:110所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:141所示氨基酸序列的cdr-h3；或

26、a10)具有seq?id?no:80所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:111所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:142所示氨基酸序列的cdr-h3；或

27、a11)具有seq?id?no:81所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:112所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:143所示氨基酸序列的cdr-h3；或

28、a12)具有seq?id?no:82所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:113所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:144所示氨基酸序列的cdr-h3；或

29、a13)具有seq?id?no:83所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:114所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:145所示氨基酸序列的cdr-h3；或

30、a14)具有seq?id?no:84所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:115所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:146所示氨基酸序列的cdr-h3；或

31、a15)具有seq?id?no:85所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:116所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:147所示氨基酸序列的cdr-h3；或

32、a16)具有seq?id?no:86所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:117所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:148所示氨基酸序列的cdr-h3；或

33、a17)具有seq?id?no:87所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:118所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:149所示氨基酸序列的cdr-h3；或

34、a18)具有seq?id?no:88所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:119所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:150所示氨基酸序列的cdr-h3；或

35、a19)具有seq?id?no:89所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:120所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:151所示氨基酸序列的cdr-h3；或

36、a20)具有seq?id?no:90所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:121所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:152所示氨基酸序列的cdr-h3；或

37、a21)具有seq?id?no:91所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:122所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:153所示氨基酸序列的cdr-h3；或

38、a22)具有seq?id?no:92所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:123所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:154所示氨基酸序列的cdr-h3；或

39、a23)具有seq?id?no:93所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:124所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:155所示氨基酸序列的cdr-h3；或

40、a24)具有seq?id?no:94所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:125所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:156所示氨基酸序列的cdr-h3；或

41、a25)具有seq?id?no:95所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:126所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:157所示氨基酸序列的cdr-h3；或

42、a26)具有seq?id?no:96所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:127所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:158所示氨基酸序列的cdr-h3；或

43、a27)具有seq?id?no:97所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:128所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:159所示氨基酸序列的cdr-h3；或

44、a28)具有seq?id?no:98所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:129所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:160所示氨基酸序列的cdr-h3；或

45、a29)具有seq?id?no:99所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:130所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:161所示氨基酸序列的cdr-h3；或

46、a30)具有seq?id?no:100所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:131所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:162所示氨基酸序列的cdr-h3；或

47、a31)具有seq?id?no:101所示氨基酸序列的cdr-h1、具有seq?id?no:132所示氨基酸序列的cdr-h2和具有seq?id?no:163所示氨基酸序列的cdr-h3；或。

48、

49、在一些實施方式中，所述特異性結(jié)合胃蛋白酶原i的納米抗體或其抗原結(jié)合片段的重鏈可變區(qū)還包括重鏈可變區(qū)的框架區(qū)。

50、在一些實施方式中，所述重鏈可變區(qū)的框架區(qū)包括來源于鼠、靈長目動物、牛、馬、牛、豬、綿羊、山羊、犬、貓、兔、駱駝、驢、鹿、貂、雞、鴨或鵝的免疫球蛋白的重鏈可變區(qū)的框架區(qū)或其突變體。

51、在一些實施方式中，所述重鏈可變區(qū)包括seq?id?no:40-70中任一個所示的氨基酸序列，或與其相比具有一個或幾個氨基酸的置換、缺失或添加的氨基酸序列，或與其具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列同一性的氨基酸序列。

52、在一些實施方式中，所述胃蛋白酶原i為人胃蛋白酶原i；進一步為氨基酸序列如seq?id?no:1所示的胃蛋白酶原i。

53、本發(fā)明的第二方面，提供特異性結(jié)合胃蛋白酶原i的重鏈抗體或其抗原結(jié)合片段，其包括免疫球蛋白fc結(jié)構(gòu)域和本發(fā)明第一方面的納米抗體或其抗原結(jié)合片段。

54、在一些實施方式中，所述免疫球蛋白fc結(jié)構(gòu)域包括來源于鼠、靈長目動物、牛、馬、牛、豬、綿羊、山羊、犬、貓、兔、駱駝、驢、鹿、貂、雞、鴨或鵝的免疫球蛋白的fc結(jié)構(gòu)域或其突變體。

55、本發(fā)明的第三方面，提供嵌合抗原受體，其包括抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域和胞內(nèi)信號傳導結(jié)構(gòu)域，所述抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包括本發(fā)明第一方面的納米抗體或其抗原結(jié)合片段或第二方面的重鏈抗體或其抗原結(jié)合片段。

56、本發(fā)明的第四方面，提供多特異性抗體或其抗原結(jié)合片段，其包括兩種或者兩種以上(例如三種或四種)的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域，其中一種抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包括本發(fā)明第一方面的納米抗體或其抗原結(jié)合片段或第二方面的重鏈抗體或其抗原結(jié)合片段。

57、本發(fā)明的第五方面，提供分離的核酸分子，其包括編碼本發(fā)明第一方面的納米抗體或其抗原結(jié)合片段、第二方面的重鏈抗體或其抗原結(jié)合片段、第三方面的嵌合抗原受體、或第四方面的多特異性抗體或其抗原結(jié)合片段的核苷酸序列。

58、本領(lǐng)域技術(shù)人員應理解，可以根據(jù)密碼子簡并性對核酸分子中的核苷酸進行替換。在一些實施方式中，核酸分子的核苷酸序列是密碼子最優(yōu)化的。

59、在一些實施方式中，所述編碼本發(fā)明第一方面的納米抗體或其抗原結(jié)合片段的核苷酸序列包括：seq?id?no：9-39中任一個所示的核苷酸序列，或與其具有至少60％、至少70％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列同一性的核苷酸序列。

60、本發(fā)明的第六方面，提供一種載體，其包括本發(fā)明第五方面的核酸分子。

61、在一些實施方式中，所述載體可以為表達載體。在一些實施方式中，所述表達載體可以包括真核細胞表達載體和/或原核細胞表達載體。在一些實施方式中，所述真核表達載體包括例如，但并不限于酵母表達載體、哺乳動物表達載體和昆蟲表達載體。例如，所述表達載體可以包括，但并不限于質(zhì)粒、逆轉(zhuǎn)錄病毒載體、慢病毒載體、噬菌體載體、腺病毒載體、腺相關(guān)載體或單純皰疹載體。

62、在一些實施方式中，所述載體可以選自納米顆粒、脂質(zhì)體、外來體、微泡或基因槍。

63、本發(fā)明的第七方面，提供一種細胞，其包括本發(fā)明第一方面的納米抗體或其抗原結(jié)合片段、第二方面的重鏈抗體或其抗原結(jié)合片段、第三方面的嵌合抗原受體、第四方面的多特異性抗體或其抗原結(jié)合片段、第五方面的核酸分子、或者第六方面的載體。

64、在一些實施方式中，所述細胞不涉及繁殖材料。

65、在一些實施方式中，所述細胞可以為本領(lǐng)域常規(guī)使用的宿主細胞，只要能使所述表達載體穩(wěn)定地將所攜帶的核酸分子表達為本公開的上述納米抗體或其抗原結(jié)合片段、重鏈抗體或其抗原結(jié)合片段、嵌合抗原受體或多特異性抗體或其抗原結(jié)合片段。在一些實施方式中，所述宿主細胞可以為原核細胞和/或真核細胞，所述原核細胞例如可以包括大腸桿菌，所述真核細胞例如可以包括cho細胞，hek293細胞，bhk細胞，ns0細胞，sp2/0細胞，yo骨髓瘤細胞，p3x63小鼠骨髓瘤細胞，per細胞，per.c6細胞、hela細胞、vero細胞、expi293細胞、雜交瘤細胞，酵母細胞，和昆蟲細胞。

66、在一些實施方式中，所述細胞可以為免疫細胞。在一些實施方式中，所述免疫細胞可以包括，但并不限于t細胞、nk細胞、dc細胞和巨噬細胞。在這些實施方式中，所述免疫細胞可以表達本公開的上述嵌合抗原受體(即為修飾的免疫細胞)。

67、本發(fā)明的第八方面，提供本發(fā)明第一方面的納米抗體或其抗原結(jié)合片段、第二方面的重鏈抗體或其抗原結(jié)合片段、第三方面的嵌合抗原受體、或第四方面的多特異性抗體或其抗原結(jié)合片段的制備方法，通過培養(yǎng)本發(fā)明第七方面的細胞得到。

68、本發(fā)明的第九方面，提供偶聯(lián)物，其包括本發(fā)明第一方面的納米抗體或其抗原結(jié)合片段、或第二方面的重鏈抗體或其抗原結(jié)合片段；和，偶聯(lián)部分。

69、在一些實施方式中，所述偶聯(lián)部分可以包括，但并不限于可檢測標記物、遞送載體或治療劑。

70、在一些實施方式中，所述可檢測標記物可以是可通過熒光、光譜、光化學、生物化學、免疫學、電學、光學、化學等手段檢測的任何物質(zhì)。這類標記是本領(lǐng)域熟知的，其實例包括但不限于，酶(例如，辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶、β-半乳糖苷酶、脲酶、葡萄糖氧化酶，等)、放射性核素(例如，3h、125i、35s、14c或32p)、熒光染料(例如，異硫氰酸熒光素(fitc)、熒光素、異硫氰酸四甲基羅丹明(tritc)、藻紅蛋白(pe)、德克薩斯紅、羅丹明、量子點或花菁染料衍生物(例如cy7、alexa?750))、吖啶酯類化合物、磁珠、測熱標記物例如膠體金或有色玻璃或塑料(例如，聚苯乙烯、聚丙烯、乳膠等)微珠、以及用于結(jié)合上述標記物修飾的親和素(例如，鏈霉親和素)的生物素。在一些實施方式中，此類標記能夠適用于免疫學檢測(例如，酶聯(lián)免疫測定法、放射免疫測定法、熒光免疫測定法、化學發(fā)光免疫測定法等)。在一些實施方式中，所述可檢測標記選自放射性同位素、熒光物質(zhì)、發(fā)光物質(zhì)、有色物質(zhì)或酶。在一些實施方式中，可通過不同長度的接頭(linker)將如上所述的可檢測標記連接至本公開的納米抗體或其抗原結(jié)合片段、或重鏈抗體或其抗原結(jié)合片段，以降低潛在的位阻。

71、在一些實施方式中，所述可檢測標記物可以包括，但并不限于酶(例如辣根過氧化物酶)、放射性核素、熒光染料、發(fā)光物(例如化學發(fā)光物)、有色物質(zhì)、生物素等。

72、在一些實施方式中，所述治療劑可以包括例如，但并不限于化學治療劑、免疫抑制劑、細胞毒性藥物。

73、在一些實施方式中，所述偶聯(lián)部分選自能夠改善抗體的生物學特性(例如增加血清半衰期)的物質(zhì)，例如可以是化學基團，例如聚乙二醇(peg)、甲基、乙基或者糖基。

74、本發(fā)明的第十方面，提供藥物組合物，其包括：本發(fā)明第一方面的納米抗體或其抗原結(jié)合片段、第二方面的重鏈抗體或其抗原結(jié)合片段、第三方面的嵌合抗原受體、第四方面的多特異性抗體或其抗原結(jié)合片段、第五方面的核酸分子、第六方面的載體、第七方面的細胞或者第九方面的偶聯(lián)物；以及藥學上可接受的載體。

75、在一些實施方式中，所述藥物組合物還可以包括額外的藥學活性劑。

76、在一些實施方式中，所述額外的藥學活性劑可以是具有生物學活性的藥物，例如能夠治療與胃蛋白酶原i相關(guān)的疾病或病癥的藥物。

77、在一些實施方式中，所述納米抗體或其抗原結(jié)合片段與所述額外的藥學活性劑作為獨立的組分或作為混合的組分提供。

78、在一些實施方式中，所述藥物組合物可以通過例如腸胃外、皮下注射、舌下、直腸、鼻腔、靜脈注射、肌肉注射、經(jīng)口、眼部、局部等方式給藥。

79、在一些實施方式中，所述藥物組合物為，例如水性溶液、混懸液、粉末、片劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、丸劑、崩解劑、糖漿劑、噴霧劑、凝膠劑、乳劑、注射劑、酏劑、錠劑、栓劑等的形式。

80、本發(fā)明的第十一方面，提供診斷或治療性試劑盒，其包括：本發(fā)明第一方面的納米抗體或其抗原結(jié)合片段、第二方面的重鏈抗體或其抗原結(jié)合片段、第三方面的嵌合抗原受體、第四方面的多特異性抗體或其抗原結(jié)合片段、第五方面的核酸分子、第六方面的載體、第七方面的細胞、第九方面的偶聯(lián)物、或第十方面的藥物組合物。

81、在一些實施方式中，所述試劑盒還可以包括說明書和/或給藥裝置。

82、在一些實施方式中，所述試劑盒可以用于診斷疾病或病癥，所述疾病或病癥與胃蛋白酶原i相關(guān)。

83、在一些實施方式中，所述試劑盒可以用于預防或治療疾病或病癥，所述疾病或病癥與胃蛋白酶原i相關(guān)。

84、本發(fā)明的第十二方面，提供本發(fā)明第一方面的納米抗體或其抗原結(jié)合片段、第二方面的重鏈抗體或其抗原結(jié)合片段、第三方面的嵌合抗原受體、第四方面的多特異性抗體或其抗原結(jié)合片段、第五方面的核酸分子、第六方面的載體、第七方面的細胞、第九方面的偶聯(lián)物、或第十方面的藥物組合物在制備產(chǎn)品中的應用，所述產(chǎn)品用于c1)-c3)中任一種：

85、c1)診斷疾病或病癥，所述疾病或病癥與胃蛋白酶原i相關(guān)；

86、c2)預防或治療疾病或病癥，所述疾病或病癥與胃蛋白酶原i相關(guān)；

87、c3)檢測樣品中的胃蛋白酶原i存在或者水平。

88、在一些實施方式中，所述樣品選自待測對象的體液、組織、細胞、排泄物中的至少一種。

89、在一些實施方式中，所述體液包含血液、淋巴液中的至少一種。

90、在一些實施方式中，所述血液包括血清、血漿、干血斑、全血中的至少一種。

91、在一些實施方式中，所述組織包含腫瘤組織。

92、在一些實施方式中，所述排泄物包含尿液、糞便、淚液中的至少一種。

93、在一些實施方式中，所述待測對象包含哺乳動物，例如人類、非人靈長類動物(例如猩猩、猿)、嚙齒動物(例如大鼠、小鼠、豚鼠)、寵物(例如貓、狗)、家畜(例如馬、牛、羊、豬、兔)。

94、在一些實施方式中，所述待測對象包含人類。

95、在本發(fā)明中，所述疾病或病癥包括胃部疾病、病癥或病變。在一些實施方式中，所述疾病或病癥包括幽門螺桿菌感染、急性胃炎、慢性胃炎、淺表性胃炎、糜爛性胃炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、萎縮性胃炎或胃癌中的一種或多種。

96、本發(fā)明提供了特異性結(jié)合胃蛋白酶原i的納米抗體或其抗原結(jié)合片段，其能夠特異性識別并結(jié)合胃蛋白酶原i，并且與其具有較好的親和力，可進行批量生產(chǎn)制備，用于制備用于診斷、預防或治療與胃蛋白酶原i相關(guān)疾病或病癥、或檢測樣品中的胃蛋白酶原i存在或者水平的產(chǎn)品。