本發(fā)明涉及多肽，尤其是涉及具有血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制活性的多肽及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、高血壓是心血管疾病的主要危險因素，號稱“無聲殺手”，容易引起心肌梗塞和中風(fēng)，嚴(yán)重時危及生命。有報告稱，到2025年，將有16億人患有高血壓。血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ace)是通過腎素-血管緊張素系統(tǒng)(ras)和緩激肽釋放酶-緩激肽系統(tǒng)(kks)進(jìn)行血壓調(diào)節(jié)。ras中腎臟產(chǎn)生的腎素會使血管緊張素原轉(zhuǎn)換為血管緊張素ⅰ(ang?i)，ang?i可進(jìn)一步被ace轉(zhuǎn)化為具有生物活性的ang?ii，ang?ii可使醛固酮釋放，進(jìn)而使na+濃度升高，血管收縮，并最終使血壓升高。在kks中，緩激肽是一種血管舒張肽，可與支氣管平滑肌、血管平滑肌等多種組織器官中的β受體結(jié)合，增加細(xì)胞內(nèi)ca2+濃度，刺激內(nèi)皮型一氧化氮合酶將l-精氨酸轉(zhuǎn)化為no。no可以維持正常的血管擴(kuò)張，從而維持血壓。ace可分解并滅活緩激肽，導(dǎo)致no水平不足，導(dǎo)致血管舒張不足，從而升高血壓。ace抑制劑可減少ang?i的轉(zhuǎn)化并使緩激肽失活，從而降低血壓。常見的降壓藥物有卡托普利和賴諾普利等，但尋找天然副作用小的血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑對降血壓仍有重要意義。

2、杏(prunus?armeniaca?l.)，薔薇科落葉喬木，其果實因營養(yǎng)價值和藥用特性被稱為“黃金水果”，繁殖可從小范圍播種到大范圍播種，是重要的商用水果之一。杏仁是杏果實的種子，一種藥食同源的果品，具有較高的營養(yǎng)價值和保健功能，富含脂肪、蛋白質(zhì)和碳水化合物、多酚和多種微量元素等。杏仁中蛋白質(zhì)含量為23％～27％，必需氨基酸種類齊全。杏仁具有多種生理活性如抗氧化、降血壓、降血糖等，杏仁蛋白酶解物及杏仁蛋白肽已被證明具有降血壓的功效。杏仁除直接食用外，還可榨取杏仁油或制備成植物飲料。榨取杏仁油后的杏仁餅粕通常被用作肥料或飼料，以低價出售，甚至直接丟棄，導(dǎo)致資源的浪費。若能夠有效利用廢棄的杏仁粕，對其進(jìn)行深加工，創(chuàng)造更高附加值的產(chǎn)品，將實現(xiàn)杏仁產(chǎn)業(yè)良性發(fā)展，對杏仁資源可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的是提供具有血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制活性的多肽及其應(yīng)用，篩選出的多肽具有血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制活性，可廣泛用于制備降血壓的產(chǎn)品，同時本發(fā)明從杏仁蛋白中酶解制備杏仁多肽，為杏仁蛋白的高效利用提供了理論基礎(chǔ)，對杏仁資源可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。

2、為實現(xiàn)上述目的，第一方面，本發(fā)明提供了具有血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制活性的多肽，其來源于杏仁蛋白，多肽自n端到c端的氨基酸序列為lys-phe-pro-leu-trp，如seq?idno.1所示，分子量為689.84da。

3、進(jìn)一步地，多肽具有血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制活性，多肽對血管緊張素轉(zhuǎn)換酶的抑制類型為混合型抑制。

4、進(jìn)一步地，多肽的ic50為5.882μg/ml。

5、第二方面，本發(fā)明提供了上述多肽在制備血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑中的應(yīng)用。

6、第三方面，本發(fā)明提供了上述多肽在制備降血壓產(chǎn)品中的應(yīng)用。

7、進(jìn)一步地，產(chǎn)品包括保健品或藥品。

8、第四方面，本發(fā)明提供了一種血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑，其有效成分為如seq?idno.1所示的多肽。

9、第五方面，本發(fā)明提供了一種降血壓產(chǎn)品，其有效成分為如seq?id?no.1所示的多肽。

10、本發(fā)明所述的具有血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制活性的多肽及其應(yīng)用的優(yōu)點和積極效果是：

11、1、本發(fā)明以杏仁蛋白為原料，采用中性蛋白酶和堿性蛋白酶對杏仁蛋白分步酶解，得到杏仁多肽。通過hplc-ms/ms測定其多肽序列，并通過生物信息學(xué)、分子對接技術(shù)和體外活性實驗篩選出具備抑制血管緊張素轉(zhuǎn)換酶活性的片段，篩選出1條血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制活性最好的杏仁多肽kfplw，根據(jù)體外活性實驗結(jié)果(ic50＝5.882μg/ml)，驗證kfplw抑制ace活性方面的潛力，說明其可廣泛用于制備降血壓的產(chǎn)品。

12、2、本發(fā)明通過分子對接技術(shù)探討kfplw與ace的相互作用位點及相互作用力，為杏仁蛋白的深加工奠定了理論基礎(chǔ)。分子對接結(jié)果表明，kfplw與ace的相互作用主要由氫鍵和疏水相互作用介導(dǎo)，結(jié)合位點主要是glu143，ser516，asn70，asn66，ala356，leu139，leu81，leu140，val518，phe391，kfplw通過與這些氨基酸殘基結(jié)合改變ace的構(gòu)象，阻礙底物進(jìn)入，從而抑制ace的活性。

13、3、本發(fā)明從杏仁蛋白粉中酶解制備杏仁多肽，為杏仁蛋白的高效利用提供了理論基礎(chǔ)，對杏仁資源可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。

14、下面通過附圖和實施例，對本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步的詳細(xì)描述。

技術(shù)特征：

1.具有血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制活性的多肽，其特征在于：其來源于杏仁蛋白，多肽自n端到c端的氨基酸序列為lys-phe-pro-leu-trp，如seq?id?no.1所示，分子量為689.84da。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多肽，其特征在于：多肽具有血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制活性，多肽對血管緊張素轉(zhuǎn)換酶的抑制類型為混合型抑制。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多肽，其特征在于：多肽的ic50為5.882μg/ml。

4.如權(quán)利要求1所述的多肽在制備血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑中的應(yīng)用。

5.如權(quán)利要求1所述的多肽在制備降血壓產(chǎn)品中的應(yīng)用。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于：產(chǎn)品包括保健品或藥品。

7.一種血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑，其特征在于：有效成分為如seq?id?no.1所示的多肽。

8.一種降血壓產(chǎn)品，其特征在于：有效成分為如seq?id?no.1所示的多肽。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及多肽技術(shù)領(lǐng)域，公開了具有血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制活性的多肽及其應(yīng)用。具有血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制活性的多肽來源于杏仁蛋白，多肽自N端到C端的氨基酸序列為Lys?Phe?Pro?Leu?Trp，如SEQ?ID?NO.1所示，分子量為689.84Da，IC<subgt;50</subgt;為5.882μg/mL。本發(fā)明采用上述的具有血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制活性的多肽及其應(yīng)用，篩選出的多肽具有血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制活性，可廣泛用于制備降血壓的產(chǎn)品，同時本發(fā)明從杏仁蛋白中酶解制備杏仁多肽，為杏仁蛋白的高效利用提供了理論基礎(chǔ)，對杏仁資源可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。

技術(shù)研發(fā)人員：申燁華,張莉,李聰,陳邦
受保護(hù)的技術(shù)使用者：西北大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/15