本發(fā)明涉農(nóng)業(yè)生物防治、微生物技術(shù)和發(fā)酵工程領(lǐng)域，具體而言，涉及一株貝萊斯芽孢桿菌bs-1-s10及其發(fā)酵生產(chǎn)的具有一定有效活菌數(shù)的菌劑和在農(nóng)業(yè)上的的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的不斷發(fā)展，對(duì)食品安全、環(huán)境安全的日益關(guān)注。隨著長(zhǎng)期大量化學(xué)藥劑和化肥過度的使用，造成各類危害，主要有：病蟲害抗藥性升高；農(nóng)藥殘留超標(biāo)；農(nóng)作物產(chǎn)量和質(zhì)量降低；造成環(huán)境污染和土地惡化，造成各類經(jīng)濟(jì)損失；并嚴(yán)重影響人類身體健康。近年來生物藥劑尤其是微生物菌劑的應(yīng)用越來越受到重視。其中芽孢桿菌(bacillus)具有安全性高、抗菌譜廣、代謝快等優(yōu)點(diǎn)，其可以產(chǎn)生多種消化酶、維生素、過氧化氫、有機(jī)酸，抑菌物質(zhì)等，并且其產(chǎn)生的芽孢具有耐酸、耐膽鹽、耐高溫、可長(zhǎng)期保存等優(yōu)點(diǎn)，因而作為國際認(rèn)可的益生類群，被廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)。

2、貝萊斯芽孢桿菌是芽孢桿菌的一種，在自然界中廣泛存在，普遍認(rèn)為其安全性好。貝萊斯芽孢桿菌具有廣譜抗病作用，能效地防治植物病害，施用后抗病增產(chǎn)效果顯著，抗逆防衰，促進(jìn)生長(zhǎng)，改良土壤，降低農(nóng)殘，優(yōu)質(zhì)增產(chǎn)等作用。中國由南到北土壤、氣候條件差異比較大，找到地域適應(yīng)性廣的貝萊斯芽孢桿菌，可以克服生物菌劑應(yīng)用過程中的效果不穩(wěn)定等問題，有益于相關(guān)產(chǎn)品的推廣應(yīng)用，改善農(nóng)業(yè)生產(chǎn)條件和環(huán)境。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一株貝萊斯芽孢桿菌bs-1-s10，對(duì)促進(jìn)小麥生根顯著作用，還對(duì)病害有一定的防治效果，能有效用于防治棉花枯黃萎病、西瓜枯萎、番茄枯萎病等，促進(jìn)作物增產(chǎn)，具有開發(fā)為微生物肥料和微生物農(nóng)藥潛力。

2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：一珠貝萊斯芽孢桿菌bs-1-s10，于2023年11月09日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址：湖北省武漢市武漢大學(xué)，保藏編號(hào)為cctcc?no：m?20232170，分類命名為bacillus?velezensis?bs-1-s10。

3、該菌株是從湖北省武漢市華中農(nóng)業(yè)大學(xué)獅子山上的土壤樣品中分離獲得的，該菌株為革蘭氏陽性菌，營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞呈桿狀，圓端，菌落圓形表面有褶皺濕潤(rùn)黏稠，呈白色或乳白色。

4、本發(fā)明所述貝萊斯芽孢桿菌bs-1-s10菌株，其基因組序列包含：表面活性肽(surfactin)，大環(huán)內(nèi)酰亞胺(macrolactinh)，多烯類(bacillaene)、豐原素(fengycin)，達(dá)菲菌素(difficidin)，兒茶酚型嗜鐵素(bacillibactin)，溶桿菌素(bacilysin)等次生代謝生物合成基因簇，顯示出其具有產(chǎn)生抑菌活性物質(zhì)能力。

5、基于貝萊斯芽孢桿菌bs-1-s10，本發(fā)明還提供了一種微生物菌劑，所述微生物菌劑，利用貝萊斯芽孢桿菌bs-1-s10為菌種，按照下述工藝發(fā)酵生產(chǎn)：

6、1)活化的貝萊斯芽孢桿菌bs-1-s10茄子瓶斜面制備菌懸液，78-80℃水浴30min，用壓差法接種1m3種子罐；

7、2)種子罐種子裝液液體積為總體積的60％，培養(yǎng)溫度32-33℃；通氣量：0-6h20m3/h，6h-移種50m3/h；攪拌：0-6h速率100r/min，6h-移種速率150r/min；種子罐生長(zhǎng)周期為9-11h，鏡檢多數(shù)為雙連菌，少數(shù)為單個(gè)菌，菌量較大移種至發(fā)酵罐；

8、3)將培養(yǎng)好的種子液接種于50m3發(fā)酵罐中，發(fā)酵罐發(fā)酵裝液體積為總體積的60％，接種量為2％，發(fā)酵溫度34-35℃，發(fā)酵培養(yǎng)基配方為：大米粉10g/l，酵母粉10g/l，魚蛋白胨8.5g/l，面粉25g/l，硫酸鎂5g/l，氯化鈉3g/l，碳酸鈣3g/l，ph?7.3；攪拌常開150r/min，罐壓0.05mpa通氣，通氣量為：0-6h?800-1000m3/h，6h-9h?1500-1800m3/h，9-24h2800-3000m3/h，24h-放罐1500m3/h；發(fā)酵周期為30-40h，芽孢脫落率大于60％，營(yíng)養(yǎng)體有少量萌發(fā)跡象立刻放罐，即得貝萊斯芽孢桿菌bs-1-s10的發(fā)酵液，發(fā)酵效價(jià)為活菌數(shù)≥1.3*1010cfu/ml；

9、4)制劑：調(diào)配后制備成貝萊斯芽孢桿菌bs-1-s10活芽孢數(shù)含量不同的各類規(guī)格制劑，包括液劑和粉劑，其中液劑：100億/ml、120億/ml、180億/ml；粉劑：120億/g、200億/g、500億/g。

10、本發(fā)明另一目的在于，提供所述貝萊斯芽孢桿菌bs-1-s10在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用。

11、本發(fā)明所述貝萊斯芽孢桿菌bs-1-s10菌株對(duì)禾谷鐮刀菌、立枯絲核菌、尖孢鐮刀菌等植物病原真菌有較強(qiáng)的抑菌效果。

12、本發(fā)明所述施用貝萊斯芽孢桿菌bs-1-s10菌株發(fā)酵產(chǎn)生代謝產(chǎn)物能夠抑制稻瘟病病原菌孢子萌發(fā)，并能引起油菜核盤菌和水稻稻瘟病菌菌絲異常膨大。

13、本發(fā)明所述生產(chǎn)的貝萊斯芽孢桿菌bs-1-s10菌株的制劑對(duì)小麥有明顯促進(jìn)根系生長(zhǎng)效果。

14、本發(fā)明所述生產(chǎn)的貝萊斯芽孢桿菌bs-1-s10菌株的制劑對(duì)棉花枯黃萎病有良好的防治效果和增產(chǎn)能力。

15、本發(fā)明所述生產(chǎn)的貝萊斯芽孢桿菌bs-1-s10菌株的制劑在多地的番茄和馬鈴薯上表現(xiàn)出顯著的增產(chǎn)能力，有很大的應(yīng)用價(jià)值。

16、綜上，本發(fā)明的有益效果在于：所述貝萊斯芽孢桿菌bs-1-s10菌株可以用于生產(chǎn)菌劑，防治植物病害，提高作物產(chǎn)量和品質(zhì)，具有極大的應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)特征：

1.一株貝萊斯芽孢桿菌bs-1-s10，其特征在于：所述貝萊斯芽孢桿菌bs-1-s10于2023年11月09日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址：湖北省武漢市武漢大學(xué)，保藏編號(hào)為cctcc?no：m?20232170，分類命名為bacillus?velezensis?bs-1-s10。

2.一種微生物菌劑，其特征在于：所述微生物菌劑包含權(quán)利要求1所述貝萊斯芽孢桿菌bs-1-s10，或者包含權(quán)利要求1所述貝萊斯芽孢桿菌bs-1-s10的發(fā)酵液。

3.如權(quán)利要求2所述的微生物菌劑的發(fā)酵生產(chǎn)工藝，其特征在于：包括以下步驟：

4.如權(quán)利要求1所述的貝萊斯芽孢桿菌bs-1-s10的應(yīng)用，其特征在于：應(yīng)用于拮抗禾谷鐮刀菌、立枯絲核菌和尖孢鐮刀菌病原菌。

5.如權(quán)利要求1所述的貝萊斯芽孢桿菌bs-1-s10的應(yīng)用，其特征在于：能夠引起油菜核盤菌和水稻稻瘟病菌菌絲異常膨大。

6.如權(quán)利要求1所述的貝萊斯芽孢桿菌bs-1-s10的應(yīng)用，其特征在于：能夠促進(jìn)小麥根系生長(zhǎng)，提高作物的產(chǎn)量。

7.如權(quán)利要求1所述的貝萊斯芽孢桿菌bs-1-s10的應(yīng)用，其特征在于：應(yīng)用于防治棉花枯萎病、棉花黃萎病、西瓜枯萎病、番茄枯萎病、馬鈴薯早疫病。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及微生物及其應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域，具體公開了一株貝萊斯芽孢桿菌BS?1?S10及其在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用。所述貝萊斯芽孢桿菌BS?1?S10于2023年11月09日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址：湖北省武漢市武漢大學(xué)，保藏編號(hào)為CCTCC?NO：M?20232170，分類命名為Bacillus?velezensis?BS?1?S10；所述貝萊斯芽孢桿菌BS?1?S10及其發(fā)酵液對(duì)多種農(nóng)業(yè)植物病原真菌有很強(qiáng)的拮抗作用，能夠引起病原真菌的菌絲異常膨大；田間試驗(yàn)證實(shí)基于該貝萊斯芽孢桿菌BS?1?S10制備的菌劑，其對(duì)棉花枯黃萎病、西瓜枯萎病、番茄枯萎病、馬鈴薯早疫病等多種農(nóng)作物的土傳病害有較好的防治效果。

技術(shù)研發(fā)人員：劉雄濤,姜勇,夏海洋,林昱曉,喻凌寒,陳衍學(xué),雍思龍,張虎,林詩琪
受保護(hù)的技術(shù)使用者：湖北綠天地生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/15