1.雪膽細(xì)胞色素氧化酶hccyp89a140基因,其特征在于,雪膽細(xì)胞色素氧化酶hccyp89a140基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。
2.權(quán)利要求1所述的雪膽細(xì)胞色素氧化酶hccyp89a140基因編碼蛋白,其特征在于,該編碼蛋白的氨基酸序列如seq?id?no.2所示。
3.含有權(quán)利要求1所述的雪膽細(xì)胞色素氧化酶hccyp89a140基因的重組質(zhì)粒。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的雪膽細(xì)胞色素氧化酶hccyp89a140基因的重組質(zhì)粒,其特征在于,將雪膽細(xì)胞色素氧化酶hccyp89a140基因與ycplac33載體同源重組,得到y(tǒng)33-hccyp89a140重組質(zhì)粒。
5.一種轉(zhuǎn)基因工程菌,含有權(quán)利要求3所述的重組質(zhì)粒,或,所述基因工程菌的基因組中整合有外源的權(quán)利要求1所述的雪膽細(xì)胞色素氧化酶hccyp89a140基因。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的轉(zhuǎn)基因工程菌,其特征在于,所述轉(zhuǎn)基因工程菌為能產(chǎn)16α,23-dihydroxy-gratiogenin-3-one的釀酒酵母工程菌。
7.權(quán)利要求6所述的釀酒酵母工程菌的構(gòu)建方法,其特征在于,包括如下步驟:將外源基因hccyp89a140、啟動(dòng)子tef1、終止子adh進(jìn)行基因克隆并進(jìn)行片段融合構(gòu)建基因表達(dá)盒,通過醋酸鋰轉(zhuǎn)化法將基因表達(dá)盒整合至酵母底盤coul-05-1中。
8.權(quán)利要求1所述的雪膽細(xì)胞色素氧化酶hccyp89a140基因在制備16α,23-dihydroxy-gratiogenin-3-one中的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的雪膽細(xì)胞色素氧化酶hccyp89a140基因在制備16α,23-dihydroxy-gratiogenin-3-one中的應(yīng)用,其特征在于:以11-carbonyl-cucurbita-5,24-diene-3β,16α,20,23-tetrol為底物,在hccyp89a140催化下進(jìn)行c20位羥基和c24位羥基縮合脫水呋喃化,然后再在sdr34的催化下進(jìn)行c3位酮基化,生成16α,23-dihydroxy-gratiogenin-3-one。