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雪膽細(xì)胞色素氧化酶HcCYP89A140基因及其應(yīng)用

文檔序號(hào):41951739發(fā)布日期:2025-05-16 14:13閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.雪膽細(xì)胞色素氧化酶hccyp89a140基因,其特征在于,雪膽細(xì)胞色素氧化酶hccyp89a140基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

2.權(quán)利要求1所述的雪膽細(xì)胞色素氧化酶hccyp89a140基因編碼蛋白,其特征在于,該編碼蛋白的氨基酸序列如seq?id?no.2所示。

3.含有權(quán)利要求1所述的雪膽細(xì)胞色素氧化酶hccyp89a140基因的重組質(zhì)粒。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的雪膽細(xì)胞色素氧化酶hccyp89a140基因的重組質(zhì)粒,其特征在于,將雪膽細(xì)胞色素氧化酶hccyp89a140基因與ycplac33載體同源重組,得到y(tǒng)33-hccyp89a140重組質(zhì)粒。

5.一種轉(zhuǎn)基因工程菌,含有權(quán)利要求3所述的重組質(zhì)粒,或,所述基因工程菌的基因組中整合有外源的權(quán)利要求1所述的雪膽細(xì)胞色素氧化酶hccyp89a140基因。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的轉(zhuǎn)基因工程菌,其特征在于,所述轉(zhuǎn)基因工程菌為能產(chǎn)16α,23-dihydroxy-gratiogenin-3-one的釀酒酵母工程菌。

7.權(quán)利要求6所述的釀酒酵母工程菌的構(gòu)建方法,其特征在于,包括如下步驟:將外源基因hccyp89a140、啟動(dòng)子tef1、終止子adh進(jìn)行基因克隆并進(jìn)行片段融合構(gòu)建基因表達(dá)盒,通過醋酸鋰轉(zhuǎn)化法將基因表達(dá)盒整合至酵母底盤coul-05-1中。

8.權(quán)利要求1所述的雪膽細(xì)胞色素氧化酶hccyp89a140基因在制備16α,23-dihydroxy-gratiogenin-3-one中的應(yīng)用。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的雪膽細(xì)胞色素氧化酶hccyp89a140基因在制備16α,23-dihydroxy-gratiogenin-3-one中的應(yīng)用,其特征在于:以11-carbonyl-cucurbita-5,24-diene-3β,16α,20,23-tetrol為底物,在hccyp89a140催化下進(jìn)行c20位羥基和c24位羥基縮合脫水呋喃化,然后再在sdr34的催化下進(jìn)行c3位酮基化,生成16α,23-dihydroxy-gratiogenin-3-one。


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及一種雪膽細(xì)胞色素氧化酶HcCYP89A140基因及其應(yīng)用,屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。雪膽細(xì)胞色素氧化酶HcCYP89A140基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。本發(fā)明以11?Carbonyl?cucurbita?5,24?diene?3β,16α,20,23?tetrol為底物,在HcCYP89A140催化下進(jìn)行C20位羥基和C24位羥基縮合脫水呋喃化,然后再在SDR34的催化下進(jìn)行C3位酮基化,生成16α,23?Dihydroxy?gratiogenin?3?one。本發(fā)明實(shí)現(xiàn)了16,23雙羥基化葛蘭素的異源合成,對(duì)葫蘆素類化合物生物合成機(jī)制以及其衍生化合物和高效異源合成具有重要意義。

技術(shù)研發(fā)人員:楊生超,劉勤勤,張廣輝,郝冰,陳庚,舒彥宇,李志遠(yuǎn),馬迪娜,葉喆,和四梅,盧迎春,馬驍,王飛飛,郭振宇,孟林飛,尹正豪
受保護(hù)的技術(shù)使用者:云南農(nóng)業(yè)大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2025/5/15
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