技術(shù)特征：

1.一種提高目標(biāo)基因的轉(zhuǎn)錄水平的方法，其特征在于，所述方法包括：

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述短增強(qiáng)子(ste)元件為具有非回文型結(jié)構(gòu)的且具有啟動(dòng)子激活功能的短核苷酸序列。

3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，當(dāng)需要獲得較高倍數(shù)的轉(zhuǎn)錄激活效果時(shí)，所述短增強(qiáng)子(ste)元件的插入位置為所述目標(biāo)基因的轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游-1到-100bp的區(qū)域；當(dāng)需要獲得較低倍數(shù)的轉(zhuǎn)錄激活效果時(shí)，所述短增強(qiáng)子(ste)元件的插入位置為所述目標(biāo)基因的轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游-500到-1500bp的區(qū)域。

4.一種用于增強(qiáng)基因轉(zhuǎn)錄的短增強(qiáng)子(ste)元件，其特征在于，所述的短增強(qiáng)子(ste)元件為具有非回文型結(jié)構(gòu)的且具有啟動(dòng)子激活功能的短核苷酸序列；并且所述的短增強(qiáng)子(ste)元件的長度為30-800bp。

5.一種基因工程改造的啟動(dòng)子，其特征在于，所述的啟動(dòng)子是在原始啟動(dòng)子中對應(yīng)于轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游的轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)效應(yīng)區(qū)插入有權(quán)利要求4所述的短增強(qiáng)子(ste)元件。

6.一種重組的表達(dá)盒，其特征在于，所述的表達(dá)盒包括權(quán)利要求5所述的基因工程改造的啟動(dòng)子以及與所述啟動(dòng)子操作性連接的目的基因。

7.一種載體，其特征在于，所述的載體含有權(quán)利要求4所述的短增強(qiáng)子(ste)元件、權(quán)利要求5所述的基因工程改造的啟動(dòng)子、或權(quán)利要求6所述的重組的表達(dá)盒。

8.一種基因工程化的宿主細(xì)胞，其特征在于，所述的宿主細(xì)胞含有權(quán)利要求7所述的載體；

9.一種制備轉(zhuǎn)基因植物的方法，其特征在于，包括步驟：

10.一種試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒含有以下試劑：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種通過定向插入增強(qiáng)子實(shí)現(xiàn)植物基因組定點(diǎn)激活的方法，具體地，通過在目標(biāo)基因啟動(dòng)子的特定區(qū)域插入短增強(qiáng)子(STE)，可高效激活目標(biāo)基因，可使其表達(dá)水平增強(qiáng)最高達(dá)約2000倍，且增強(qiáng)倍數(shù)可根據(jù)需要靈活調(diào)節(jié)。本發(fā)明的植物基因組定點(diǎn)激活方法，具有高效性、廣泛的適用性和穩(wěn)定的遺傳性，在植物研究和育種中有突出的應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)研發(fā)人員：陸鈺明
受保護(hù)的技術(shù)使用者：上海交通大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/15