技術(shù)特征：

1.一種用于非疾病診斷目的的華支睪吸蟲的檢測方法，其特征在于：以靶向擴(kuò)增華支睪吸蟲基因的引物組a作為目標(biāo)引物，以靶向擴(kuò)增大腸桿菌基因的引物組b作為內(nèi)參引物。

2.如權(quán)利要求1所述的用于非疾病診斷目的的華支睪吸蟲的檢測方法，其特征在于：所述的華支睪吸蟲基因?yàn)槿A支睪吸蟲轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)1中一段保守序列，所述的大腸桿菌基因?yàn)榇竽c桿菌23s?rna中一段保守序列。

3.如權(quán)利要求1所述的用于非疾病診斷目的的華支睪吸蟲的檢測方法，其特征在于：所述的引物組a包含引物f1、引物r1和探針p1，所述的引物f1的核苷酸序列如seq?id?no.1所示；所述的引物r1的核苷酸序列如seq?id?no.2所示；所述的探針p1的核苷酸序列如seq?idno.3所示。

4.如權(quán)利要求1所述的用于非疾病診斷目的的華支睪吸蟲的檢測方法，其特征在于：所述的引物組b包含引物f2、引物r2和探針p2，所述的引物f2的核苷酸序列如seq?id?no.4所示；所述的引物r2的核苷酸序列如seq?id?no.5所示；所述的探針p2的核苷酸序列如seq?idno.6所示。

5.如權(quán)利要求1所述的用于非疾病診斷目的的華支睪吸蟲的檢測方法，其特征在于：包括樣本核酸的提取、陽性對照核酸的提取、陰性對照核酸的提取，所述的樣本核酸的提取、陽性對照核酸的提取、陰性對照核酸的提取均加入抗抑制劑。

6.如權(quán)利要求5所述的用于非疾病診斷目的的華支睪吸蟲的檢測方法，其特征在于：所述的抗抑制劑為inhibitex?buffer。

7.如權(quán)利要求5所述的用于非疾病診斷目的的華支睪吸蟲的檢測方法，其特征在于：所述的抗抑制劑的加入量為1ml/250mg干便或1ml/1ml稀便。

8.如權(quán)利要求5所述的用于非疾病診斷目的的華支睪吸蟲的檢測方法，其特征在于：所述的樣本核酸的提取、陽性對照核酸的提取、陰性對照核酸的提取均采用磁珠法進(jìn)行核酸提取。

9.如權(quán)利要求5所述的用于非疾病診斷目的的華支睪吸蟲的檢測方法，其特征在于：所述的陽性對照核酸的提取采用含有華支睪吸蟲dna的質(zhì)粒和陰性樣本作為陽性質(zhì)控品。

10.如權(quán)利要求5所述的用于非疾病診斷目的的華支睪吸蟲的檢測方法，其特征在于：所述的陰性對照核酸的提取采用無核酸酶水作為陰性質(zhì)控品。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于寄生蟲檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用于非疾病診斷目的的華支睪吸蟲的檢測方法，包括以下步驟：以靶向擴(kuò)增華支睪吸蟲基因的引物組A作為目標(biāo)引物，以靶向擴(kuò)增大腸桿菌基因的引物組B作為內(nèi)參引物。本發(fā)明采用兩套引物組進(jìn)行結(jié)合，其中，以擴(kuò)增大腸桿菌基因的引物組B作為內(nèi)參引物，可監(jiān)控檢測過程中樣本和質(zhì)控品核酸是否提取成功及檢測結(jié)果是否可信，解決了以往的華支睪吸蟲檢測技術(shù)無法監(jiān)控?cái)U(kuò)增實(shí)驗(yàn)是否異常的技術(shù)問題。

技術(shù)研發(fā)人員：王東,李健,夏文豪,王銳智,陳澤鳳,蒙怡,黃平,林華明,吳淵源,黃莎圓子
受保護(hù)的技術(shù)使用者：中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院廣西醫(yī)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/15