專利名稱：C₂-C₅-烷基-咪唑-二膦酸鹽的制作方法
C2-C5-烷基-咪唑-二膦酸鹽本發(fā)明涉及新穎的C2-C5-烷基-取代的[(咪唑-1-基)-1-羥基-1-膦?；?乙 基]-膦酸及其制備方法、其在制備藥物制劑中的用途、其在治療疾病中的用途、使用它們 治療疾病的方法、包含它們的藥物制劑和/或用于治療疾病的化合物，其中所述疾病尤其 如下所述。所述化合物能夠抑制過度或不適當?shù)墓琴|(zhì)吸收并且還用于治療異戊烯化相關疾病。本發(fā)明在第一個方面中尤其涉及式I的化合物或其酯和/或鹽，
<formula>formula see original document page 4</formula>其中R1和R2之一是氫，另一個是為支鏈或非支鏈的C2-C5-烷基。上文和下文中所用的一般表述優(yōu)選具有如下含義，其中相互獨立的多種一般表述 可以相互替代或兩種或多種或尤其是全部可以被更具體的定義替代，由此定義本發(fā)明的更 優(yōu)選的實施方案低級烷基是例如C1-C5烷基例如甲基、乙基、丙基或丁基且還有異丁基、仲_ 丁基或 叔_ 丁基或戊基，例如正_戊基、異戊基、新_戊基、仲_戊基或叔_戊基。苯基-低級烷基是例如苯基-C1-C4-烷基，例如芐基。鹵代(鹵素)(也稱作鹵化物)優(yōu)選是氟、氯、溴或碘。“約”優(yōu)選意指指定數(shù)值可以偏離至多士20，更優(yōu)選偏離指定值至多士 10%，最優(yōu) 選至多士5。式I化合物的鹽特別是其與藥學可接受的堿形成的鹽(藥學可接受的鹽)例如衍 生自Ia、Ib、IIa和IIb族金屬的無毒性金屬鹽，例如堿金屬鹽，優(yōu)選鋰或更優(yōu)選鈉或鉀鹽； 堿土金屬鹽，優(yōu)選鈣或鎂鹽、銅、鋁或鋅鹽，且還有與氨或有機胺類化合物或季銨堿形成的 銨鹽，所述有機胺類或季銨堿例如游離或C-羥基化脂族胺類化合物，優(yōu)選一、二或三低級 烷基胺類化合物，例如甲胺、乙胺、二甲胺或二乙胺，一、二或三(羥基-低級烷基)胺類化 合物例如乙醇胺、二乙醇胺或三乙醇胺、三(羥基甲基)氨基甲烷或2-羥基-叔-丁基胺 或N-(羥基-低級烷基)-N，N- 二低級烷基胺類化合物或N-(聚羥基-低級烷基)-N-低級 烷基胺類化合物例如2- ( 二甲氨基)乙醇或D-葡糖胺或脂族季銨氫氧化物，例如與氫氧化 四丁基銨形成的鹽。式I化合物及其鹽具有有價值的藥理學特性。特別地，它們抑制細胞中甲羥戊酸 途徑并且對溫血動物鈣代謝具有顯著的調(diào)節(jié)作用。最具體地，它們對雌激素缺乏大鼠的骨質(zhì)吸收具有明顯的抑制效果，正如可以 在 Hornby 等人 Calcified Tiss Int 2003 ；72 :519_527 和 Gasser 等人 J Bone MinerRes 2008 ；23 :544_551所述使用卵巢切除大鼠的實驗方法中通過靜脈內(nèi)或皮下施用約 1-500 μ g/kg劑量所證實的。使用 Peyruchaud等人 J Bone Miner Res 2001 ；16 :2027_2034 的方法在靜脈內(nèi)或皮下施用約1-500 μ g/kg劑量后，與腫瘤相關的骨質(zhì)溶解同樣得到抑 制。此外，當類似地根據(jù) Newbould，Brit. J. Pharmacology 21,127(1963)和 Rordorf■等人 Int J Tissue React. 1987 ；9 (4) :341_7的實驗方法施用時，式I的化合物及其鹽分別對具 有佐劑和膠原蛋白關節(jié)炎的嚙齒動物關節(jié)炎病癥進程具有顯著的抑制作用。新穎的二膦酸鹽尤其用作人和獸用藥物活性劑，用于治療一種或多種疾病(該術 語包括病癥或障礙)，尤其是它們能夠抑制過度或不適當骨質(zhì)吸收，尤其是與骨和關節(jié)疾病 相關的骨質(zhì)吸收，例如
-良性病癥例如骨質(zhì)疏松癥、骨質(zhì)減少、骨髓炎、骨關節(jié)炎、類風濕性關節(jié)炎、骨髓 內(nèi)水腫、骨痛、反射性交感神經(jīng)營養(yǎng)障礙、強直性脊柱炎(aka Morbus Bechterev)、骨的佩 吉特病或牙周病，-惡性病癥例如惡性血鈣過高，與實體瘤相關的骨轉(zhuǎn)移和惡性血液病，_矯形外科病癥例如假體松弛、假體偏移、植入物固定、植入物涂敷、骨折愈合、撐 開牽引術骨發(fā)生、脊柱融合、無血管骨壞死、骨移植、骨代用品，或兩種或多種這樣病癥的任意組合。新穎的二膦酸鹽尤其用作人和獸用藥物活性劑，用于治療因靶蛋白過度異戊烯化 導致的疾病例如Hutchinson-Gilford早老綜合征。這基于如下事實二膦酸鹽與抑制素聯(lián) 用已經(jīng)在人過早衰老(例如Hutchinson-Gilford早老綜合征)的小鼠模型中顯示了有益 效果(參見下文)。下列公開文獻(將其各自引入本文作為參考，尤其是有關其中下文提及的測定法 或方法的描述)描述了可以用于證實式I化合物有利生物學特性的各種測定法和方法可以如Calcif. Tissue Int. (2003) 72，519-527所述證實對作為絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松 模型的成熟卵巢切除的(OVX)大鼠單一 i. V.施用的效果，以闡明(1)骨更新和股骨礦物質(zhì) 密度(BMD)生化標記物的暫時改變，(2)測定靜態(tài)和動態(tài)組織形態(tài)測定參數(shù)、骨微結(jié)構(gòu)和結(jié) 機械強度改變和(3)評價使用式I的化合物長期治療對這些參數(shù)的預防效果。此處可以發(fā) 現(xiàn)高度活性?？梢匀鏏RTHRITIS&RHEUMATISM(2004)，50 (7)，2338-2346 所示證實式 I 的化合物 在膠原誘發(fā)性關節(jié)炎(CIA)效應期過程中對大鼠滑膜炎癥、結(jié)構(gòu)關節(jié)傷害和骨代謝的作用?？梢栽趧游锬Ｐ椭袡z驗式I的化合物對骨向內(nèi)生長的作用，其中可以如J. Bone Joint Surg. (2005)，87-B，416-420所述將多孔鉭植入物置于狗尺骨內(nèi)兩側(cè)?？梢愿鶕?jù)J. Natl. Cancer. Inst. (2007)，99，322-30所述的方法證實對小鼠模型 骨骼腫瘤生長的抑制作用。已經(jīng)如 Nat. Medicine (2008)，14，767-772 所述在細胞實驗和 Hutchinson-Gilford早老綜合征小鼠模型中證實了唑來膦酸與普伐他汀聯(lián)用的有益效果?？梢酝ㄟ^或按照與Chem. Med. Chem. (2006)，1，267-273所述方法類似的方法得到 式I化合物結(jié)合法尼焦磷酸合酶時的χ-射線結(jié)構(gòu)。人FPPS，即41-kDa亞單位的同二聚化 酶催化由C5異戊間二烯化合物二甲基烯丙基焦磷酸酯(DMAPP)和焦磷酸異戊烯酯兩步合成C15代謝物法尼焦磷酸(FPP)。FPP是必需GTPase信號傳導蛋白例如Ras和Rho的翻譯 后異戊烯化所需的，并且也是合成膽固醇、多萜醇和泛醌的前體。例如，在不含細胞的體外測定法中可以顯示式I化合物超過已知化合物的優(yōu)越 性。簡言之，反應在酶和式I抑制劑存在下進行并且通過LC/MS/MS對反應產(chǎn)物(法尼焦磷 酸)進行定量。具體而言，在加入底物前預孵育所述抑制劑和酶。測定法是基于LC/MS/MS的用于法尼焦磷酸合酶(FPPS)的無標記測定法。該方法 定量了體外未標記的法尼焦磷酸(FPP)并且適合于高通量篩選(HTS)以找到FPPS抑制劑 并確定候選化合物的IC50值。分析時間是2. O分鐘，其中總循環(huán)時間為2. 5分鐘?？梢詫?384-孔培養(yǎng)板逐格分析，使得每個板的分析時間為16小時。試劑戊醇、甲醇和異丙醇是HPLC級且獲自Fisher Scientific。DMIPA來自 Sigma-Aldrich0 水來自室內(nèi) Milli-Q 系統(tǒng)。測定緩沖液(20mM HEPES,5mM MgCl2 和 ImM CaCl2)通過稀釋由獲自Sigma-Aldrich的ImM 儲備溶液制備。牛龍牛兒醇焦磷酸酯(GPP)、 異戊二烯基焦磷酸酯(FPP)和S-巰基焦磷酸法尼酯(farnesyl S-thiolopyrophosphate) (FSPP)標準品來自 Echelon Biosciences (Salt Lake City, UT)。如 Rondeau 等 人(ChemMedChem 2006，1，267-273 所述制備人法尼焦磷酸合酶(FPPS，Swissprot ID: P14324)(13. 8mg/mL)。測定法LC/MS/MS 分析使用與 Agilent 1100 二元 LC 泵(Agilent Technologies, Inc., Santa Clara,CA,USA)接口的Micromass Quattro Micro 串聯(lián)四極質(zhì)譜儀(Waters Corp.， Milford, MA, USA)進行。使用 CTC Analytics 自動采樣器(Leap Technologies Inc.， Carrboro, NC, USA)、應用2. 5 μ L注射環(huán)路大小進行進樣。色譜使用包含在保護柱支持物 (Ρ/Ν 186000262)中的 Waters 2. Ix 20mm Xterra MS C185 μ m 保護柱(P/m86000652) (WatersCorp.，Milford, MA, USA)進行，其中使用 0. 1% DMIPA/ 甲醇作為溶劑 A 和 0. 1% DMIPA/水作為溶劑B(DMIPA是二甲基異丙基胺)進行。梯度是5%Α 0. 00-0. 30min，在 0. 31min 50% A，在 1. OOmin 80% A，和從 1. 01-2. OOmin 的 5% 的 Α。流速是 0. 3mL/min，流 動從0. 00-0. 50min且再次從1. 20-2. OOmin轉(zhuǎn)向廢物。監(jiān)測的多重反應監(jiān)測(MRM)轉(zhuǎn)換在22eV碰撞能量和2. Ix 10_3mbarAr碰撞池 壓力下對FPP而言是381-> 79-，對FSPP而言是397-> 159-。每次轉(zhuǎn)換的采樣時間是 400msec，跨度0. 4Da。通道間延遲和中間掃描延遲均為0. 02seco其他質(zhì)譜操作參數(shù)是毛 細管，2. OkV ；錐體，35V ；提取器，2. 0V，源溫度，IOO0C ；去溶劑化氣體溫度，250°C ；去溶劑化 氣體流速，650L/hr ；錐體氣流，25L/hr ；倍增器，650V。每一樣品的總循環(huán)時間是2. 5分鐘。由于對384-孔培養(yǎng)板逐格分析，所以在16 小時內(nèi)分析培養(yǎng)板。使用Quanlynx軟件處理色譜圖，該軟件將各FPP峰面積除以FSPP峰 面積(內(nèi)標)。將得到的值報道為相應樣品孔的相對響應。FPPS測定方法將5 μ L 20%化合物的DMSO/水溶液放入384-孔培養(yǎng)板的各孔中。向各孔中加入 IOuL FPPS(使用測定緩沖液按照1比80000稀釋)，并且與所述化合物一起預孵育5分鐘。此時，加入25 μ L GPP/IPP(各5μΜ的測定緩沖液溶液)以啟動反應。30分鐘后，通過添加10 μ L的2 μ M FSPP的2% DMIPA/IPA溶液終止反應。然后用50 μ L正戊醇、應用渦旋混合 萃取該反應混合物。相分離后，將25yL上(正戊醇)層轉(zhuǎn)入新的384-孔培養(yǎng)板并且使用 真空離心機蒸發(fā)。用50 μ L 0. DMIPA/水再溶解干燥的殘余物以便通過LC/MS/MS方法 進行分析。FSPP用作質(zhì)譜的內(nèi)標。磷酸鹽部分生成(M-H)-離子作為光譜中的基峰。本發(fā)明化合物在該測試系統(tǒng)中優(yōu)選具有0. S-IOnM的IC5tl，優(yōu)選0. 9-3. 3nM。尤其 是它們顯示超過現(xiàn)有技術化合物，例如[2- (5-乙基-咪唑-1-基)-1-羥基-1-膦酰基-乙 基]-膦酸的令人意外的優(yōu)越性。該測定法在IC5tl測定中的應用使用已知的FPPS 二膦酸鹽抑制劑唑來膦酸驗證。本發(fā)明特別涉及式I的化合物或其酯和/或其(尤其是藥學可接受的)鹽，其中 R1是C2-C5-烷基，尤其是丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、異丁基或尤其是乙基，且R2 是氫。本發(fā)明特別可替代選擇地涉及式I的化合物或其酯和/或其(尤其是藥學可接受 的)鹽，其中R1是氫，R2是C2-C5-烷基，尤其是丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、異丁 基或尤其是乙基。優(yōu)選式I的化合物或其酯和/或其(尤其是藥學可接受的)鹽，其中R1是氫，且
R2是乙基。最優(yōu)選式I的化合物或其酯和/或其(尤其是藥學可接受的)鹽，其中R1是乙基， 且R2是氫。就不同化合物而言，可以根據(jù)本領域已知的方法制備本發(fā)明的化合物。例如，至少 基于得到的新產(chǎn)物和/或使用的新提出物，優(yōu)選新的方法，包括使式II的羧酸化合物，<formula>formula see original document page 7</formula>(II)其中R1和R2如式I的化合物所定義，與鹵氧化磷反應，得到式I的化合物或其鹽，且如果需要，將得到的式I的游離化合物轉(zhuǎn)化成其鹽，將得到的式I的化合物的鹽 轉(zhuǎn)化成游離化合物和/或?qū)⒌玫降氖絀的化合物的鹽轉(zhuǎn)化成其不同的鹽。作為鹵氧化磷，尤其優(yōu)選三氯氧化磷(POCl3)。該反應優(yōu)選在常用溶劑或溶劑混合 物中，例如在芳烴例如甲苯中，優(yōu)選在升高的溫度下例如50°C至反應混合物的回流溫度例 如(約)80-(約)120°C下進行。可以通過使用上述堿之一部分或完全中和將式I的游離化合物轉(zhuǎn)化成堿式鹽。可以按照本身已知的方式，例如通過用酸試劑例如無機酸處理將鹽轉(zhuǎn)化成游離化 合物。還可以得到水合物形式的化合物，包括其鹽，或其可以包含用于以其晶體結(jié)構(gòu)結(jié) 晶的溶劑。
由于游離形式與其鹽形式的新化合物之間的緊密相關性，所以本說明書上下文中 涉及的游離化合物及其鹽也適合于類推至相應的鹽和游離化合物。本發(fā)明還涉及方法這樣的實施方案，其中在該方法任意階段作為中間體得到的化 合物用作原料且進行其余步驟，或以鹽的形式使用原料，或原料優(yōu)選在反應條件下形成。例如，可以優(yōu)選通過皂化式III的化合物得到原料，
<formula>formula see original document page 8</formula>(III)其中R1和R2如式I的化合物所定義，且R是未取代的或取代的烷基，尤其是低級 烷基或苯基-低級烷基，該反應在適合的酸例如氫鹵酸例如鹽酸存在下，優(yōu)選在含水溶劑 例如水存在下，優(yōu)選在升高的溫度例如在(約50-(約)100°C，例如80-100°C下進行，得到 式II的化合物或其鹽。例如，可以通過下列反應得到式III的化合物使式IV的咪唑化合物，<formula>formula see original document page 8</formula>(IV)其中R1和R2如式I的化合物所定義，與式V的酯反應，
<formula>formula see original document page 8</formula>(V)其中R如式III的化合物所定義，X是鹵素，尤其是氟、氯、碘或尤其是溴、低級烷 磺酰氧基或甲苯磺酰氧基，該反應優(yōu)選在強堿例如堿金屬醇鹽，尤其是叔_ 丁醇鉀存在下， 在適當溶劑或溶劑混合物中，例如環(huán)醚例如四氫呋喃中，優(yōu)選在(約)-10-(約)80°C，例 如20-30°C溫度下進行。如果需要，可以例如通過色譜法、差別結(jié)晶等分離得到的式III化 合物的混合物(其中在一種化合物中，R1是C2-C5-烷基，R2是氫，在另一種化合物中，R2是 C2-C5-烷基，R1是氫)?？梢酝ㄟ^本領域公知的方法或與之類似的方法得到式IV和V的原料和到目前為 止未描述使用的任意其他原料，它們是商購的和/或可以按照與本文所述類似的方法制備。本發(fā)明還涉及任意新方法步驟或方法步驟組合以及任意新原料或其中間體或鹽。例如，可以按照與現(xiàn)有技術中描述相差無幾化合物類似的方法制備式I化合物的酯。包含式I化合物或其藥學可接受的無毒性鹽的藥物組合物是這樣的藥物組合物 它們用于對溫血動物腸道例如口服或直腸和胃腸外施用，藥理活性成分可以單獨存在或與藥學可接受的載體一起存在。新的藥物組合物包含例如約0. 0001-80%，優(yōu)選約0. 001_10%的活性成分。用于 腸道或胃腸外施用的藥物組合物是例如單位劑型這樣的藥物組合物，例如錠劑、片劑、膠囊 或栓劑以及安瓿、小瓶、預裝注射器。按照本身公知的方式，例如通過常規(guī)混合、制粒、成型、 溶解或凍干方法制備這些藥物組合物。例如，可以通過合并活性成分與固體載體、任選將得 到的混合物制粒且如果需要或必要在添加適合的賦形劑后將該混合物或顆粒加工成片劑 或錠芯得到用于口服施用的藥物組合物。適合的載體特別是填充劑例如糖，例如乳糖、蔗糖、甘露糖醇或山梨 醇，纖維素制 品和/或磷酸鈣例如磷酸三鈣或磷酸二氫鈣；還有粘合劑例如淀粉糊，例如玉米、稻米或馬 鈴薯淀粉，明膠，黃蓍膠，甲基纖維素和/或聚乙烯吡咯烷酮，和/或(如果需要)崩解劑例 如上述淀粉，還有羧甲基淀粉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂、藻酸或其鹽例如藻酸鈉。賦形劑 特別是助流劑和潤滑劑，例如二氧化硅、滑石粉、硬脂酸或其鹽例如硬脂酸鎂或硬脂酸鈣、 和/或聚乙二醇?？梢杂眠m合的可以抵抗胃液的包衣衣料給錠芯包衣，特別使用包含阿拉 伯樹膠、滑石粉、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和/或二氧化鈦的濃糖溶液；在適合有機溶劑 或溶劑混合物中的蟲膠溶液，以便制備抵抗胃液的包衣制品；適合纖維素制品例如鄰苯二 甲酸乙酰纖維素或鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素的溶液?？梢詫⑷玖匣蛏丶尤氲狡瑒┗?錠劑包衣衣料中，例如鑒定或顯示不同劑量的活性成分。用于口服施用的其他藥物組合物是由明膠或羥丙甲纖維素制成的干充填膠囊劑， 且還有由明膠和增塑劑諸如甘油或山梨醇組成的軟密封膠囊。干充填膠囊劑可以包含顆粒 形式的活性成分，例如與填充劑例如乳糖、粘合劑例如淀粉和/或助流劑例如滑石粉或硬 脂酸鎂和任選的穩(wěn)定劑的混合物。在軟膠囊中，優(yōu)選將活性成分溶于或混懸于適合的液體 中，例如脂肪油、石蠟油或液體聚乙二醇，還可以向其中加入穩(wěn)定劑。用于直腸施用的適合的藥物組合物是例如由活性成分與栓劑基質(zhì)組合組成的栓 齊U。適合的栓劑基質(zhì)的實例是天然或合成甘油三酯、石蠟烴、聚乙二醇和高級鏈烷醇類化合 物。還能夠使用包含活性成分與基質(zhì)材料組合的明膠直腸膠囊。適合的基質(zhì)材料例如是液 體甘油三酯、聚乙二醇和石蠟烴。用于胃腸外施用(尤其優(yōu)選)的特別適合的劑型是水溶性形式例如水溶性鹽的活 性成分的水溶液?？梢允褂脽o機或有機酸或堿將溶液調(diào)節(jié)至生理可接受的約PH 4-9的pH 值或最優(yōu)選約5. 5-7. 5。還可以使用無機鹽例如氯化鈉或有機化合物如糖、糖醇或氨基酸、 最優(yōu)選使用甘露糖醇或甘油使溶液等滲。適合的組合物還有活性成分的混懸液，例如相應 的油注射混懸液，就此而言可以使用適合的脂溶性溶劑或媒介物例如脂肪油例如芝麻油或 合成脂肪酸酯類例如油酸乙酯或甘油三酯；或含有增加粘度的物質(zhì)，例如羧甲基纖維素、山 梨醇和/或葡聚糖且任選還有穩(wěn)定劑的含水注射混懸液。本發(fā)明還涉及式I化合物及其鹽在治療炎性病癥中的用途，所述炎性病癥主要是 與鈣代謝受損相關的疾病，例如風濕性疾病，且特別是骨質(zhì)疏松癥。低于0. 1 μ g/kg體重的胃腸外劑量對硬組織代謝的影響僅微不足道。長期毒性副 作用可能在超過1000 μ g/kg體重時出現(xiàn)?？梢酝ㄟ^口服以及皮下、肌內(nèi)或靜脈內(nèi)以等滲或 高滲溶液形式施用式I的化合物及其鹽。就口服施用而言，優(yōu)選的每日劑量在約I-IOOmg/ kg，就靜脈內(nèi)、皮下和肌內(nèi)施用而言，在約20-500 μ g/kg。
然而，式I的化合物及其鹽的劑量是可變的且依賴于相應的條件例如疾病的性質(zhì)和嚴重性、治療期限并依賴于相應的化合物。用于胃腸外例如靜脈內(nèi)施用的單位劑型包含 例如10-300 μ g/kg體重、優(yōu)選15-150 μ g/kg體重，且口服單位劑型包含例如0. l_5mg，優(yōu) 選0. 15至3mg/kg體重。用于口服施用的優(yōu)選單劑量是10-200mg，且就靜脈內(nèi)施用而言，是 I-IOmgo用于口服施用的較高劑量因吸收有限而是必要的。在延長治療過程中，一般可以 在開始的較高劑量后將劑量降至較低水平以維持所需的效果?？梢栽?-52次/年的定期 間隔間歇地施用胃腸外(例如靜脈內(nèi)或皮下)劑量?？梢曰诿咳?、每周、每月或每季度給 藥方案定期施用口服劑量。本發(fā)明還涉及治療動物，尤其是人的方法，包括對有此需要的動物、尤其是人施用 足以(有效)治療如上所述疾病的用量的式I化合物、其酯和/或其藥學可接受的鹽。本發(fā)明還涉及藥物制劑，尤其是輸注或注射溶液，其包含式I的化合物、其酯和/ 或其鹽和至少一種藥學可接受的載體物質(zhì)。下列非限制性實施例示例本發(fā)明，但不限制其范圍。如果沒有另外提及，則以攝氏度給出溫度(°C )。如果未提及溫度，則反應或其他 方法步驟在室溫下進行。縮寫Ac.乙?；鵤q./KDMSO二 甲亞砜Et乙基h小時HPLC高效液相色譜法KOtBu 叔丁酸鉀Me甲基ml毫升NMR核磁共振rt室溫THF四氫呋喃根據(jù)D. Horne 等 Heterocycles，1994，Vol. 39，No. 1，ρ· 139-153 制備 4_ 乙基咪唑 和所有其他咪唑衍生物。實施例1 「2- (4-乙基-咪嗶-1-基)-1-羥基-1-膦?；?乙基1 _膦酸在rt下，在氮氣氣氛中將650mg(3. 38mmol) (4-乙基-咪唑-1-基)-乙酸溶于 15ml 甲苯中。加入 852mg(3mmol)H3P03，將該混合物加熱至 80°C。滴 0. 936ml (3mmol)P0C13。 將得到的混合物加熱至120°C，攪拌過夜。潷析出溶劑，加入15ml 6N HC1，將該混合物在回 流狀態(tài)下加熱3小時。真空濃縮得到的淡黃色溶液。用丙酮(25ml)稀釋后，將該混合物與丙酮 (5X25ml) 一起劇烈攪拌至形成灰色固體為止。在高度真空中干燥該灰色固體，從EtOH/水 中結(jié)晶，得到標題化合物。PLC-MS :t = 0. 3Imin, (M-H)- = Zg^1H-WR(D2CVNaOD) δ = 1. 07(t，3H)，2· 53(q，2H)，4· 45(t，2H)，7· 08 (s, 1H)，8· 40 (s, 1H)，31P-WR(D20/Na0D) δ =15. 04ppm合成概述
KOtBu, 3h
H3PO4, POCI3 曱苯，80。C-120。C 16h
0096]
0097]
0098]
0099]
0100] 0101] 0102]
0103]
0104]
0105]
0106]
0107]
0108]
0109]
0110]
HPLC-MS 條件
A B 劑劑度 柱 溶溶梯
XTerra(Waters Corp.，Milford, MA,USA)3x30mm, 2. 5um, C18 水,5% 乙腈，HC00H 乙腈，HC00H % B 01 01 30 95 95 01
mm 0，0 0，5 2，5 3，5 4,5 4，9
如下制備原料
步驟1 (4-乙基-咪唑-1-基)-乙酸乙酯和(5-乙基-咪唑-1-基)-乙酸乙酯 在rt下，在氮氣氣氛中將5. 02g(50mmol)的4-乙基咪唑溶于100ml的THF中。加 A 5. 9g(52mmol)KOtBu，將該反應在rt下攪拌2h。在30min期限內(nèi)滴加6. 3ml (55mmol)的 溴乙酸乙酯，將得到的混合物在rt下攪拌2. 5h。加入20ml H20和130ml AcOEt，分離有機 層，再用2 X 100ml AcOEt洗滌水層。用鹽水洗滌合并的有機層，用MgS04干燥，真空濃縮。通 過快速色譜法純化該反應(硅膠，MeOH/二氯甲烷)，分別得到(4-乙基-咪唑-1-基)-乙 酸乙酯和(5-乙基-咪唑-1-基)-乙酸乙酯。
11
(4-乙基-咪唑-1-基)-乙酸乙酯HPLC-MS :t = 0. 60min ； 100 面積 ％，MH+ = 183 ；1H-NMR(d6-DMS0) 8=1. 09(t，3H)，1. 18(t，3H)，2. 43(q，2H)，4. 13(q，2H)，4. 83 (s， 2H), 6. 78 (s, 1H), 7. 43 (s, 1H)(5-乙基-咪唑-1-基)-乙酸乙酯HPLC-MS :t = 0. 72min, 100 面積 ％，MH+ = 183 jH-WRWe-DMSO) 8 = 1. 12 (t，3H)，1. 18 (t，3H)，2. 40 (q，2H)，4. 14 (q，2H)，4. 85 (s， 2H)，6.61(s，lH)，7. 48 (s, 1H)步驟1 (4~乙基-咪唑-1-基)_乙酸將1. 7g(9. 5mmol)的(4-乙基-咪唑-1-基)-乙酸乙酯溶于 47ml (190mmol)4N HC1中，將該混合物加熱至回流。2h后，將該混合物冷卻至rt，真空除去溶劑。無需進一步純 化使用得到的產(chǎn)物。MS :MH+ = 155，'H-NMR (DMSO) 8 = 1. 18 (t, 3H)，2. 65 (q, 2H)，5. 07 (s, 2H)，7. 43 (d, 1H). 9. 0(d, 1H)實施例2 「2- (5-乙基-咪唑-1-基)-1-羥基-1-膦?；?乙基1 -膦酸根據(jù)上述概括的合成由相應的是實施例1步驟1第二種產(chǎn)物的(5-乙基-咪 唑-1-基)_乙酸乙酯合成[2- (5-乙基-咪唑-1-基)-1-羥基-1-膦?；鵢乙基]_膦酸。<formula>formula see original document page 12</formula>HPLC-MS :t = 0. 32min, (M_H)_ = 299 ^H-WlUD^/NaOD) 8 = 1. 10(t,3H), 2. 63(q，2H)，4. 43(t，2H)，6. 95 (s, 1H) ,8. 54 (s，1H)，31P_WR(D20/Na0D) 8 = 14. 96ppm按照與上述方法類似的方式制備下列化合物實施例3 「2- (4-丙基-咪唑-1-基)-1-羥基-1-膦酰基-乙基1 -膦酸<formula>formula see original document page 12</formula>HPLC-MS :t = 0. 44min, (M_H)_ = 313. 1 ；1H_WR(D20/Na0D) 8 = 0. 78(t，3H)， 1. 52 (m, 2H), 2. 52 (t, 2H), 4. 50 (t, 2H) 7. 13 (s, 1H), 8. 45 (s, 1H) ；31P_NMR(D20/Na0D) 8 = 15. 25ppm實施例4 「2- (5-丙基-咪唑-1-基)-1-羥基-1-膦?；?乙基1 -膦酸<formula>formula see original document page 13</formula>
HPLC-MS :t = 0. 46min, (M_H)_ = 313. 1 ；1H_WR(D20/Na0D) 8 = 0. 81 (t，3H)， 1. 51 (m，2H)，2. 60(t，2H)，4. 44(t，2H)，6. 96(s，1H)，8. 54(s，1H) ；31P-NMR(D20/Na0D) 8 = 15. 06ppm實施例5 「2- (4- 丁基-咪唑-1-基)-1-羥基-1-膦酰基-乙基1 -膦酸<formula>formula see original document page 13</formula>HPLC-MS :t = 0. 56min, (M_H)_ = 327. 2 ；1H-NMR(D20/Na0D) 8 0. 73(t，3H)， 1. 17 (m, 2H)，1. 46 (m, 2H)，2. 51 (t, 2H)，4. 44 (t,2H) 7. 09 (s, 1H)，8. 40 (s, 1H) ；31P_NMR (D20/ NaOD) 8 = 14. 98ppm實施例6 「2- (5- 丁基-咪唑-1-基)-1-羥基-1-膦?；?乙基1 -膦酸<formula>formula see original document page 13</formula>HPLC-MS :t = 0. 44min, (M_H)_ = 327. 2 ；1H_WR(D20/Na0D) 8 = 0. 79(t，3H)， 1. 27 (m，2H)，1. 51 (m, 2H)，2. 67 (t, 2H)，4. 49 (t, 2H)，6. 99 (s, 1H)，8. 58 (s, 1H) ；31P_WR(D20/ NaOD) 8 = 15. 16ppm實施例7 :「1-羥某-2-(4-異丙某-瞇啤-1-某)-1_ _酰某_乙某]-膦酸<formula>formula see original document page 14</formula>HPLC-MS :t = 0. 42min，(M_H)_ = 313 ^H-WlUde-DMSO) 8 = 1. 13,1. 15(d, 6H) , 2. 86-2. 95 (m, 1H), 4. 49 (t, 2H), 7. 12 (s, 1H) , 8. 46 (s, 1H) ；31P_NMR (d6_DMS0) 8 = 15. 35ppm實施例8:「「1-羥某-2- (5-異丙某-瞇卩半-1-某)-1- _酰某-乙某]_ flilfHPLC-MS :t = 0. 40min, (M_H)_ = 313 ^H-WlUde-DMSO) 8 = 1. 10,1. 12(d, 6H)，3. 12-3. 19(m，1H)，4. 52(t，2H)，7. 01 (s，1H)，8. 56(s，1H) ；31P_NMR (d6_DMS0) 8 = 15. 24ppm實施例9 :「{2-「4- (1-乙基-丙基)-咪唑-1-基1 -1-羥基-1-膦酰基-乙基丨-膦 酸實施例10 {2-「5- (1-乙基-丙基)_咪唑-1-基1 -1-羥基-1-膦?；?乙基丨-膦 酸
HO
HO. \ OH
、一I
HO OH o二 P ！
14<formula>formula see original document page 15</formula>
實施例11 灃射液或輸液劑例如可以如下制備0. 2%的注射液或輸液劑混合活性成分例如實施例1或2的化合物或其鹽、氫氧化鈉、氯化鈉和注射用水制 成 2500. 0ml。將22. 0g氯化鈉溶于約2000mL注射用水中。加入活性成分并且將pH值調(diào)節(jié)至例 如pH 6.5。加入注射用水制成2500ml。通過無菌級濾膜(例如具有0. 2 y m孔徑)過濾該 溶液。為了制備單位劑型，將1. 0或2. 5ml該溶液填充入無菌和去熱原的玻璃安瓿或小瓶 (各自包含2.0或5.0mg活性成分)。用無菌和去熱原的橡皮塞封閉小瓶。用鋁螺紋帽固 定橡皮塞。按照同樣方式，還可以制備實施例3-10得到的式I的另一種化合物的溶液，該化 合物也可以是與堿的鹽的形式，例如鈉鹽。在后面的情況中，用酸例如稀鹽酸將溶液調(diào)節(jié)至 所需的pH值。
權利要求
式I的化合物或其酯和/或鹽，其中R1和R2之一是氫，另一個是支鏈或非支鏈的C2-C5-烷基。FPA00001105898300011.tif
2.根據(jù)權利要求1的式I的化合物，其中隊是(2-(5-烷基，尤其是丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、異丁基或尤其是乙基，且R2是氧，或其酯和/或其鹽(尤其是藥學可接受的)。
3.根據(jù)權利要求1的式I的化合物，其中 R是氫，且&是(2-(5-烷基，尤其是丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、異丁基或尤其是乙基， 或其酯和/或其鹽(尤其是藥學可接受的)。
4.根據(jù)權利要求1的式I的化合物，其中 R是氫，且R2是乙基，或其酯和/或其鹽(尤其是藥學可接受的)。
5.根據(jù)權利要求1的式I的化合物，其中 隊是乙基，且R2 是S，或其酯和/或其鹽(尤其是藥學可接受的)。
6.根據(jù)權利要求1-5的任意一項的用于診斷和/或治療動物、尤其是人的式I化合物、 其酯和/或其藥學可接受的鹽。
7.根據(jù)權利要求1-5的任意一項的用于治療過度或不適當?shù)墓琴|(zhì)吸收的式I化合物、 其酯和/或其藥學可接受的鹽。
8.藥物組合物，其包含根據(jù)權利要求1-5的任意一項的式I化合物、其酯和/或其藥學 可接受的鹽和至少一種藥學可接受的載體。
9.治療動物、尤其是人的方法，包括對有此需要的動物、尤其是人施用根據(jù)權利要求 1-5的任意一項的式I化合物、其酯和/或其藥學可接受的鹽，其用量足以治療過度或不適 當?shù)墓琴|(zhì)吸收或因靶蛋白過度異戊烯化導致的疾病。
10.根據(jù)權利要求1-5的任意一項的式I化合物、其酯和/或其藥學可接受的鹽在治療 過度或不適當?shù)墓琴|(zhì)吸收或因靶蛋白過度異戊烯化導致的疾病中的用途。
11.根據(jù)權利要求1-5的任意一項的式I化合物、其酯和/或其藥學可接受的鹽在治療 過度或不適當?shù)墓琴|(zhì)吸收或因靶蛋白過度異戊烯化導致的疾病中的用途。
12.用于制備根據(jù)權利要求1-5的任意一項的式I化合物、其酯和/或其藥學可接受的2鹽的工藝或方法，其包括 使式II的羧酸化合物<formula>formula see original document page 3</formula>(H)其中禮和R2如權利要求1-4的任意一項的式I化合物所定義，與鹵氧化磷反應，得到 式I的化合物或其鹽，且如果需要，將得到的式I的游離化合物轉(zhuǎn)化成其鹽，將得到的式I化合物的鹽轉(zhuǎn)化成 游離化合物和/或?qū)⒌玫降氖絀化合物的鹽轉(zhuǎn)化成其不同的鹽。
全文摘要
描述了C2-C5-烷基-取代的[(咪唑-1-基)-1-羥基-1-膦酰基-乙基]-膦酸及其制備方法、其在制備藥物制劑中的用途、其在治療疾病中的用途、使用它們治療疾病的方法、包含它們的藥物制劑和/或用于治療疾病的化合物。所述化合物能夠抑制過度或不適當?shù)墓琴|(zhì)吸收并且用于治療因靶蛋白過度戊烯化導致的其他疾病例如Hutchinson-Gilford早老綜合征。所述化合物為式I，其中R1和R2之一是氫，另一個是支鏈或非支鏈的C2-C5-烷基，且所述化合物可以是游離形式、酯和/或鹽形式。
文檔編號A61P19/00GK101835787SQ200880112351
公開日2010年9月15日 申請日期2008年11月26日 優(yōu)先權日2007年11月30日
發(fā)明者J-M·龍多, L·維德勒, S·科泰斯塔, S·韋勒, W·延克 申請人:諾瓦提斯公司