1.一種重組腺相關(guān)病毒(raav)載體,其從5’至3’包含:
2.如權(quán)利要求1所述的raav載體,其中所述啟動子選自雞β-肌動蛋白啟動子、延伸因子1α(eflα)啟動子、猿猴病毒40(sv40)啟動子或cag啟動子。
3.如權(quán)利要求1-2任一項所述的raav載體,其中所述啟動子是cag啟動子。
4.如權(quán)利要求1-3任一項所述的raav載體,其中所述啟動子包含與seq?id?no:66至少95%相同的序列。
5.如權(quán)利要求1-4任一項所述的raav載體,其中所述抗gd2抗體vl和vh包含分別與seqid?no:2和seq?id?no:1至少95%相同的序列。
6.如權(quán)利要求5所述的raav載體,其中所述gd2結(jié)合位點是單鏈可變片段(scfv)。
7.如權(quán)利要求6所述的raav載體,其中抗gd2抗體vl使用包含seq?id?no:25的scfv接頭肽與所述抗gd2抗體vh融合。
8.如權(quán)利要求5-7任一項所述的raav載體,其中所述抗gd2抗體vl通過包含seq?id?no:20的序列的scfv接頭肽與所述抗gd2抗體vh融合。
9.如權(quán)利要求1-4任一項所述的raav載體,其中所述抗gd2抗體vl和vh包含分別與seqid?no:4和seq?id?no:3至少95%相同的序列。
10.如權(quán)利要求9所述的raav載體,其中所述gd2結(jié)合位點是單鏈可變片段(scfv)。
11.如權(quán)利要求10所述的raav載體,其中抗gd2抗體vl通過包含seq?id?no:20的序列的scfv接頭肽與所述抗gd2抗體vh融合。
12.如權(quán)利要求9-11任一項所述的raav載體,其中所述gd2結(jié)合位點包含與seq?id?no:7至少95%相同的序列。
13.如權(quán)利要求1-12任一項所述的raav載體,其中所述抗cd3抗體vh包含分別為seq?idno:85、seq?id?no:86和seq?id?no:87的cdr1、cdr2和cdr3,且所述抗cd3抗體vl包含分別為seq?id?no:88、seq?id?no:89和seq?id?no:90的cdr1、cdr2和cdr3。
14.如權(quán)利要求13所述的raav載體,其中所述抗cd3抗體vh和vl包含分別與seq?id?no:14和seq?id?no:15至少95%相同的序列。
15.如權(quán)利要求13或14所述的raav載體,其中所述cd3結(jié)合位點是單鏈可變片段(scfv)。
16.如權(quán)利要求15所述的raav載體,其中所述抗cd3抗體vh通過包含與seq?id?no:25相同的序列的scfv接頭肽與所述抗cd3抗體vl融合。
17.如權(quán)利要求13-16任一項所述的raav載體,其中所述抗cd3結(jié)合位點包含與seq?idno:16至少95%相同的序列。
18.如權(quán)利要求1-12任一項所述的raav載體,其中所述抗cd3抗體vh包含分別為seq?idno:91、seq?id?no:92和seq?id?no:93的cdr1、cdr2和cdr3,和所述抗cd3抗體vl包含分別為seq?id?no:94、seq?id?no:95和seq?id?no:96的cdr1、cdr2和cdr3。
19.如權(quán)利要求18所述的raav載體,其中所述抗cd3抗體vh和vl包含分別與seq?id?no:18和seq?id?no:19至少95%相同的序列。
20.如權(quán)利要求18或19所述的raav載體,其中所述cd3結(jié)合位點是單鏈可變片段(scfv)。
21.如權(quán)利要求20所述的raav載體,其中所述抗cd3抗體vh通過包含與seq?id?no:25相同的序列的scfv接頭肽與所述抗cd3抗體vl融合。
22.如權(quán)利要求18-21任一項所述的raav載體,其中所述cd3結(jié)合位點包含與seq?idno:17至少95%相同的序列。
23.如權(quán)利要求1-22任一項所述的raav載體,其中所述雙特異性融合蛋白包含與seqid?no:26至少95%相同的序列的n端信號肽。
24.如權(quán)利要求1-23任一項所述的raav載體,其中所述雙特異性融合蛋白包含與seqid?no:9、seq?id?no:10、seq?id?no:11、seq?id?no:12或seq?id?no:13至少95%相同的序列。
25.如權(quán)利要求1-24任一項所述的raav載體,其中所述轉(zhuǎn)基因包含與seq?id?no:41、seq?id?no:42、seq?id?no:43、seq?id?no:44或seq?id?no:45至少95%相同的序列。
26.如權(quán)利要求1-25任一項所述的raav載體,其中所述轉(zhuǎn)基因進一步包含所述編碼雙特異性融合蛋白的序列的5’側(cè)或3’側(cè)的調(diào)控元件。
27.如權(quán)利要求26所述的raav載體,其中所述調(diào)控元件是在所述編碼雙特異性融合蛋白的序列的3’側(cè)。
28.如權(quán)利要求27所述的raav載體,其中所述調(diào)控元件源自土拔鼠肝炎病毒轉(zhuǎn)錄后調(diào)控元件(wpre)并且包含與seq?id?no:64至少95%相同的序列。
29.如權(quán)利要求1-28任一項所述的raav載體,其中所述轉(zhuǎn)基因還包含kozak序列。
30.如權(quán)利要求1-29任一項所述的raav載體,其中所述載體還包含所述轉(zhuǎn)基因序列的3’側(cè)和所述3’aavitr?5’側(cè)的多腺苷酸化序列。
31.如權(quán)利要求30所述的raav載體,其中所述多腺苷酸化序列是與seq?id?no:65至少95%相同的牛生長激素(bgh)多腺苷酸化序列。
32.如權(quán)利要求1-31任一項所述的raav載體,其中所述3’aavitr包含與seq?id?no:59至少95%相同的序列。
33.如權(quán)利要求1-33任一項所述的raav載體,其中所述載體還包含抗生素抗性基因序列。
34.如權(quán)利要求33所述的raav載體,其中所述抗生素抗性基因是卡那霉素抗性基因。
35.如權(quán)利要求1-34任一項所述的raav載體,其中所述載體包含與seq?id?no:53、seqid?no:54、seq?id?no:55、seq?id?no:56或seq?id?no:57至少95%相同的序列。
36.一種重組腺相關(guān)病毒(raav)載體,其包含與seq?id?no:11至少90%相同的序列。
37.一種降低患者的轉(zhuǎn)移性疾病的風(fēng)險的方法,其包括向所述患者施用有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-36任一項所述的重組腺相關(guān)病毒(raav)載體或其藥物制劑。
38.一種延遲患者的轉(zhuǎn)移性疾病的發(fā)作的方法,其包括向所述患者施用有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-36任一項所述的重組腺相關(guān)病毒(raav)載體或其藥物制劑。
39.一種預(yù)防患者的轉(zhuǎn)移性疾病的方法,其包括向所述患者施用有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-36任一項所述的重組腺相關(guān)病毒(raav)載體或其藥物制劑。
40.一種促進患者的t細胞介導(dǎo)的循環(huán)腫瘤細胞殺傷的方法,其包括向所述患者施用有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-36任一項所述的重組腺相關(guān)病毒(raav)載體或其藥物制劑。
41.如權(quán)利要求37-40任一項所述的方法,其中所述raav或其藥物制劑與原發(fā)性腫瘤的治療同時施用。
42.如權(quán)利要求41所述的方法,其中所述原發(fā)性腫瘤的治療包括手術(shù)切除、放療、化療或免疫療法。
43.一種預(yù)防傾向于發(fā)生gd2+腫瘤的患者的癌癥的方法,其包括向所述患者施用有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-36任一項所述的重組腺相關(guān)病毒(raav)載體或其藥物制劑。
44.一種預(yù)防gd2+癌癥緩解期患者的癌癥復(fù)發(fā)的方法,其包括向所述患者施用有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-36任一項所述的重組腺相關(guān)病毒(raav)載體或其藥物制劑。
45.如權(quán)利要求37-44任一項所述的方法,其中所述aav或其藥物制劑與選自以下的檢查點抑制劑一起施用:ctla-4抑制劑、pd-1抑制劑和pd-l1抑制劑。
46.如權(quán)利要求45所述的方法,其中所述檢查點抑制劑選自:派姆單抗、伊匹單抗、納武單抗和阿特珠單抗。
47.一種藥物制劑,其包含根據(jù)權(quán)利要求1-36任一項所述的重組腺相關(guān)病毒(raav)載體和藥學(xué)上可接受的載體。