技術(shù)特征：

1.一種檀香烯合酶突變體，其特征在于，由seq?id?no.1所示氨基酸序列的野生型檀香烯合酶sassy發(fā)生部分位點(diǎn)突變而形成的，所述的部分位點(diǎn)包含seq?id?no.1所示的氨基酸序列的329位絲氨酸和282位苯丙氨酸中的至少一種。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檀香烯合酶突變體，其特征在于，為檀香烯合酶sassy突變體中的至少一種，優(yōu)選為下列突變序列中的任一種：

3.根據(jù)權(quán)利要求1和2任一項(xiàng)所述的檀香烯合酶突變體，其特征在于：

4.編碼權(quán)利要求1～3任一項(xiàng)所述檀香烯合酶突變體的基因。

5.包含應(yīng)用權(quán)利要求4所述檀香烯合酶突變體基因構(gòu)建的產(chǎn)檀香揮發(fā)油的釀酒酵母工程菌。

6.一種產(chǎn)檀香揮發(fā)油的釀酒酵母工程菌，其特征在于，以釀酒酵母(saccharomycescerevisiae)為出發(fā)菌株，過(guò)表達(dá)檀香烯合酶突變體基因msassy、細(xì)胞色素p450酶基因cyp736a167和細(xì)胞色素p450還原酶基因sacpr2；其中，所述的msassy的序列為權(quán)利要求1～4所述的檀香烯合酶突變體的核苷酸序列，具體為檀香烯合酶sassy突變體的核苷酸序列中的至少一種，優(yōu)選為sassys329m。

7.權(quán)利要求5和6任一項(xiàng)所述的產(chǎn)檀香揮發(fā)油的釀酒酵母工程菌的構(gòu)建方法，其特征在于，包括如下步驟：

8.權(quán)利要求1～4任一項(xiàng)所述的檀香烯合成酶突變體在制備檀香揮發(fā)油中的應(yīng)用。

9.權(quán)利要求5和6任一項(xiàng)所述的產(chǎn)檀香揮發(fā)油的釀酒酵母工程菌在制備檀香揮發(fā)油中的應(yīng)用。

10.一種制備檀香揮發(fā)油的方法，其特征在于，通過(guò)將權(quán)利要求5和6所述的產(chǎn)檀香揮發(fā)油的釀酒酵母工程菌接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)，進(jìn)行補(bǔ)料分批發(fā)酵，取發(fā)酵液萃取，即得檀香揮發(fā)油。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了檀香烯合酶突變體、工程菌及其在制備檀香揮發(fā)油中的應(yīng)用，屬于酶工程和基因工程技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明提供的檀香烯合酶突變體，相較于野生型檀香烯合酶SaSSy，其產(chǎn)物中α?檀香烯和β?檀香烯的含量比例顯著增加。以突變體SaSSyS329M為例構(gòu)建產(chǎn)檀香揮發(fā)油的釀酒酵母工程菌SanM，將工程菌株SanM進(jìn)行6天發(fā)酵培養(yǎng)，可生產(chǎn)檀香揮發(fā)油的主要成分α?檀香醇和β?檀香醇，其中α?檀香醇和β?檀香醇的成分比例分別為43.6％和25.2％。本發(fā)明利用SaSSyS329M等本發(fā)明提供的檀香烯合酶突變體構(gòu)建的釀酒酵母工程菌株能夠制備符合國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的高品質(zhì)檀香揮發(fā)油。

技術(shù)研發(fā)人員：訾佳辰,查文龍,朱建勛,陳麗琴
受保護(hù)的技術(shù)使用者：中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/15