1.本公開(kāi)內(nèi)容整體涉及疾病診斷領(lǐng)域。更具體地，本公開(kāi)內(nèi)容涉及重組抗體及其在診斷癌癥的用途。

背景技術(shù)

0、
背景技術(shù)：

1、2.相關(guān)技術(shù)的描述

2、癌癥是指以一種異常細(xì)胞生長(zhǎng)為特征的疾病群體，這些細(xì)胞不受控制地生長(zhǎng)并表達(dá)出侵入和破壞正常組織的能力。它是世界上的一個(gè)主要死因，每年造成約1000萬(wàn)人死亡，即將近每六例死亡中的一例。根據(jù)世界衛(wèi)生組織(world?health?organization,who)的統(tǒng)計(jì)，當(dāng)病例被早期發(fā)現(xiàn)與治療，癌癥死亡率是可以降低的，并且who提出了兩種早期發(fā)現(xiàn)策略：早期診斷和早期篩檢。癌癥或癌前病變的早期診斷使早期干預(yù)成為可能，以減緩甚至預(yù)防癌癥的發(fā)展、侵襲及/或轉(zhuǎn)移，進(jìn)而提高癌癥患者的生存率和生活水平，也大幅降低癌癥治療的成本和復(fù)雜性。篩檢的目的是在受試體發(fā)展出癥狀之前識(shí)別出患有癌癥或癌前病變的受試體。

3、對(duì)癌癥篩檢來(lái)說(shuō)，腫瘤相關(guān)抗原(tumor-associated?antigen,taa)是一種有用的標(biāo)靶。實(shí)際操作上，對(duì)從疑似患有癌癥的受試體分離的生物樣品(例如，血液或活檢樣品)進(jìn)行生物標(biāo)記測(cè)試，以識(shí)別出生物樣品中一種或多種taa的表達(dá)，那么本領(lǐng)域中具有一般知識(shí)者或臨床操作者可以初步識(shí)別癌癥病例，并可選擇性地執(zhí)行進(jìn)一步的測(cè)試以確立明確的診斷。在腫瘤生長(zhǎng)、血管生成、侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程中，癌細(xì)胞會(huì)釋放纖溶酶原活化物(plasminogen?activators)，介導(dǎo)纖溶酶原(plasminogen)裂解為纖溶酶(plasmin)，其將纖維蛋白(fibrin)降解為纖維蛋白-纖維蛋白原降解產(chǎn)物(fibrin-fibrinogendegradation?products,fdps)。眾所周知，所有主要癌癥都會(huì)產(chǎn)生fdps，包含肺癌、乳癌、胃癌、大腸癌、胰臟癌、舌癌和肝細(xì)胞癌(hepatocellular?carcinoma,hcc)。dr-70是一種用于測(cè)量fdps的標(biāo)記物，可作為癌癥篩檢的全新標(biāo)靶。然而，迄今為止，還沒(méi)有可用于檢測(cè)dr-70的單株抗體。有鑒于此，相關(guān)領(lǐng)域持續(xù)希望能開(kāi)發(fā)出新型的抗dr-70單株抗體。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

0、
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

1、以下呈現(xiàn)本公開(kāi)內(nèi)容的簡(jiǎn)化摘要以提供基本理解給讀者。此摘要并非本公開(kāi)內(nèi)容的廣泛概觀(guān)，且其不指出本發(fā)明的關(guān)鍵/重要組件或描繪本發(fā)明的范圍。其唯一目的是以簡(jiǎn)化形式呈現(xiàn)于此所公開(kāi)的一些概念，作為稍后呈現(xiàn)的更詳細(xì)描述的序言。

2、如于此所實(shí)施與廣泛描述的，本公開(kāi)內(nèi)容的第一態(tài)樣是針對(duì)稱(chēng)為“14g12-5”的一種重組抗體及其片段(例如，單鏈可變片段，single-chain?variable?fragment,scfv)。結(jié)構(gòu)上，各重組抗體及其片段均包含一重鏈可變(heavy?chain?variable,vh)結(jié)構(gòu)域和一輕鏈可變(light?chain?variable,vl)結(jié)構(gòu)域。根據(jù)本公開(kāi)內(nèi)容的實(shí)施例，vh結(jié)構(gòu)域包含序列編號(hào)：1的一第一互補(bǔ)決定區(qū)(complementarity?determining?region,cdr-h1)、序列編號(hào)：2的一第二互補(bǔ)決定區(qū)(cdr-h2)和序列編號(hào)：3的一第三互補(bǔ)決定區(qū)(cdr-h3)；且vl結(jié)構(gòu)域包含序列編號(hào)：5的一第一互補(bǔ)決定區(qū)(cdr-l1)、序列編號(hào)：6的一第二互補(bǔ)決定區(qū)(cdr-l2)和序列編號(hào)：7的一第三互補(bǔ)決定區(qū)(cdr-l3)。

3、根據(jù)部分示例性實(shí)施例，本重組抗體的vh結(jié)構(gòu)域的片段具有序列編號(hào)：9、10、11或12的氨基酸序列；而本重組抗體的vl結(jié)構(gòu)域的片段具有序列編號(hào)：13、14、15或16的氨基酸序列。

4、根據(jù)部分示例性實(shí)施例，該重組抗體/抗體片段的vh及vl結(jié)構(gòu)域各自包含至少與序列編號(hào):4及8所示的85％序列相似度的氨基酸序列；較佳地，至少與序列編號(hào):4及8所示的90％序列相似度；更佳地，至少與序列編號(hào):4及8所示的95％序列相似度。在本公開(kāi)內(nèi)容的一示例性例子中，該重組抗體/抗體片段的vh及vl結(jié)構(gòu)域各自包含序列編號(hào):4及8的氨基酸序列(即，該vh及該vl結(jié)構(gòu)域分別包含與序列編號(hào)：4和8所示的100％序列相似度的氨基酸序列)。

5、本公開(kāi)內(nèi)容的第二態(tài)樣是關(guān)于使用本重組抗體或抗體片段在制備一種用以檢測(cè)dr-70(fdp)的試劑盒。依據(jù)本公開(kāi)內(nèi)容的若干實(shí)施例，該試劑盒包含：一第一容器，其容置該重組抗體14g12-5或其片段(例如14g12-5單鏈可變區(qū)片段)；及一第二容器，其容置一種藥學(xué)上可接受的載體。

6、于此也公開(kāi)了治療罹患癌癥受試體的方法，首先通過(guò)使用從受試體分離所得的生物樣品對(duì)該受試體進(jìn)行診斷；并根據(jù)由此做出的診斷來(lái)治療該受試體。該方法包含：

7、(i)自該受試體獲得生物樣品；

8、(ii)將一生物樣品與本公開(kāi)所述的重組抗體或其片段混合，以使該生物樣品中的dr-70與本公開(kāi)所述的重組抗體或其片段反應(yīng)，從而在一免疫學(xué)測(cè)定中形成一復(fù)合物，其中該復(fù)合物的形成是表明該受試體罹患該癌癥；以及

9、(iii)對(duì)該受試體施以一抗癌治療以去除癌癥或抑制癌癥的生長(zhǎng)。

10、替代或可選地，該方法進(jìn)一步包含添加一二級(jí)抗體以檢測(cè)步驟(ii)中形成的復(fù)合物，其中該二級(jí)抗體包含序列編號(hào)：20的一vh結(jié)構(gòu)域及序列編號(hào)：24的一vl結(jié)構(gòu)域。

11、根據(jù)本公開(kāi)內(nèi)容的實(shí)施例，該癌癥為肺癌、乳癌、胃癌、大腸癌、胰臟癌、舌癌或hcc。

12、根據(jù)本公開(kāi)內(nèi)容的實(shí)施例，該受試體是一哺乳類(lèi)動(dòng)物；較佳地，為一人類(lèi)。

13、根據(jù)本公開(kāi)內(nèi)容的實(shí)施例，抗癌治療可以是手術(shù)、化療、放射線(xiàn)治療、荷爾蒙治療、標(biāo)靶治療、免疫治療或抗血管新生治療的任一種。

14、藉由參考以下詳細(xì)描述，本公開(kāi)內(nèi)容的諸多附隨特征和優(yōu)點(diǎn)將更容易理解。

技術(shù)特征：

1.一種重組抗體或其片段，包含一重鏈可變(vh)結(jié)構(gòu)域和一輕鏈可變(vl)結(jié)構(gòu)域，其中

2.如權(quán)利要求1所述的重組抗體或其片段，其中所述vh結(jié)構(gòu)域與所述vl結(jié)構(gòu)域分別具有一與序列編號(hào)：4及8至少85％序列相似度的氨基酸序列。

3.如權(quán)利要求2所述的重組抗體或其片段，其中所述vh結(jié)構(gòu)域與所述vl結(jié)構(gòu)域分別具有一與序列編號(hào)：4及8至少100％序列相似度的氨基酸序列。

4.如權(quán)利要求1所述的重組抗體或其片段，其中所述vh結(jié)構(gòu)域的片段具有一序列編號(hào):9、10、11或12的氨基酸序列。

5.如權(quán)利要求1所述的重組抗體或其片段，其中所述vl結(jié)構(gòu)域的片段具有一序列編號(hào):13、14、15或16的氨基酸序列。

6.一種用以診斷癌癥的試劑盒，包含：

7.如權(quán)利要求6所述的試劑盒，其中所述vh結(jié)構(gòu)域與所述vl結(jié)構(gòu)域分別具有一與序列編號(hào)：4及8至少85％序列相似度的氨基酸序列。

8.如權(quán)利要求6所述的試劑盒，其中所述vh結(jié)構(gòu)域與所述vl結(jié)構(gòu)域分別具有一與序列編號(hào)：4及8至少100％序列相似度的氨基酸序列。

9.如權(quán)利要求6所述的試劑盒，其中所述vh結(jié)構(gòu)域的片段具有一序列編號(hào):9、10、11或12的氨基酸序列。

10.如權(quán)利要求6所述的試劑盒，其中所述vl結(jié)構(gòu)域的片段具有一序列編號(hào):13、14、15或16的氨基酸序列。

技術(shù)總結(jié)
于此公開(kāi)了包含一重鏈可變(VH)結(jié)構(gòu)域和一輕鏈可變(VL)結(jié)構(gòu)域的一種重組抗體或其的片段。根據(jù)本公開(kāi)內(nèi)容的一些實(shí)施例，該重組抗體或該抗體片段的該VH結(jié)構(gòu)域與該VL結(jié)構(gòu)域分別包含與序列編號(hào)：4和8至少85％序列相似度的氨基酸序列。同時(shí)于此公開(kāi)使用本發(fā)明重組抗體或其片段用于診斷一受試體是否具有癌癥的方法；以及治療已診斷患有癌癥的受試體的方法。

技術(shù)研發(fā)人員：王愈善,鄭巧蕾,呂向薇,廖廷恩,蕭嘉美,郭珊珊
受保護(hù)的技術(shù)使用者：華宇藥品股份有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/5/19