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一種高活性Cas酶及其制備方法和應用與流程

文檔序號:41951934發(fā)布日期:2025-05-16 14:13閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白包括式i所示的結(jié)構(gòu):

2.如權(quán)利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白包括式iii所示的結(jié)構(gòu):

3.如權(quán)利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白的酶活性顯著增加;所述“顯著增加”是指,與lbcas12a商品酶的酶活性a0相比,所述融合蛋白的酶活性a1,在反應5min時滿足a1/a0≥200%,在反應30min時滿足a1/a0≥130%;

4.一種多核苷酸,其特征在于,所述多核苷酸編碼權(quán)利要求1所述的融合蛋白。

5.一種載體,其特征在于,所述載體包括權(quán)利要求4所述的多核苷酸。

6.一種宿主細胞,其特征在于,所述宿主細胞包括權(quán)利要求5所述的載體、或染色體中整合有權(quán)利要求4所述的多核苷酸、或表達權(quán)利要求1所述的融合蛋白。

7.一種酶制劑,其特征在于,所述酶制劑包括權(quán)利要求1所述的融合蛋白。

8.一種權(quán)利要求1所述的融合蛋白、權(quán)利要求4所述的多核苷酸、權(quán)利要求5所述的載體、權(quán)利要求6所述的宿主細胞或權(quán)利要求7所述的酶制劑的用途,其特征在于,用于核酸檢測。

9.一種試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包括權(quán)利要求1所述的融合蛋白、權(quán)利要求4所述的多核苷酸、權(quán)利要求5所述的載體、權(quán)利要求6所述的宿主細胞、權(quán)利要求7所述的酶制劑。

10.一種權(quán)利要求1所述融合蛋白的制備方法,其特征在于,包括步驟:


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及一種高活性Cas酶及其制備方法和應用。具體地,本發(fā)明提供了一種融合蛋白,所述融合蛋白含有CL7標簽,僅通過包括CL7/Im7層析在內(nèi)的兩次層析步驟即可獲得高純度的LbCas12a核酸酶。通過上述步驟獲得的LbCas12a核酸酶具有高活性、穩(wěn)定性與熱穩(wěn)定性。

技術(shù)研發(fā)人員:張旭,蓋作啟,董露
受保護的技術(shù)使用者:艾迪醫(yī)學科技(廣州)有限公司
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2025/5/15
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