背景技術(shù)：

1、蛋白降解調(diào)節(jié)細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的許多方面。內(nèi)源性蛋白降解機(jī)制已重新編程，以通過(guò)一種稱為靶向蛋白降解的方法消除各種細(xì)胞內(nèi)底物。靶向蛋白降解(tpd)已成為一種優(yōu)于常規(guī)抑制的有前途的治療策略。與抑制劑不同，降解劑可實(shí)現(xiàn)蛋白水平的催化和持久敲低。蛋白水解靶向嵌合體(protac)由兩個(gè)部分組成，它們結(jié)合靶標(biāo)和泛素連接酶(e3)，由柔性接頭分隔。然而，由于其細(xì)胞內(nèi)機(jī)制作用，protac限于靶向細(xì)胞內(nèi)蛋白。

2、已經(jīng)開(kāi)發(fā)了溶酶體降解平臺(tái)，比如細(xì)胞因子受體靶向嵌合體(kinetac)和溶酶體靶向嵌合體(lytac)，其使用e3/usp消除致病蛋白。kinetacs平臺(tái)為基因編碼的雙特異性抗體，由結(jié)合其同源細(xì)胞因子受體的細(xì)胞因子臂和用于感興趣蛋白的靶標(biāo)結(jié)合部分組成。然而，kinetac限于應(yīng)用于t細(xì)胞上的細(xì)胞因子受體，并且如果靶蛋白也存在于t細(xì)胞上，則可降解靶蛋白。由抗體-聚糖綴合物組成的lytac平臺(tái)通過(guò)將靶蛋白穿梭到溶酶體進(jìn)行降解來(lái)降解細(xì)胞表面和細(xì)胞外蛋白。因此，本領(lǐng)域需要用于溶酶體降解平臺(tái)的另外方法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本公開(kāi)涉及新型和獨(dú)特的雙特異性結(jié)合分子，該分子由完全重組的雙特異性結(jié)合結(jié)構(gòu)域組成，該結(jié)構(gòu)域利用神經(jīng)纖毛蛋白-1(nrp1)介導(dǎo)的內(nèi)化來(lái)靶向各種治療相關(guān)的靶蛋白，特別是細(xì)胞表面受體，比如受體酪氨酸激酶(rtk)，以用于溶酶體降解。因此，本公開(kāi)提供一種基于雙特異性結(jié)合分子的降解劑，該降解劑降解靶蛋白，比如癌細(xì)胞上的靶蛋白。雙特異性結(jié)合分子特異性地與感興趣的靶蛋白和神經(jīng)纖毛蛋白-1(nrp1)結(jié)合。本公開(kāi)進(jìn)一步地涉及使用nrp1依賴性雙特異性結(jié)合分子的方法，該分子通過(guò)溶酶體降解途徑誘導(dǎo)靶蛋白的降解。本公開(kāi)提供使用雙特異性結(jié)合分子抑制腫瘤生長(zhǎng)的方法，例如增強(qiáng)癌癥治療的治療功效。

2、本公開(kāi)涉及一種雙特異性結(jié)合分子，該結(jié)合分子包含靶蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域和神經(jīng)纖毛蛋白-1(nrp1)結(jié)合結(jié)構(gòu)域，該結(jié)合結(jié)構(gòu)域?yàn)榭贵w或其nrp-1結(jié)合片段。在一些實(shí)施方案中，雙特異性結(jié)合分子包含特異性地與其同源蛋白受體結(jié)合的靶蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域和與其同源受體結(jié)合的nrp1結(jié)合結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，靶蛋白和nrp1為膜相關(guān)的。在一些實(shí)施方案中，雙特異性結(jié)合分子與nrp1的結(jié)合導(dǎo)致與雙特異性結(jié)合分子結(jié)合的靶蛋白內(nèi)化。在一些實(shí)施方案中，雙特異性結(jié)合分子與nrp1的結(jié)合隨后誘導(dǎo)靶蛋白的溶酶體降解。

3、在某些實(shí)施方案中，雙特異性分子的靶蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域與受體酪氨酸激酶(rti)結(jié)合。因此，在一個(gè)方面，本公開(kāi)涉及一種雙特異性結(jié)合分子，其包含：

4、(a)特異性地與受體酪氨酸激酶(rtk)結(jié)合的靶蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域；和

5、(b)與nrp1結(jié)合的神經(jīng)纖毛蛋白-1(nrp1)結(jié)合結(jié)構(gòu)域，該結(jié)構(gòu)域包含抗體或其nrp-1結(jié)合片段，

6、其中雙特異性結(jié)合分子與靶蛋白和與nrp1的結(jié)合導(dǎo)致靶細(xì)胞中靶蛋白的溶酶體降解。

7、在一個(gè)實(shí)施方案中，rtk為egfr。在另一個(gè)實(shí)施方案中，rtk不是表皮生長(zhǎng)因子受體(egfr)(即靶蛋白為rtk，條件是rtk不是egfr)。

8、在其他實(shí)施方案中，rtk選自egfr家族受體、her家族受體、胰島素生長(zhǎng)因子受體(igfr)、met受體酪氨酸激酶(met)、血小板衍生生長(zhǎng)因子受體(pdgfr)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(fgfr)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vegfr)。

9、在一個(gè)實(shí)施方案中，受體酪氨酸激酶為cmet。在一個(gè)實(shí)施方案中，受體酪氨酸激酶為her2。在一個(gè)實(shí)施方案中，受體酪氨酸激酶為igf1r。

10、在一個(gè)實(shí)施方案中，靶細(xì)胞為癌細(xì)胞。在實(shí)施方案中，癌細(xì)胞選自肺癌、乳腺癌、結(jié)腸和直腸癌、頭頸癌、食管胃癌、肝癌、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、前列腺癌、宮頸癌、卵巢癌、膀胱癌、腎癌和胰腺癌。在一個(gè)實(shí)施方案中，癌細(xì)胞為非小細(xì)胞肺癌(nsclc)細(xì)胞。

11、在實(shí)施方案中，靶蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域和nrp1結(jié)合結(jié)構(gòu)域各自獨(dú)立地選自igg、半抗體、單結(jié)構(gòu)域抗體、納米抗體、fab、單特異性fab2、fc、scfv、微型抗體、ignar、v-nar、hcigg、vhh結(jié)構(gòu)域、駱駝科抗體和肽體。

12、在一個(gè)實(shí)施方案中，nrp1結(jié)合結(jié)構(gòu)域

13、包含：

14、(i)包含cdr1、cdr2和cdr3區(qū)(分別是hcdr1、hcdr2和hcdr3)的抗體重鏈可變(vh)結(jié)構(gòu)域，其中hcdr1由seq?id?no:79中所示的序列組成，hcdr2由seq?id?no:80中所示的序列組成，和hcdr3由seq?id?no:81-84中任何一項(xiàng)所示的序列組成；和

15、(ii)包含cdr1、cdr2和cdr3區(qū)(分別是lcdr1、lcdr2和lcdr3)的抗體輕鏈可變(vl)結(jié)構(gòu)域，其中l(wèi)cdr1由seq?id?no:85-87中任何一項(xiàng)所示的序列組成，lcdr2由seq?id?no:88中所示的序列組成，和lcdr3由seq?id?no:89中所示的序列組成。

16、在一個(gè)實(shí)施方案中，

17、(i)hcdr1由seq?id?no:79中所示的序列組成，hcdr2由seq?id?no:80中所示的序列組成，和hcdr3由seq?id?no:84中任何一項(xiàng)所示的序列組成；和

18、(ii)lcdr1由seq?id?no:85中所示的序列組成，lcdr2由seq?id?no:88中所示的序列組成，和lcdr3由seq?id?no:89中所示的序列組成。

19、在其他方面中，本公開(kāi)涉及編碼本公開(kāi)的雙特異性結(jié)合分子的核酸、包含本公開(kāi)核酸的表達(dá)載體以及包含本公開(kāi)核酸(例如表達(dá)載體)的能夠進(jìn)行蛋白表達(dá)的細(xì)胞。

20、在另一個(gè)方面，本公開(kāi)涉及本公開(kāi)的雙特異性結(jié)合分子在制造用于在受試者中治療癌癥的藥物中的用途。

21、在另一個(gè)方面，本公開(kāi)涉及在細(xì)胞中誘導(dǎo)靶蛋白的溶酶體降解的方法，該方法包括使細(xì)胞與本公開(kāi)的雙特異性結(jié)合分子接觸，使得在細(xì)胞中誘導(dǎo)靶蛋白的溶酶體降解。在實(shí)施方案中，細(xì)胞包含靶蛋白中的一種或多種突變和/或過(guò)表達(dá)靶蛋白。在實(shí)施方案中，細(xì)胞對(duì)靶蛋白的抑制劑的反應(yīng)性具有抗性或難治性。

22、在一個(gè)實(shí)施方案中，靶蛋白為egfr。在一個(gè)實(shí)施方案中，靶蛋白為rtk而非egfr。在一個(gè)實(shí)施方案中，靶蛋白為cmet。在一個(gè)實(shí)施方案中，靶蛋白為her2。在一個(gè)實(shí)施方案中，靶蛋白為igf1r。

23、在另一個(gè)方面，本公開(kāi)涉及在具有腫瘤的受試者中抑制腫瘤生長(zhǎng)的方法，該方法包括給予受試者本公開(kāi)的雙特異性結(jié)合分子，使得腫瘤在受試者中的生長(zhǎng)受到抑制。在實(shí)施方案中，腫瘤包含靶蛋白中的一種或多種突變和/或過(guò)表達(dá)靶蛋白。在實(shí)施方案中，腫瘤對(duì)靶蛋白的抑制劑的反應(yīng)性具有抗性或難治性。

24、在一個(gè)實(shí)施方案中，靶蛋白為egfr。在一個(gè)實(shí)施方案中，靶蛋白為rtk而非egfr。在一個(gè)實(shí)施方案中，靶蛋白為cmet。在一個(gè)實(shí)施方案中，靶蛋白為her2。在一個(gè)實(shí)施方案中，靶蛋白為igf1r。

25、在實(shí)施方案中，雙特異性結(jié)合分子靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、鞘內(nèi)、腦室內(nèi)或腦實(shí)質(zhì)內(nèi)給予。

26、本公開(kāi)涉及一種雙特異性結(jié)合分子，該分子包含特異性地與靶蛋白結(jié)合的靶蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域和與nrp1結(jié)合的神經(jīng)纖毛蛋白-1(nrp1)結(jié)合結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，靶蛋白和nrp1為膜相關(guān)的。在一些實(shí)施方案中，靶蛋白為細(xì)胞表面受體蛋白。在一些實(shí)施方案中，靶蛋白為跨膜蛋白。

27、在一些實(shí)施方案中，靶蛋白包括受體酪氨酸激酶(rtk)。在一些實(shí)施方案中，酪氨酸激酶包括表皮生長(zhǎng)因子受體(egfr)、血小板衍生生長(zhǎng)因子受體(pdgfr)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(fgfr)、受體酪氨酸激酶met(met)和受體血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vegfr)。

28、在一些實(shí)施方案中，受體酪氨酸激酶包括egfr/her1/erb1、her2/erbb2、her3/erbb3、her4/erbb4、fgfr1、fgfr2、fgfr3、fgfr4、met、ron、pdgfr、pdgfrα、pdgfrβ、csf-1r、kit、flt-3、vegfr1、vegfr2和vegfr3。

29、在一些實(shí)施方案中，靶蛋白包括egfr。在一些實(shí)施方案中，egfr選自egfr/her1/erb1、her2/erbb2、her3/erbb3和her4/erbb4。在一些實(shí)施方案中，靶蛋白為egfr。

30、在一些實(shí)施方案中，靶蛋白包括fgfr。在一些實(shí)施方案中，fgfr1選自fgfr1、fgfr2、fgfr3和fgfr4。

31、在一些實(shí)施方案中，靶蛋白包括受體酪氨酸激酶met。在一些實(shí)施方案中，受體酪氨酸激酶met為met或巨噬細(xì)胞-刺激蛋白受體(mst1r/ron)。

32、在一些實(shí)施方案中，靶蛋白包括pdgfr。在一些實(shí)施方案中，pdgfr選自pdgfr、pdgfrα、pdgfrβ、csf-1r、kit和flt-3。

33、在一些實(shí)施方案中，靶蛋白包括vegfr。在一些實(shí)施方案中，vegfr選自vegfr1、vegfr2和vegfr3。

34、在一些實(shí)施方案中，受體酪氨酸激酶選自egfr/her1/erb1、her2/erbb2、her3/erbb3、her4/erbb4?vegfr1、vegfr2和vegfr3。

35、在一些實(shí)施方案中，靶蛋白包括受體絲氨酸/蘇氨酸激酶(rstk)、g蛋白偶聯(lián)受體(gpcr)、免疫檢查點(diǎn)受體和離子通道受體。

36、在一些實(shí)施方案中，靶蛋白包括受體絲氨酸/蘇氨酸激酶(rstk)。在一些實(shí)施方案中，rstk包括acvrl1、acvr1、acvr1b、acvr1c、bmpr1a、bmpr1b、tgfbr1、acvr2a、acvr2b、amhr2、bmpr2和tgfbr2。

37、在一些實(shí)施方案中，靶蛋白包括g蛋白偶聯(lián)受體(gpcr)。在一些實(shí)施方案中，gpcr選自cxcr4、ccr5、ffar2、glp2r、5-ht1a受體、5-ht2a受體、5-ht4受體、5-ht5a受體、m1受體、m2受體、a1受體、a2a受體、α1a-腎上腺素能受體、α2a-腎上腺素能受體、β1-腎上腺素能受體、β3-腎上腺素能受體、at1受體、bb1受體、b1受體、cb1受體、cb2受體、趨化素受體1、ccr1、cx3cr1、ackr3、cck1受體、gpr3、gpr12、gpr17、gpr32和gpr35。

38、在一些實(shí)施方案中，靶蛋白包括免疫檢查點(diǎn)受體。在一些實(shí)施方案中，免疫檢查點(diǎn)受體選自cd27、cd28、cd40、cd122、cd137、ox40、gitr、icos、a2ar、b7-h3、b7-h4、btla、ctla-4、ido、kir、lag3、nox2、pd-1、tim-3、vista、sigec7和pd-l1。

39、在一些實(shí)施方案中，靶蛋白包括離子通道受體。在一些實(shí)施方案中，離子通道受體選自kca1.1、kca2.1、catsper1、tpc1、cnga1、hcn1、kir1.1、kir3.2、ryr1、trpa1、trpc3、trpm1、trpp1、trpv1、k2p1.1、k2p10.1、cav1.1、cav2.1、kv1.1、kv1.8、kv11.2、hv1、nav1.1和nav1.2。

40、在一些實(shí)施方案中，靶蛋白包括膜相關(guān)靶蛋白，其中雙特異性結(jié)合分子的靶蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域與細(xì)胞表面受體結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，雙特異性結(jié)合分子的靶蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域與膜相關(guān)靶蛋白的細(xì)胞外表位結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，靶細(xì)胞包括腫瘤細(xì)胞。在一些實(shí)施方案中，靶細(xì)胞為癌細(xì)胞。在一些實(shí)施方案中，癌細(xì)胞選自肺癌、乳腺癌、結(jié)腸和直腸癌、頭頸癌、食管胃癌、肝癌、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、前列腺癌、宮頸癌、卵巢癌、膀胱癌、腎癌和胰腺癌。在一些實(shí)施方案中，靶細(xì)胞包括免疫細(xì)胞。

41、在一些實(shí)施方案中，靶蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域和nrp1結(jié)合結(jié)構(gòu)域各自獨(dú)立地選自igg、半抗體、單結(jié)構(gòu)域抗體、納米抗體、fab、單特異性fab2、fc、scfv、微型抗體、ignar、v-nar、hcigg、vhh結(jié)構(gòu)域、駱駝科抗體和肽體。

42、在一些實(shí)施方案中，靶蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域和nrp1結(jié)合結(jié)構(gòu)域一起形成雙特異性結(jié)合分子、雙特異性雙體抗體、雙特異性fab2、雙特異性駱駝科抗體或雙特異性肽體scfv-fc、雙特異性igg、杵臼雙特異性igg、fc-fab和杵臼雙特異性fc-fab、細(xì)胞因子-igg融合物、細(xì)胞因子-fab融合物和細(xì)胞因子-fc-scfv融合物。在一些實(shí)施方案中，靶蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域包括fc-fab和nrp1結(jié)合結(jié)構(gòu)域包括fc-融合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，雙特異性結(jié)合分子為免疫球蛋白g1(igg1)或其變體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，igg1為人類(lèi)igg1或其變體。

43、在一些實(shí)施方案中，雙特異性結(jié)合分子包含：含有通過(guò)肽接頭與第一單鏈可變片段(scfv)融合以產(chǎn)生第一重鏈融合多肽的第一重鏈以及通過(guò)肽接頭與第二scfv融合以產(chǎn)生第二重鏈融合多肽的第二重鏈的兩條相同的重鏈多肽，其中第一和第二scfv相同；以及含有第一輕鏈和第二輕鏈的兩條相同的輕鏈，其中每個(gè)重鏈融合多肽序列為seq?id?no:1-11或39中的任何一項(xiàng)和輕鏈多肽序列為seq?id?no:12。在一些實(shí)施方案中，重鏈融合多肽序列為seq?id?no:11和輕鏈多肽為seq?id?no:12。在一些實(shí)施方案中，肽接頭包含seq?idno:13中所示的氨基酸序列(ggggs)n，其中n各自獨(dú)立地為1-20之間的整數(shù)。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)進(jìn)一步提供編碼seq?id?no:15-24或40中任何一項(xiàng)所示的各重鏈融合多肽和seq?id?no:25中所示的輕鏈多肽的核苷酸序列。

44、在另一個(gè)實(shí)施方案中，雙特異性結(jié)合分子包含：(a)含有通過(guò)肽接頭與第一單鏈可變片段(scfv)融合以產(chǎn)生第一重鏈融合多肽的第一重鏈以及通過(guò)肽接頭與第二scfv融合以產(chǎn)生第二重鏈融合多肽的第二重鏈的兩條相同的重鏈多肽，其中第一和第二scfv相同；和(b)含有第一輕鏈和第二輕鏈的兩條相同的輕鏈，其中(i)重鏈融合多肽包含可變重鏈(vh)、恒定重鏈1(ch1)、ch2、ch3和含有位于ch3的c-末端的nrp1結(jié)合結(jié)構(gòu)域的短鏈可變片段(scfv)；和(ii)輕鏈多肽包含可變輕鏈(vl)和恒定輕鏈(cl)，其中重鏈融合多肽和輕鏈多肽的vl和vh包含與靶蛋白結(jié)合的靶蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域和含有與nrp1結(jié)合的nrp1結(jié)合結(jié)構(gòu)域的scfv。

45、在一些實(shí)施方案中，雙特異性結(jié)合分子的nrp1結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含：

46、(i)含有cdr1、cdr2和cdr3區(qū)(分別是hcdr1、hcdr2和hcdr3)的抗體重鏈可變(vh)結(jié)構(gòu)域，其中hcdr1由seq?id?no:79中所示的序列組成，hcdr2由seq?id?no:80中所示的序列組成，和hcdr3由seq?id?no:81-84中任何一項(xiàng)所示的序列組成；和

47、(ii)含有cdr1、cdr2和cdr3區(qū)(分別是lcdr1、lcdr2和lcdr3)的抗體輕鏈可變(vl)結(jié)構(gòu)域，其中l(wèi)cdr1由seq?id?no:85-87中任何一項(xiàng)所示的序列組成，lcdr2由seq?id?no:88中所示的序列組成，和lcdr3由seq?id?no:89中所示的序列組成。

48、在另一個(gè)實(shí)施方案中，

49、(iii)hcdr1由seq?id?no:79中所示的序列組成，hcdr2由seq?id?no:80中所示的序列組成，和hcdr3由seq?id?no:84中任何一項(xiàng)所示的序列組成；和

50、(iv)lcdr1由seq?id?no:85中所示的序列組成，lcdr2由seq?id?no:88中所示的序列組成，和lcdr3由seq?id?no:89中所示的序列組成。

51、在一些實(shí)施方案中，靶蛋白的雙特異性結(jié)合分子的結(jié)合親和力(kd)<0.1nm。在一些實(shí)施方案中，nrp1的雙特異性結(jié)合分子的結(jié)合親和力(kd)在0.1nm-100nm之間的范圍內(nèi)。在一些實(shí)施方案中，靶蛋白的結(jié)合抗體的結(jié)合親和力(kd)為雙特異性結(jié)合分子對(duì)nrp1的結(jié)合親和力(kd)的至少2、至少10、至少20、至少30、至少40、至少50、至少60、至少70、至少80、至少90、至少100或多于100倍大。

52、在一些實(shí)施方案中，雙特異性結(jié)合分子(雙特異性抗體)為抗體-藥物綴合物(adc)的一部分，其中雙特異性結(jié)合分子經(jīng)由接頭與藥物綴合。本文提供了用于adc化合物的合適藥物的非限制性實(shí)例。

53、在一些實(shí)施方案中，egfrxnrp1雙特異性抗體抑制huvec細(xì)胞中vegf介導(dǎo)的vegfr2磷酸化。在一些實(shí)施方案中，雙特異性結(jié)合分子與靶蛋白和nrp1的結(jié)合在體外誘導(dǎo)egfrt790m/l858的強(qiáng)烈降解。在一些實(shí)施方案中，靶蛋白的降解導(dǎo)致靶細(xì)胞增殖的抑制。在一些實(shí)施方案中，egfrxnrp1雙特異性抗體降低體外細(xì)胞活力。

54、在一些實(shí)施方案中，雙特異性結(jié)合分子減少奧希替尼敏感的異種移植小鼠模型中的腫瘤體積。在一些實(shí)施方案中，雙特異性結(jié)合分子減少奧希替尼抗性或奧希替尼難治異種移植小鼠模型中的腫瘤體積。在一些實(shí)施方案中，用雙特異性結(jié)合分子的治療增強(qiáng)抗腫瘤功效。

55、在一些實(shí)施方案中，編碼雙特異性結(jié)合分子的核酸如表2所示。在一些實(shí)施方案中，核酸可操作地連接于啟動(dòng)子。

56、提供了包含雙特異性結(jié)合分子的核酸的表達(dá)載體。在一些實(shí)施方案中，載體進(jìn)一步包含啟動(dòng)子，其中啟動(dòng)子可操作地連接于核酸。

57、本公開(kāi)提供能夠進(jìn)行蛋白表達(dá)，包含雙特異性結(jié)合分子的核酸的細(xì)胞。在一些實(shí)施方案中，工程化細(xì)胞包含癌細(xì)胞。

58、在另一個(gè)實(shí)施方案中，本公開(kāi)提供用于制備雙特異性結(jié)合分子的方法，其中該方法包括(a)提供能夠進(jìn)行蛋白合成，包含本文公開(kāi)的核酸的細(xì)胞；和(b)誘導(dǎo)雙特異性結(jié)合分子的表達(dá)。

59、本公開(kāi)還提供一種藥用組合物。在一些實(shí)施方案中，藥用組合物包含雙特異性結(jié)合分子、核酸、載體或工程化細(xì)胞以及藥學(xué)上可接受的載劑。

60、本公開(kāi)還提供雙特異性結(jié)合分子在制造用于在受試者中治療癌癥的藥物的用途。

61、本公開(kāi)提供在受試者中治療癌癥的方法。在一些實(shí)施方案中，該方法包括給予需要它的受試者治療有效量的雙特異性結(jié)合分子、核酸、載體、工程化細(xì)胞或本文提供的藥用組合物。在一些實(shí)施方案中，雙特異性結(jié)合分子腹膜內(nèi)給予。

62、本公開(kāi)進(jìn)一步提供在受試者中預(yù)防癌癥的方法。在一些實(shí)施方案中，提供了抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的方法。

63、在一些實(shí)施方案中，試劑盒包含一個(gè)或多個(gè)單位劑量的藥用組合物以及向需要它的受試者提供一個(gè)或多個(gè)單位劑量的藥用組合物的說(shuō)明書(shū)。

64、在一些實(shí)施方案中，疾病包括腫瘤性疾病、炎癥性疾病、代謝性疾病或神經(jīng)系統(tǒng)疾病。

65、在某些實(shí)施方案中，腫瘤性疾病包括肺癌、乳腺癌、結(jié)腸和直腸癌、頭頸癌、食管胃癌、肝癌、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、前列腺癌、宮頸癌、卵巢癌、膀胱癌、腎癌和胰腺癌。在一個(gè)實(shí)施方案中，肺癌為非小細(xì)胞肺癌(nsclc)。

66、本發(fā)明的其他特征和優(yōu)點(diǎn)將從以下具體實(shí)施方式和權(quán)利要求中顯而易見(jiàn)。