本公開屬于生物，具體涉及抗體治療領(lǐng)域，更具體涉及靶向cd40的特異性結(jié)合蛋白。

背景技術(shù)：

1、癌癥是全世界范圍內(nèi)死亡的主要原因，第三代癌癥治療中的腫瘤免疫由于卓越的臨床治療效果成為腫瘤治療研究中的熱點(diǎn)。腫瘤免疫以免疫檢查點(diǎn)抑制劑(immunitycheckpoint?inhibitor、ici)為靶標(biāo)，主要通過使用單克隆抗體(monoclonal?antibody、mab)或者小分子抑制劑抑制腫瘤位點(diǎn)微環(huán)境(tumor?microenvironment、tme)中腫瘤細(xì)胞對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)的抑制作用從而激活體內(nèi)免疫細(xì)胞進(jìn)而增強(qiáng)機(jī)體抗腫瘤免疫應(yīng)答，特異性地清除腫瘤微小殘留病灶、抑制腫瘤生長(zhǎng)，打破免疫耐受的治療方法。

2、腫瘤免疫中免疫檢查點(diǎn)抑制劑治療的主要機(jī)制是通過抑制劑解除機(jī)體對(duì)腫瘤部位的免疫負(fù)調(diào)節(jié)從而建立抗腫瘤活性。相比之下，刺激性免疫治療靶點(diǎn)，比如cd40、icos、cd27、gitr、ox40和4-1bb則作為激動(dòng)劑來激活機(jī)體的免疫作用，在免疫反應(yīng)的早期階段即可實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤的殺傷。這些分子最先起作用的很可能是cd40，因?yàn)樗诳乖蔬f以及t細(xì)胞激活過程中起著關(guān)鍵作用。

3、早期的cd40激動(dòng)型抗體以單克隆抗體為主，同時(shí)依賴抗體fc區(qū)域的adcc效果以實(shí)現(xiàn)cd40信號(hào)的激活和增強(qiáng)對(duì)癌細(xì)胞的殺傷效果。雖然此類單克隆抗體的臨床數(shù)據(jù)顯示出良好的治療效果，但包括細(xì)胞因子釋放綜合癥和肝酶升高在內(nèi)的相關(guān)不良事件也被觀察到，這些結(jié)果表明由于cd40在淋巴細(xì)胞中的廣泛表達(dá)，其激動(dòng)型抗體的安全性有待提高。對(duì)于此，以apx005m為代表的第二代cd40激動(dòng)劑通過優(yōu)化其抗體fc區(qū)域，特異性靶向cd40和其配體結(jié)合區(qū)域從而選擇性提高fcγriib親和力并降低adcc活性，由此增強(qiáng)了交聯(lián)反應(yīng)提高激動(dòng)活性并降低由adcc帶來的毒性。雖然apx005m顯示出較好的安全性，但其治療效果并不理想。在apx005m聯(lián)合o藥及化療治療一線轉(zhuǎn)移性胰腺癌的臨床二期臨床試驗(yàn)中，apx005m聯(lián)合pd-1與化療的效果，還不及pd-1與化療的效果。由此目前以cd40為靶點(diǎn)的單克隆抗體激動(dòng)劑并沒有同時(shí)在安全性和有效性上均達(dá)到良好程度。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)目前cd40激動(dòng)型抗體存在的安全性和有效性不足的缺陷，本發(fā)明提供了新的針對(duì)cd40的特異性結(jié)合蛋白，旨在提高cd40激動(dòng)型抗體安全性的同時(shí)增強(qiáng)其有效性，通過安全地激活抗原呈遞細(xì)胞(apc)上cd40的信號(hào)傳導(dǎo)通路從而加強(qiáng)提高機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)癌細(xì)胞的殺傷作用，以達(dá)到對(duì)癌癥的治療效果。

2、本發(fā)明的一方面提供了特異性結(jié)合cd40和/或其片段的抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗體或其抗原結(jié)合片段，其包含至少一個(gè)重鏈可變區(qū)和至少一個(gè)輕鏈可變區(qū)。

3、在一些實(shí)施方式中，所述重鏈可變區(qū)包含：如seq?id?no:32-62中任一項(xiàng)所示的hcdr1；和/或如seq?id?no:63-93中任一項(xiàng)所示的hcdr2；和/或如seq?id?no:94-124中任一項(xiàng)所示的hcdr3。

4、在一些實(shí)施方式中，所述輕鏈可變區(qū)包含如seq?id?no:156-186中任一項(xiàng)所示的lcdr1；和/或如seq?id?no:187-217中任一項(xiàng)所示的lcdr2；和/或如seq?id?no:218-248中任一項(xiàng)所示的lcdr3。

5、在一些實(shí)施方式中，所述重鏈可變區(qū)包含：分別如seq?id?no:32、seq?id?no:63和seq?id?no:94所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:33、seq?id?no:64和seqid?no:95所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:34、seq?id?no:65和seq?idno:96所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:35、seq?id?no:66和seq?id?no:97所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:36、seq?id?no:67和seq?id?no:98所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:37、seq?id?no:68和seq?id?no:99所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:38、seq?id?no:69和seq?id?no:100所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:39、seq?id?no:70和seq?id?no:101所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:40、seq?id?no:71和seq?id?no:102所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:41、seq?id?no:72和seq?id?no:103所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:42、seq?id?no:73和seq?id?no:104所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:43、seq?id?no:74和seq?id?no:105所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:44、seq?id?no:75和seq?id?no:106所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:45、seq?id?no:76和seq?id?no:107所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:46、seq?id?no:77和seq?id?no:108所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:47、seq?id?no:78和seq?id?no:109所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:48、seq?id?no:79和seq?id?no:110所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:49、seq?id?no:80和seq?id?no:111所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:50、seq?id?no:81和seq?id?no:112所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:51、seq?id?no:82和seq?id?no:113所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:52、seq?id?no:83和seq?id?no:114所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:53、seq?id?no:84和seq?id?no:115所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:54、seq?id?no:85和seq?id?no:116所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:55、seq?id?no:86和seq?id?no:117所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:56、seq?id?no:87和seq?id?no:118所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:57、seq?id?no:88和seq?id?no:119所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:58、seq?id?no:89和seq?id?no:120所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:59、seq?id?no:90和seq?id?no:121所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:60、seq?id?no:91和seq?id?no:122所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:61、seq?id?no:92和seq?id?no:123所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；或分別如seq?id?no:62、seq?id?no:93和seq?id?no:124所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3。

6、在一些實(shí)施方式中，所述輕鏈可變區(qū)包含：分別如seq?id?no:156、seq?id?no:187和seq?id?no:218所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:157、seq?id?no:188和seq?id?no:219所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:158、seq?id?no:189和seq?id?no:220所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:159、seq?id?no:190和seq?id?no:221所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:160、seq?id?no:191和seq?id?no:222所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:161、seq?id?no:192和seq?id?no:223所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:162、seq?id?no:193和seq?id?no:224所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:163、seq?id?no:194和seq?id?no:225所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:164、seq?id?no:195和seq?id?no:226所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:165、seq?id?no:196和seq?id?no:227所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:166、seq?id?no:197和seq?id?no:228所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:167、seq?id?no:198和seq?id?no:229所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:168、seq?id?no:199和seq?id?no:230所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:169、seq?id?no:200和seq?id?no:231所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:170、seq?id?no:201和seq?id?no:232所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:171、seq?id?no:202和seq?id?no:233所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:172、seq?id?no:203和seq?id?no:234所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:173、seq?id?no:204和seq?id?no:235所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:174、seq?id?no:205和seq?id?no:236所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:175、seq?id?no:206和seq?id?no:237所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:176、seq?id?no:207和seq?id?no:238所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:177、seq?id?no:208和seq?id?no:239所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:178、seq?id?no:209和seq?id?no:240所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:179、seq?id?no:210和seq?id?no:241所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:180、seq?id?no:211和seq?id?no:242所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:181、seq?id?no:212和seq?id?no:243所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:182、seq?id?no:213和seq?id?no:244所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:183、seq?id?no:214和seq?id?no:245所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:184、seq?id?no:215和seq?id?no:246所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:185、seq?id?no:216和seq?id?no:247所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:186、seq?id?no:217和seq?id?no:248所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3。

7、在一些實(shí)施方式中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含：分別如seq?id?no:32、seqid?no:63和seq?id?no:94所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3及分別如seq?id?no:156、seq?idno:187和seq?id?no:218所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:33、seq?id?no:64和seq?id?no:95所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3及分別如seq?id?no:157、seq?id?no:188和seq?id?no:219所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:34、seq?id?no:65和seqid?no:96所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3及分別如seq?id?no:158、seq?id?no:189和seq?idno:220所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:35、seq?id?no:66和seq?id?no:97所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:159、seq?id?no:190和seq?id?no:221所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:36、seq?id?no:67和seq?id?no:98所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:160、seq?id?no:191和seq?id?no:222所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:37、seq?id?no:68和seq?id?no:99所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:161、seq?id?no:192和seq?id?no:223所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:38、seq?id?no:69和seq?id?no:100所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:162、seq?id?no:193和seq?id?no:224所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:39、seq?id?no:70和seq?id?no:101所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:163、seq?id?no:194和seq?id?no:225所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:40、seq?id?no:71和seq?id?no:102所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:164、seq?id?no:195和seq?id?no:226所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:41、seq?id?no:72和seq?id?no:103所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:165、seq?id?no:196和seq?id?no:227所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:42、seq?id?no:73和seq?id?no:104所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:166、seq?id?no:197和seq?id?no:228所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:43、seq?id?no:74和seq?id?no:105所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:167、seq?id?no:198和seq?id?no:229所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:44、seq?id?no:75和seq?id?no:106所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:168、seq?id?no:199和seq?id?no:230所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:45、seq?id?no:76和seq?id?no:107所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:169、seq?id?no:200和seq?id?no:231所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:46、seq?id?no:77和seq?id?no:108所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:170、seq?id?no:201和seq?id?no:232所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:47、seq?id?no:78和seq?id?no:109所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:171、seq?id?no:202和seq?id?no:233所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:48、seq?id?no:79和seq?id?no:110所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:172、seq?id?no:203和seq?id?no:234所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:49、seq?id?no:80和seq?id?no:111所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:173、seq?id?no:204和seq?id?no:235所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:50、seq?id?no:81和seq?id?no:112所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:174、seq?id?no:205和seq?id?no:236所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:51、seq?id?no:82和seq?id?no:113所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:175、seq?id?no:206和seq?id?no:237所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:52、seq?id?no:83和seq?id?no:114所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:176、seq?id?no:207和seq?id?no:238所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:53、seq?id?no:84和seq?id?no:115所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:177、seq?id?no:208和seq?id?no:239所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；分別如seq?id?no:54、seq?id?no:85和seq?id?no:116所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:178、seq?id?no:209和seq?id?no:240所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:55、seq?id?no:86和seq?id?no:117所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:179、seq?id?no:210和seq?id?no:241所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:56、seq?id?no:87和seq?id?no:118所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:180、seq?id?no:211和seq?id?no:242所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:57、seq?id?no:88和seq?id?no:119所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:181、seq?id?no:212和seq?id?no:243所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:58、seq?id?no:89和seq?id?no:120所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:182、seq?id?no:213和seq?id?no:244所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:59、seq?id?no:90和seq?id?no:121所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:183、seq?id?no:214和seq?id?no:245所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:60、seq?id?no:91和seq?id?no:122所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:184、seq?id?no:215和seq?id?no:246所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:61、seq?id?no:92和seq?id?no:123所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:185、seq?id?no:216和seq?id?no:247所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3；或分別如seq?id?no:62、seq?id?no:93和seq?id?no:124所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，及分別如seq?id?no:186、seq?id?no:217和seq?id?no:248所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3。

8、在一些實(shí)施方案中，這些cdr中可以包含氨基酸突變，并能維持所述抗體的特異性結(jié)合cd40的功能。優(yōu)選地，所述氨基酸突變?yōu)榘被崽鎿Q，所述氨基酸替換的數(shù)目可以為1-3個(gè)。

9、在一些實(shí)施方式中，所述重鏈可變區(qū)包含seq?id?no:1-31中任一項(xiàng)所示的氨基酸序列或與其包含至少80％、85％、88％、90％、92％、95％、97％、98％、99％或100％一致性的氨基酸序列。

10、在一些實(shí)施方式中，所述輕鏈可變區(qū)包含seq?id?no:125-155中任一項(xiàng)所示的氨基酸序列或與其包含至少80％、85％、88％、90％、92％、95％、97％、98％、99％或100％一致性的氨基酸序列。

11、在一些實(shí)施方式中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:1所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:125所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seqid?no:2所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:126所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:3所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:127所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:4所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:128所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:5所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:129所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:6所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:130所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:7所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:131所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:8所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:132所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:9所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:133所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:10所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:134所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?idno:11所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:135所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:12所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:136所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:13所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:137所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:14所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:138所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:15所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:139所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:16所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:140所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:17所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:141所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:18所示的重鏈可變區(qū)和如seq?idno:142所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:19所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:143所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seqid?no:20所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:144所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:21所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:145所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:22所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:146所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:23所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:147所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:24所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:148所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:25所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:149所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:26所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:150所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:27所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:151所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:28所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:152所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:29所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:153所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:30所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:154所示的輕鏈可變區(qū)；或所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含如seq?id?no:31所示的重鏈可變區(qū)和如seq?idno:155所示的輕鏈可變區(qū)。

12、在一些實(shí)施方式中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段是人源化抗體。

13、在一些實(shí)施方式中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段還包括重鏈恒定區(qū)和/或輕鏈恒定區(qū)。在一些實(shí)施方式中，所述重鏈恒定區(qū)選自higg1、higg2、higg3或higg4重鏈恒定區(qū)。在一些實(shí)施方案中，所述輕鏈恒定區(qū)可以選自κ鏈或者λ鏈。在一些實(shí)施方案中，上述特異性抗體或其抗原結(jié)合片段可以為制得的多克隆抗體或單克隆抗體。

14、在一些實(shí)施方案中，上述抗體或其抗原結(jié)合片段的fc為人igg1的fc。在一些實(shí)施方案中，上述抗體或其抗原結(jié)合片段的fc為人igg4的fc。

15、本發(fā)明的另一方面提供了一種嵌合抗原受體，其包括胞外抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域和胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域，其中所述胞外抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段。

16、本發(fā)明的又一方面提供了一種修飾的免疫細(xì)胞，其包含根據(jù)本發(fā)明所述的嵌合抗原受體。

17、本發(fā)明的又一方面提供了一種多特異性抗體，其包含兩個(gè)或兩個(gè)以上的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域，其中一個(gè)抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含根據(jù)本發(fā)明所述的特異性結(jié)合cd40和/或其片段的抗體或其抗原結(jié)合片段。

18、本發(fā)明的又一方面提供了一種用于檢測(cè)樣品中的cd40的方法，所述方法包括用根據(jù)本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段檢測(cè)樣品中的cd40的步驟。

19、在一些實(shí)施方式中，所述樣品為全血、紅血細(xì)胞濃縮物、血小板濃縮物、白細(xì)胞濃縮物、組織、骨髓吸出物、血漿、血清、腦脊液、糞便、尿液、培養(yǎng)的細(xì)胞、唾液、口腔分泌物和/或鼻腔分泌物。

20、在一種實(shí)施方式中，所述方法為非診斷目的的方法。

21、本發(fā)明的又一方面提供了一種雙特異性結(jié)合蛋白，其包含第一結(jié)構(gòu)域和第二結(jié)構(gòu)域，所述第一結(jié)構(gòu)域結(jié)合cd40或其片段，所述第二結(jié)構(gòu)域結(jié)合pd1或其片段，其中，所述第一結(jié)構(gòu)域?yàn)楸景l(fā)明所述的特異性結(jié)合cd40和/或其片段的抗體或其抗原結(jié)合片段。

22、在一些實(shí)施方式中，所述第一結(jié)構(gòu)域和/或所述第二結(jié)構(gòu)域選自igg、fab、fab’、f(ab’)2、fv或scfv的形式。

23、在一些實(shí)施方式中，所述igg、fab、fab’、f(ab’)2、fv或scfv的數(shù)量為1個(gè)或多個(gè)。

24、在一些實(shí)施方式中，所述igg的重鏈恒定區(qū)為人igg1、人igg2、人igg3或人igg4重鏈恒定區(qū)。

25、在一些實(shí)施方式中，所述第一結(jié)構(gòu)域?yàn)閕gg的形式，第二結(jié)構(gòu)域?yàn)閕gg的形式。在一些實(shí)施方式中，所述第一結(jié)構(gòu)域?yàn)閟cfv的形式，第二結(jié)構(gòu)域?yàn)閟cfv的形式。在一些實(shí)施方式中，所述第一結(jié)構(gòu)域?yàn)閕gg的形式，第二結(jié)構(gòu)域?yàn)閟cfv的形式。在一些實(shí)施方式中，所述第一結(jié)構(gòu)域?yàn)閟cfv的形式，第二結(jié)構(gòu)域?yàn)閕gg的形式。

26、在一些實(shí)施方式中，所述第一結(jié)構(gòu)域與所述第二結(jié)構(gòu)域直接連接或經(jīng)連接肽l連接形成雙特異性結(jié)合蛋白。

27、在一些實(shí)施方式中，所述第二結(jié)構(gòu)域連接在所述第一結(jié)構(gòu)域的c末端或n末端。

28、在一些實(shí)施方式中，所述雙特異性結(jié)合蛋白包含多肽鏈1和多肽鏈2，其中，所述多肽鏈1包含n’-vl1-cl1-c’所示的結(jié)構(gòu)；所述多肽鏈2包含n’-vh1-ch11-h-ch21-ch31-l-vh2-l-vl2-c’所示的結(jié)構(gòu)；或者所述多肽鏈1包含n’-vl2-cl2-c’所示的結(jié)構(gòu)；所述多肽鏈2包含n’-vh2-ch12-h-ch22-ch32-l-vh1-l-vl1-c’所示的結(jié)構(gòu)；其中，所述vl1和vh1分別為第一結(jié)構(gòu)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)，所述vl2和vh2為第二結(jié)構(gòu)域的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)，所述h為鉸鏈區(qū)，所述l為連接肽，所述cl1、ch11、ch21和ch31是第一結(jié)構(gòu)域的輕鏈恒定區(qū)和重鏈恒定區(qū)，所述cl2、ch12、ch22和ch32是第一結(jié)構(gòu)域的輕鏈恒定區(qū)和重鏈恒定區(qū)。

29、在一些實(shí)施方式中，所述連接肽為長(zhǎng)度為0-30個(gè)氨基酸的肽。

30、在一些實(shí)施方式中，所述多肽鏈1和所述多肽鏈2形成四價(jià)結(jié)構(gòu)。在一些實(shí)施方式中，所述多肽鏈1和所述多肽鏈2形成四價(jià)對(duì)稱結(jié)構(gòu)。

31、在一些實(shí)施方式中，所述的鉸鏈區(qū)h為免疫球蛋白領(lǐng)域常見的鉸鏈區(qū)，通常含大量脯氨酸，具有撓性，形成2-5個(gè)二硫鍵。

32、在一些實(shí)施方式中，所述連接肽包含如下所示的氨基酸序列：

33、h1：epkssdkthtppppp(seq?id?no:271)

34、(g2s)2：ggsggs(seq?id?no:272)

35、(g4s)3：ggggsggggsggggs(seq?id?no:273)

36、(g4s)2：ggggsggggs(seq?id?no:274)

37、gs_2：gs

38、gs_4：gsgs(seq?id?no:275)

39、gs_5：ggggs(seq?id?no:276)

40、gs_7：ggggsgs(seq?id?no:277)

41、gs_20：ggggsggggsggggsggggs(seq?id?no:278)

42、gs_25：ggggsggggsggggsggggsggggs(seq?id?no:279)

43、lh1：dkthtcppcp(seq?id?no:280)

44、g5-lh：gggggdkthtcppcp(seq?id?no:281)

45、h1_15-rt：epkssdkthtppppprt(seq?id?no:282)

46、l-gs_15-rt：lggggsggggsggggsrt(seq?id?no:283)

47、l-h1_15-rt：lepkssdkthtppppprt(seq?id?no:284)

48、kl-h1_15-rt：klepkssdkthtppppprt(seq?id?no:285)

49、kl-h1_15-as：klepkssdkthtpppppas(seq?id?no:286)

50、rt-gs_5-kl：rtggggskl(seq?id?no:287)

51、rt-gs_15-kl：rtggggsggggsggggskl(seq?id?no:288)

52、rt-gs_25-kl：rtggggsggggsggggsggggsggggskl(seq?id?no:289)

53、人igg1鉸鏈：epkscdkthtcppcp(seq?id?no:290)

54、人igg1鉸鏈：(c220s)epkssdkthtcppcp(seq?id?no:291)

55、人igg2鉸鏈：erkccvecppcp(seq?id?no:292)

56、人igg4鉸鏈：eskygppcpscp(seq?id?no:293)

57、人igg4鉸鏈(s228p)：eskygppcppcp(seq?id?no:294)。

58、在一些實(shí)施方式中，所述第二結(jié)構(gòu)域選自pd1的抗體或其抗原結(jié)合片段。

59、在一些實(shí)施方式中，所述第二結(jié)構(gòu)域包含輕鏈可變區(qū)vl和重鏈可變區(qū)vh。

60、在一些實(shí)施方式中，所述第二結(jié)構(gòu)域包含分別如seq?id?no:250、seq?id?no:251和seq?id?no:252所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，和/或分別如seq?id?no:254、seq?id?no:255和seq?id?no:256所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3。

61、在一些實(shí)施方式中，所述第二結(jié)構(gòu)域包含分別如seq?id?no:258、seq?id?no:259和seq?id?no:260所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3，和/或分別如seq?id?no:262、seq?id?no:263和seq?id?no:264所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3。

62、在一些實(shí)施方式中，所述第二結(jié)構(gòu)域包含與如seq?id?no:249或257所示的氨基酸序列包含至少80％、85％、88％、90％、92％、95％、97％、98％、99％或100％一致性的重鏈可變區(qū)。

63、在一些實(shí)施方式中，所述第二結(jié)構(gòu)域包含與如seq?id?no:253或261所示的氨基酸序列包含至少80％、85％、88％、90％、92％、95％、97％、98％、99％或100％一致性的輕鏈可變區(qū)。

64、在一些實(shí)施方式中，所述第二結(jié)構(gòu)域包含如seq?id?no:249所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:253所示的輕鏈可變區(qū)，或者所述第二結(jié)構(gòu)域包含如seq?id?no:257所示的重鏈可變區(qū)和如seq?id?no:261所示的輕鏈可變區(qū)。

65、本發(fā)明提供了一種可以同時(shí)結(jié)合并激動(dòng)cd40和結(jié)合pd1的雙特異性結(jié)合蛋白，該雙特異性分子可以激活t細(xì)胞并減少由cd40激活而引起的免疫毒性。本發(fā)明的將cd40激動(dòng)劑和pd1抗體連接在一起的雙特異性抗體結(jié)構(gòu)，包括對(duì)稱性的igg-igg，scfv-scfv等結(jié)構(gòu)以及非對(duì)稱性的結(jié)構(gòu)以及將cd40小分子激動(dòng)劑和pd1抗體連接在一起的抗體偶聯(lián)分子均可以達(dá)到類似效果。

66、在一些具體實(shí)施方式中，提供了一種由igg全長(zhǎng)cd40抗體和單鏈pd1抗體組成的雙特異性結(jié)合蛋白，其中，所述cd40全長(zhǎng)能夠特異性識(shí)別cd40、阻斷其與配體cd40l結(jié)合并激活其下游信號(hào)通路，其由可變區(qū)通過鉸鏈區(qū)連接igg4?fc區(qū)域組成；所述pd1單鏈抗體由能夠特異性識(shí)別pd1、阻斷其與配體pdl1結(jié)合并激活t細(xì)胞的pd1的輕重鏈可變區(qū)域通過連接部分連接而成；所述全長(zhǎng)cd40抗體通過連接部分連接pd1單鏈抗體。

67、根據(jù)本發(fā)明的雙特異性結(jié)合蛋白能夠特異性激活cd40l傳導(dǎo)，在體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中激活t細(xì)胞，在小鼠模型中顯著降低肝毒性并且有效抑制腫瘤生長(zhǎng)，同時(shí)提高cd40抗體的安全性和有效性。

68、本發(fā)明的又一方面提供了一種用于檢測(cè)樣品中的cd40和pd1的方法，所述方法包括用根據(jù)本發(fā)明所述的特異性結(jié)合蛋白檢測(cè)樣品中的cd40和pd1的步驟。

69、在一些實(shí)施方式中，所述樣品為全血、紅血細(xì)胞濃縮物、血小板濃縮物、白細(xì)胞濃縮物、組織、骨髓吸出物、血漿、血清、腦脊液、糞便、尿液、培養(yǎng)的細(xì)胞、唾液、口腔分泌物和/或鼻腔分泌物。

70、在一些實(shí)施方式中，所述方法為非診斷目的的方法。

71、本發(fā)明的又一方面提供了一種分離的核酸，其編碼根據(jù)本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段或所述的雙特異性結(jié)合蛋白。

72、在一些實(shí)施方式中，所述核酸分子是mrna分子。

73、本發(fā)明的又一方面提供了一種表達(dá)載體，其包含本發(fā)明所述的分離的核酸。

74、在一些實(shí)施方式中，所述表達(dá)載體可以是真核細(xì)胞表達(dá)載體和/或原核細(xì)胞表達(dá)載體，例如為逆轉(zhuǎn)錄病毒載體、慢病毒載體、噬菌體載體、腺病毒載體、腺相關(guān)載體或單純皰疹載體。

75、在一些實(shí)施方式中，所述表達(dá)載體存在于納米顆粒、脂質(zhì)體、外來體、微泡或基因槍中。

76、本發(fā)明的又一方面提供了一種宿主細(xì)胞，其包含本發(fā)明所述的分離的核酸，或所述的表達(dá)載體。

77、在一些實(shí)施方式中，所述宿主細(xì)胞為本領(lǐng)域常規(guī)的宿主細(xì)胞，只要能使所述表達(dá)載體穩(wěn)定地將所攜帶的核酸分子表達(dá)為本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段或所述的雙特異性結(jié)合蛋白。優(yōu)選地，所述宿主細(xì)胞為原核細(xì)胞和/或真核細(xì)胞，所述原核細(xì)胞優(yōu)選e.coli細(xì)胞如tg1、bl21(表達(dá)單鏈抗體或fab抗體)，所述真核細(xì)胞優(yōu)選hek293細(xì)胞或cho細(xì)胞(表達(dá)全長(zhǎng)igg抗體)。將所述表達(dá)載體轉(zhuǎn)化至宿主細(xì)胞中，即可得本發(fā)明的宿主細(xì)胞。其中所述轉(zhuǎn)化方法為本領(lǐng)域的常規(guī)轉(zhuǎn)化方法，較佳地為化學(xué)轉(zhuǎn)化法，熱激法或電轉(zhuǎn)法。

78、本發(fā)明的又一方面提供了一種抗體藥物偶聯(lián)物，其包含：根據(jù)本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段或所述的雙特異性結(jié)合蛋白；和，與所述抗體或其抗原結(jié)合片段或所述雙特異性結(jié)合蛋白共價(jià)連接的藥物。

79、在一些實(shí)施方式中，所述藥物選自化學(xué)治療劑、放射治療劑、免疫抑制劑和細(xì)胞毒性藥物。

80、本發(fā)明的又一方面提供了一種藥物組合物，其包含：根據(jù)本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，所述的雙特異性結(jié)合蛋白，或所述的抗體藥物偶聯(lián)物；以及，藥學(xué)上可接受的載體。

81、在一些實(shí)施方式中，所述藥物組合物還包含選自化學(xué)治療劑、放射治療劑、免疫抑制劑和細(xì)胞毒性藥物的治療劑。

82、在一些實(shí)施方式中，所述的藥學(xué)上可接受的載體可為本領(lǐng)域常規(guī)的載體，所述的載體可以為任意合適的生理學(xué)或藥學(xué)上可接受的藥物輔料。所述的藥物輔料為本領(lǐng)域常規(guī)的藥物輔料，優(yōu)選地包括藥學(xué)上可接受的賦形劑、填充劑或稀釋劑等。更優(yōu)選地，所述的藥物組合物包括0.01～99.99％的所述特異性結(jié)合蛋白和/或其他的小分子藥物或者抗體或多肽，以及0.01～99.99％的藥用載體，所述百分比為占所述藥物組合物的質(zhì)量百分比。

83、在一些實(shí)施方式中，所述的藥物組合物的給藥途徑可以是經(jīng)腸胃外、注射或口服給藥。所述藥物組合物可以制備成適于給藥的形式，例如固體、半固體或液體的形式，可以為水溶液、非水溶液或混懸液，粉末、片劑、膠囊、顆粒、注射劑或輸注劑的形式?？梢越?jīng)血管內(nèi)、皮下、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)、吸入、鼻內(nèi)、氣道滴注或胸腔內(nèi)滴注施用。所述藥物組合物還可以氣霧劑或噴霧劑的形式施用，例如經(jīng)鼻施用；或者，鞘內(nèi)、髓內(nèi)或心室內(nèi)施用，還可以經(jīng)透皮、經(jīng)皮、局部、腸內(nèi)、陰道內(nèi)、舌下或經(jīng)直腸施用。所述的藥物組合物可根據(jù)需要制成各種劑型，并可由醫(yī)師根據(jù)患者種類、年齡、體重和大致疾病狀況、給藥方式等因素確定對(duì)病人有益的劑量進(jìn)行施用。

84、在一些實(shí)施方式中，所述藥物組合物中的特異性結(jié)合蛋白與其他的活性成分可以同時(shí)給藥或者按順序給藥。

85、本發(fā)明的又一方面提供了根據(jù)本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段、所述的雙特異性結(jié)合蛋白、所述的分離的核酸、所述的抗體藥物偶聯(lián)物或所述的藥物組合物在制備用于預(yù)防、治療和/或診斷免疫性疾病，急性和慢性炎性疾病，以及腫瘤疾病的藥物中的應(yīng)用。

86、在一些實(shí)施方式中，所述腫瘤為乳腺癌、腎細(xì)胞癌、黑色素瘤、結(jié)腸癌，以及b細(xì)胞淋巴瘤，黑色素瘤，頭頸癌，膀胱癌，胃癌，卵巢癌，惡性肉瘤，尿路上皮癌，肝癌，食道癌，胃食管交界癌，鼻咽癌，小細(xì)胞肺癌，宮頸癌，子宮內(nèi)膜癌，胰腺癌，前列腺癌，膠質(zhì)瘤，非小細(xì)胞肺癌，急性粒細(xì)胞白血病，霍奇金淋巴瘤，皮膚鱗狀細(xì)胞癌，局部晚期和轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤中的一種或多種。

87、在一些實(shí)施方式中，所述炎性疾病為特應(yīng)性皮炎或潰瘍性結(jié)腸炎中的一種或多種。

88、在一些實(shí)施方式中，所述免疫性疾病為移植物抗宿主病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡或哮喘中的一種或多種。

89、本發(fā)明的又一方面提供了一種套裝藥盒，其包括一個(gè)或多個(gè)藥盒，所述藥盒包含根據(jù)本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段、所述的雙特異性結(jié)合蛋白、所述的抗體藥物偶聯(lián)物或所述的藥物組合物。

90、在一些實(shí)施方式中，所述套裝藥盒包括第一藥盒和第二藥盒，其中，所述第一藥盒包括根據(jù)本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段、所述的雙特異性結(jié)合蛋白、所述的抗體藥物偶聯(lián)物或所述的藥物組合物，所述第二藥盒包含選自化學(xué)治療劑、放射治療劑、免疫抑制劑和細(xì)胞毒性藥物的治療劑。

91、本發(fā)明的又一方面提供了一種給藥裝置，其包含根據(jù)本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段、所述的雙特異性結(jié)合蛋白、所述的抗體藥物偶聯(lián)物或所述的藥物組合物。

92、在一些實(shí)施方式中，所述給藥裝置是預(yù)填充注射器。

93、本發(fā)明的又一方面提供了一種預(yù)防、治療和/或診斷腫瘤疾病、急性和慢性炎性疾病和/或免疫性疾病的方法，其包括向受試者施用治療有效量的根據(jù)本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段、所述的雙特異性結(jié)合蛋白、所述的抗體藥物偶聯(lián)物或所述的藥物組合物。

94、在一些實(shí)施方式中，所述腫瘤為乳腺癌、腎細(xì)胞癌、黑色素瘤、結(jié)腸癌，以及b細(xì)胞淋巴瘤，黑色素瘤，頭頸癌，膀胱癌，胃癌，卵巢癌，惡性肉瘤，尿路上皮癌，肝癌，食道癌，胃食管交界癌，鼻咽癌，小細(xì)胞肺癌，宮頸癌，子宮內(nèi)膜癌，胰腺癌，前列腺癌，膠質(zhì)瘤，非小細(xì)胞肺癌，急性粒細(xì)胞白血病，霍奇金淋巴瘤，皮膚鱗狀細(xì)胞癌，局部晚期和轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤中的一種或多種。

95、在一些實(shí)施方式中，所述炎性疾病為特應(yīng)性皮炎或潰瘍性結(jié)腸炎中的一種或多種。

96、在一些實(shí)施方式中，所述免疫性疾病為移植物抗宿主病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡或哮喘中的一種或多種。

97、作為免疫細(xì)胞共刺激分子的cd40廣泛表達(dá)于血小板、b細(xì)胞和骨髓細(xì)胞，和其他非造血細(xì)胞，如內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞，以及某些類型的腫瘤細(xì)胞。正是由于cd40在免疫細(xì)胞中的廣泛表達(dá)以及它通過抗原呈遞細(xì)胞(apc)的活化進(jìn)而激活t細(xì)胞的功能，并且igg1?fc能夠誘導(dǎo)adcc效果導(dǎo)致cd40激動(dòng)型導(dǎo)致全身性免疫系統(tǒng)的增強(qiáng)而導(dǎo)致安全性問題，本發(fā)明的雙特異性結(jié)合蛋白使用僅能結(jié)合cd40的單鏈抗體作為cd40的激動(dòng)劑，使用減弱adcc效果的igg1?fc突變，減少因cd40激活而引起的全身性免疫增強(qiáng)，進(jìn)而增強(qiáng)安全性。在增強(qiáng)安全性同時(shí)，本發(fā)明的雙特異性抗體或其抗原結(jié)合片段將cd40激動(dòng)劑和pd1抗體連接在一起，pd1抗體既能夠作為腫瘤檢查點(diǎn)抑制劑抑制腫瘤環(huán)境對(duì)免疫系統(tǒng)的抑制效果，也能作為靶向分子將表達(dá)cd40的apc細(xì)胞定向至表達(dá)pd1的t細(xì)胞，促進(jìn)apc細(xì)胞向t細(xì)胞呈遞抗原，進(jìn)而增強(qiáng)cd40激動(dòng)劑的有效性。

98、本發(fā)明的又一方面提供了一種檢測(cè)試劑盒，所述檢測(cè)試劑盒包括本發(fā)明所述的抗體或其抗原結(jié)合片段或本發(fā)明所述的雙特異性結(jié)合蛋白。

99、在一些實(shí)施方式中，所述檢測(cè)試劑盒還包括能與所述抗體或所述雙特異性結(jié)合蛋白連接的可檢測(cè)標(biāo)記物，所述的可檢測(cè)標(biāo)記物被連接于所述抗體或所述雙特異性結(jié)合蛋白，或分離地存在于試劑盒。

100、在一些實(shí)施方式中，所述檢測(cè)試劑盒還包括能與可檢測(cè)標(biāo)記物相對(duì)應(yīng)的底物和/或使用說明書。