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米曲霉β-半乳糖苷酶突變體的高效表達(dá)及在乳品中的應(yīng)用

文檔序號:41950459發(fā)布日期:2025-05-16 14:10閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.米曲霉β-半乳糖苷酶突變體蛋白,其特征在于,所述突變體蛋白為下述任一種:

2.與權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)相關(guān)的生物材料,其特征在于,所述生物材料為下述中的任一種:

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的生物材料,其特征在于,所述重組微生物為重組酵母菌。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的生物材料,其特征在于,所述重組酵母菌為重組畢赤酵母菌。

5.根據(jù)權(quán)利要求2-4任一所述的生物材料,其特征在于,b1)所述核酸分子為如下任一所示的dna分子:

6.構(gòu)建重組畢赤酵母菌的方法,其特征在于:所述方法包括將權(quán)利要求1-5中任一所述的蛋白質(zhì)的編碼基因?qū)胨鍪荏w畢赤酵母菌。

7.權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于:所述方法還包括將類彈性蛋白肽(vpgvg)50標(biāo)簽連接到權(quán)利要求1-5中任一所述的蛋白質(zhì)的n端和/或c端,得到具有與權(quán)利要求1-5中任一所述的蛋白質(zhì)相同功能的融合蛋白質(zhì)。

8.米曲霉β-半乳糖苷酶突變體的制備方法,包括將權(quán)利要求1-5中任一所述的突變體編碼基因?qū)氲绞荏w微生物中,得到表達(dá)權(quán)利要求1-5中任一所述突變體的重組微生物,培養(yǎng)所述重組微生物,從所述發(fā)酵產(chǎn)物中得到米曲霉β-半乳糖苷酶突變體。

9.權(quán)利要求1所述的突變體蛋白,或權(quán)利要求2-5任一所述的生物材料或權(quán)利要求6-8任一所述的方法在如下任一種應(yīng)用:

10.一種零乳糖無蔗糖酸奶的制備方法,包括在原料乳中加入乳清粉,接種酸奶發(fā)酵劑時(shí)加入權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì),得到零乳糖無蔗糖酸奶。


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了米曲霉β?半乳糖苷酶突變體的高效表達(dá)及在乳品中的應(yīng)用。本發(fā)明屬于酶工程技術(shù)領(lǐng)域以及乳制品加工技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及米曲霉β?半乳糖苷酶突變體的高效表達(dá)及在乳品中的應(yīng)用。本發(fā)明的突變體蛋白可為如下:A1)氨基酸序列是SEQ?ID?No.2的蛋白質(zhì);A2)在A1)的N端和/或C端連接標(biāo)簽得到的具有相同功能的融合蛋白質(zhì)。突變體蛋白在5L發(fā)酵罐中高密度發(fā)酵,發(fā)酵液的酶活力可達(dá)4628U/mL,突變酶回收率提高1.7倍。與野生型相比,突變體最適pH由4.5提升至5.5、最適溫度由60℃下降至50℃,乳糖水解效率提高11%,更適用于低/零乳糖乳制品的生產(chǎn)工藝。

技術(shù)研發(fā)人員:江正強(qiáng),李樹森,苗妙,劉巨龍,閆巧娟,孫二娜
受保護(hù)的技術(shù)使用者:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2025/5/15
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