本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥，具體涉及一種slamf7(信號淋巴細胞激活分子成員7)在病理性心肌肥厚診斷和治療中的應用。

背景技術：

1、病理性心肌肥厚是一種由于長期血流動力學負荷增加或神經(jīng)-內(nèi)分泌系統(tǒng)激活等原因引起的心肌異常增厚和心腔擴大的現(xiàn)象。雖然適度的心肌肥厚可作為代償機制短期內(nèi)增強心臟泵血功能，但長期病理性肥厚會導致心臟收縮和舒張功能下降，最終發(fā)展為心力衰竭甚至死亡。目前，針對病理性心肌肥厚的治療手段主要包括藥物治療和手術干預，但現(xiàn)有藥物(如β受體阻滯劑、ace抑制劑等)多以抑制癥狀為主，并未能有效逆轉(zhuǎn)心肌肥厚的病理進程。因此，開發(fā)能夠靶向作用于心肌肥厚分子機制并具有良好安全性的新型治療策略，已成為當前心血管領域的研究重點。

2、免疫炎癥在心肌肥厚發(fā)生發(fā)展中起著關鍵作用。炎癥細胞的浸潤，尤其是巨噬細胞、t淋巴細胞和中性粒細胞，會分泌多種促炎細胞因子以及趨化因子，這些分子通過激活多個信號通路(如nf-κb、mapk、jak/stat等)促使心肌細胞增殖、肥厚和纖維化。免疫炎癥不僅通過炎癥細胞和炎癥因子影響心肌肥厚，還與心肌細胞內(nèi)的代謝紊亂密切相關，脂肪酸氧化代謝的改變和糖代謝的重編程，促使細胞在低氧環(huán)境下產(chǎn)生更多的活性氧(ros)，進一步激活nf-κb等轉(zhuǎn)錄因子，增強炎癥反應并促進心肌肥厚。慢性免疫炎癥環(huán)境不僅促進了心肌肥厚，還加速了心力衰竭的進程。因此，靶向免疫炎癥通路可能為治療病理性心肌肥厚提供新的治療策略。

3、slamf7(信號淋巴細胞激活分子成員7)是一種免疫受體，在免疫炎癥的調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用，尤其是在抑制過度免疫反應方面。其廣泛表達于自然殺傷(nk)細胞、巨噬細胞及某些t細胞亞群。研究表明，slamf7通過與其配體的相互作用，激活一系列抑制性信號通路，如通過pi3k/akt和nf-κb途徑，抑制免疫細胞的過度激活與細胞因子的釋放。在慢性免疫炎癥中，slamf7的作用有助于防止免疫系統(tǒng)的失控反應，降低炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生，從而減輕組織損傷。例如，slamf7在類風濕關節(jié)炎和系統(tǒng)性紅斑狼瘡等自身免疫疾病中，通過調(diào)控免疫細胞的功能，抑制t細胞和b細胞的過度激活，恢復免疫穩(wěn)態(tài)。近期研究還表明，靶向slamf7可能為免疫炎癥性疾病提供新的治療策略，尤其是在控制免疫過度反應和促進免疫耐受方面，具有重要的臨床應用潛力。然而，slamf7是否通過調(diào)節(jié)免疫炎癥反應進而參與病理性心肌肥厚發(fā)生發(fā)展，尚未見報道?；诖?，本發(fā)明的目的是以slamf7為靶點，揭示slamf7對于臨床上壓力負荷引起的病理性心肌肥厚的作用機制，探究slamf7在病理性心肌肥厚診斷和治療中的應用前景。

技術實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明研究表明，slamf7在病理性心肌肥厚小鼠模型的心臟組織和血清中表達顯著降低，且slamf7基因敲除小鼠相較于正常對照小鼠明顯促進tac誘導的小鼠心肌肥厚。進一步的機制研究揭示slamf7主要通過增強巨噬細胞向促炎型噬細胞轉(zhuǎn)化，進而加劇炎癥反應，引起心肌肥厚表型。本發(fā)明還發(fā)現(xiàn)通過外源性補充slamf7重組蛋白，能夠顯著減輕心肌肥厚和纖維化及免疫炎癥。上述研究表明slamf7有潛力成為一種新型的心肌肥厚診斷和治療靶點。

2、本發(fā)明包括如下技術方案：

3、在本發(fā)明的第一方面，本發(fā)明提供一種slamf7和/或檢測slamf7的物質(zhì)在如下至少一項中的應用：

4、a1)在制備和/或篩選用于診斷或輔助診斷病理性心肌肥厚的產(chǎn)品中的應用；

5、a2)在制備和/或篩選用于評價或輔助評價病理性心肌肥厚治療效果的產(chǎn)品中的應用。

6、在本發(fā)明的一些實施方式中，所述產(chǎn)品包括但不限于試劑、試紙、膜條、芯片、試劑盒或檢測平臺。

7、在本發(fā)明的一些實施方式中，所述檢測slamf7的物質(zhì)選自用于檢測待測樣品中slamf7表達水平的物質(zhì)。所述待測樣品中slamf7的表達水平與心肌肥厚的發(fā)生或嚴重程度呈負相關。

8、在本發(fā)明的一些實施方式中，所述待測樣品包括但不限于血清、血漿、全血、尿液、心包積液或心臟組織。

9、在本發(fā)明的具體實施方式中，所述檢測slamf7的物質(zhì)選自通過rt-pcr法、rt-qpcr法、生物芯片檢測法、dna印跡法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(elisa)、免疫印跡法(western?blot)、免疫組化法(ihc)、免疫熒光法、熒光染料法檢測slamf7蛋白表達水平或基因表達水平所需的任何試劑。

10、在本發(fā)明的一些具體實施方式中，所述檢測slamf7的物質(zhì)為通過rt-pcr法或rt-qpcr法檢測slamf7基因表達水平的試劑。

11、在本發(fā)明的一些具體實施方式中，所述檢測slamf7的物質(zhì)為通過免疫印跡法(western?blot)檢測slamf7蛋白表達水平的試劑。

12、在本發(fā)明的一些具體實施方式中，所述檢測slamf7的物質(zhì)為通過免疫組化法(ihc)、免疫熒光法或熒光染料法檢測slamf7蛋白表達水平的試劑。

13、在本發(fā)明中，所述用于檢測slamf7的物質(zhì)是本領域技術人員根據(jù)具體檢測方法容易獲得的試劑，可通過商購途徑獲得，或可自行制備獲得。本發(fā)明對具體操作中使用的具體試劑不做限定。

14、在本發(fā)明的第二方面，本發(fā)明提供一種slamf7作為靶點在如下至少一項中的應用：

15、b1)在制備和/或篩選用于預防病理性心肌肥厚的藥物中的應用；

16、b2)在制備和/或篩選用于治療病理性心肌肥厚的藥物中的應用；

17、b3)在制備和/或篩選用于調(diào)節(jié)病理性心肌肥厚引起的免疫炎癥的藥物中的應用。

18、所述藥物具有以下至少一種功能：

19、c1)改善心臟收縮功能；

20、c2)改善心臟肥厚表型；

21、c3)減輕心臟炎癥反應。

22、在本發(fā)明的具體實施方式中，所述改善心臟收縮功能表現(xiàn)為左心室射血分數(shù)(lvef)和左心室縮短分數(shù)(lvfs)增加。

23、在本發(fā)明的具體實施方式中，所述改善心臟肥厚表型表現(xiàn)為減少心臟大小，縮小心肌細胞橫截面積。

24、在本發(fā)明的具體實施方式中，所述減輕心臟炎癥反應表現(xiàn)為心臟內(nèi)促炎細胞因子(如il-1β、il-6、tnf-α)水平降低、cd68+ccr2+促炎型巨噬細胞浸潤減少。

25、在本發(fā)明的第三方面，本發(fā)明提供一種slamf7蛋白和/或slamf7促進劑在如下至少一項中的應用：

26、d1)在制備和/或篩選用于預防病理性心肌肥厚的藥物中的應用；

27、d2)在制備和/或篩選用于治療病理性心肌肥厚的藥物中的應用；

28、d3)在制備和/或篩選用于調(diào)節(jié)病理性心肌肥厚引起的心臟炎癥的藥物中的應用。

29、本發(fā)明所述的slamf7蛋白選自slamf7天然蛋白、slamf7重組蛋白或slamf7蛋白活性片段。

30、優(yōu)選地，所述slamf7蛋白選自slamf7重組蛋白，所述slamf7重組蛋白包括與slamf7蛋白序列具有0-3個氨基酸添加、缺失或取代但活性相同的蛋白、經(jīng)修飾的slamf7蛋白(如peg化slamf7蛋白)、slamf7蛋白二聚體或多聚體。

31、所述slamf7重組蛋白可通過商業(yè)途徑購買得到，或者自行制備得到。在slamf7蛋白序列已知的前提下，通過現(xiàn)有技術制備得到重組蛋白是本領域技術人員知曉的技術手段，本發(fā)明對重組蛋白的制備方法，制備過程中使用的引物或載體不做具體限定。在本發(fā)明的具體實施方式中，所述的slamf7重組蛋白是通過商購途徑獲得。

32、更進一步地，所述slamf7蛋白還包括slamf7蛋白衍生物，所述slamf7蛋白衍生物選自如下中的至少一種：

33、e1)藥學上可接受的鹽；

34、e2)藥學上可接受的修飾形式。

35、具體的，所述藥學上可接受的鹽包括金屬鹽、銨鹽、與無機酸形成的鹽、與有機堿形成的鹽、與有機酸形成的鹽、與堿性氨基酸形成的鹽、與酸性氨基酸形成的鹽中的至少一種。

36、優(yōu)選地，所述金屬鹽包括堿金屬鹽或堿土金屬鹽，堿金屬鹽包括鈉鹽、鉀鹽中的至少一種。

37、優(yōu)選地，所述與無機酸形成的鹽包括與下列無機酸形成的鹽：鹽酸、氫溴酸、硝酸、硫酸、磷酸中的至少一種。

38、優(yōu)選地，所述與有機堿形成的鹽包括與下列有機堿形成的鹽：三甲胺、三乙胺、吡啶、甲基吡啶、2,6-二甲基吡啶、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、環(huán)己胺、二環(huán)己基胺、n,n-二芐基乙二胺中的至少一種。

39、優(yōu)選地，所述與有機酸形成的鹽包括與下列有機酸形成的鹽：甲酸、乙酸、三氟乙酸、苯二酸、富馬酸、草酸、酒石酸、馬來酸、枸櫞酸、琥珀酸、蘋果酸、甲磺酸、苯磺酸、對甲苯磺酸中的至少一種。

40、優(yōu)選地，所述與堿性氨基酸形成的鹽包括與下列堿性氨基酸形成的鹽：精氨酸、賴氨酸、鳥氨酸中的至少一種。

41、優(yōu)選地，所述與酸性氨基酸形成的鹽包括與下列酸性氨基酸形成的鹽：門冬氨酸、谷氨酸中的至少一種。

42、具體的，所述藥學上可接受的修飾形式包括磷酸化、?；?、糖基化、泛素化、乙酰化、甲基化、硫酸化、磷脂化中的至少一種。

43、本發(fā)明所述的slamf7促進劑選自提高slamf7水平的物質(zhì)、增強slamf7活性的物質(zhì)和/或延緩slamf7代謝的物質(zhì)。所述slamf7選自以下物質(zhì)中的一種：slamf7基因、slamf7的mrna、slamf7的cdna、slamf7蛋白或其中任一種的活性片段。

44、在本發(fā)明的具體實施方式中，所述slamf7促進劑選自：編碼slamf7蛋白的核酸片段、slamf7過表達載體、攜帶slamf7基因或其過表達載體的細胞或病毒、攜帶slamf7基因的納米顆粒、slamf7蛋白微球、包裹slamf7的脂質(zhì)體、攜帶slamf7的細胞外囊泡。

45、在本發(fā)明的一些實施方式中，所述攜帶slamf7或其過表達載體的病毒選自腺病毒、腺相關病毒或慢病毒。

46、本發(fā)明旨在從免疫調(diào)控機制的角度探討slamf7在病理性心肌肥厚中的作用和機制。首先，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)slamf7在病理性心肌肥厚模型中表達顯著降低，slamf7與病理性心肌肥厚呈負相關，因此slamf7可作為生物標志物用于病理性心肌肥厚的診斷和療效評估。其次，本發(fā)明通過slamf7基因敲除和slamf7重組蛋白的干預，研究其在病理性心肌肥厚中的功能。初步結(jié)果顯示，slamf7敲除顯著加劇了tac誘導的心肌肥厚，并增加了促炎巨噬細胞的浸潤，slamf7重組蛋白則能顯著改善或逆轉(zhuǎn)心肌肥厚的病理變化。本發(fā)明的研究結(jié)果證實了科學假設：slamf7通過調(diào)節(jié)巨噬細胞的反應參與病理性心肌肥厚的發(fā)生和發(fā)展。

47、本發(fā)明所述的研究涉及小鼠主動脈弓縮窄模型，結(jié)合組織學染色、流式細胞術和免疫熒光染色等技術，方法可靠且驗證充分。

48、本發(fā)明預料不到地發(fā)現(xiàn)，slamf7重組蛋白能夠抑制病理性心肌肥厚和重塑。相較于傳統(tǒng)藥物，slamf7重組蛋白能夠直接作用于基質(zhì)微環(huán)境，精準調(diào)控病理性信號通路，從而實現(xiàn)更為有效的治療效果。其次，slamf7重組蛋白具有良好的生物相容性和較低的毒性風險，為長期使用提供了安全保障。此外，隨著蛋白工程和遞送技術的進步，slamf7重組蛋白的穩(wěn)定性、體內(nèi)半衰期及靶向遞送效率均得到了顯著提高，從而進一步增強了其臨床轉(zhuǎn)化的可能性?？傊?，這一創(chuàng)新性的治療策略不僅有望填補現(xiàn)有治療手段的空白，還可能在更廣泛的心血管疾病治療領域帶來深遠影響。