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一種快速鑒定暗褐脈柄牛肝菌同核菌株交配型的引物及方法與流程

文檔序號:41956638發(fā)布日期:2025-05-20 16:50閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種快速鑒定暗褐脈柄牛肝菌同核體菌株交配型的引物,其特征在于,包括:第一引物對、第二引物對、第三引物對、第四引物對、第五引物對、第六引物對、第七引物對、第八引物對、第九引物對、第十引物對中的一對或多對;

2.一種快速鑒定暗褐脈柄牛肝菌同核體菌株交配型的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包括如權(quán)利要求1所述引物的任意一對或多對。

3.一種快速鑒定暗褐脈柄牛肝菌同核體菌株交配型的試紙條,其特征在于,所述試紙條包括如權(quán)利要求1所述的引物中任意一對或多對。

4.一種快速鑒定暗褐脈柄牛肝菌同核體菌株交配型的方法,其特征在于,包括以下步驟:

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的快速鑒定暗褐脈柄牛肝菌同核體菌株交配型的方法,其特征在于,所述對菌絲體進行基因組dna提取是通過使用高效植物基因組dna提取試劑盒對菌絲體進行基因組dna提取。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的快速鑒定暗褐脈柄牛肝菌同核體菌株交配型的方法,其特征在于,所述對菌絲體進行基因組dna提取是通過ctab法提??;該ctab法提取基因組dna具體步驟為:

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的快速鑒定暗褐脈柄牛肝菌同核體菌株交配型的方法,其特征在于,所述pcr擴增的反應體系包括:pcr?mix?45μl、正向引物2μl、反向引物2μl、dna模板1μl。

8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的快速鑒定暗褐脈柄牛肝菌同核體菌株交配型的方法,其特征在于,所述pcr擴增的反應體系為:50ng/μl的模板1μl,25mm的mgcl2?5μl,10mm的dntps?1μl,6μm的引物各1μl,5u/μl的dnataq酶0.2μl,10×pcr反應緩沖液5μl,去離子水35.8μl。

9.根據(jù)權(quán)利要求7-8任一所述的快速鑒定暗褐脈柄牛肝菌同核體菌株交配型的方法,其特征在于,所述pcr擴增的反應程序為:94~98℃預變性2min,接下來94~98℃變性10~30s,引物退火溫度10~30s,72℃延伸10~30s,一共進行35個循環(huán),最后72℃延伸5~10min。


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種鑒定暗褐脈柄牛肝菌同核菌株交配型的引物及方法,涉及生物技術(shù)領域,能夠快速準確地鑒定暗褐脈柄牛肝菌同核菌株的交配型,從而提高雜交育種工作效率。該引物包括第一引物對、第二引物對、第三引物對、第四引物對、第五引物對、第六引物對、第七引物對、第八引物對、第九引物對、第十引物對中的一對或多對,其中10對引物分別具有如序列表中SEQ?ID?NO.1至SEQ?ID?NO.20所示序列。本發(fā)明主要通過使用上述10對引物或其中部分引物對待測同核體菌株及其親本異核菌株的基因組特定區(qū)域進行擴增測序,并利用其中的SNP分子標記,判定該同核體菌株的交配型。

技術(shù)研發(fā)人員:曹旸,柴念念,紀開萍,陶玲,王秋蘭,高麗霞
受保護的技術(shù)使用者:貴州宏臻菌業(yè)投資發(fā)展有限公司
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2025/5/19
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